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原文传递一种基于超高液相色谱对棉花花朵多胺含量测定的方法

专利名称：	一种基于超高液相色谱对棉花花朵多胺含量测定的方法
摘要：	本发明公开了一种基于超高液相色谱对棉花花朵多胺含量测定的方法，包括以下步骤：(1)取棉花花朵，加入液氮研磨成粉，然后加入果胶酶、纤维素酶和高氯酸溶液进行浸提处理，浸提处理后，加入pvpp进行吸附处理，吸附处理后，依次进行超声处理和离心处理，然后取离心处理所得上清液，加入苯甲酰氯和NaoH溶液进行酰化固定，酰化固定后加入饱和Nacl溶液，混合后，加入乙醚进行萃取，然后离心处理，再取离心处理所得乙醚相，干燥后，用甲醇进行洗脱处理，洗脱处理所得洗脱液经过过滤后即为待测样品；(2)对待测样品使用超高液相色谱法进行检测。本发明多胺提取效率高，测定结果更加精确。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	安徽;34
申请人：	安徽农业大学
发明人：	李大辉;李世周;戴誉;高俊山;赵钢;俞贤涛;周浩;谢勇飞
专利状态：	有效
申请日期：	2019-04-08T00:00:00+0800
发布日期：	2019-06-07T00:00:00+0800
申请号：	CN201910276706.3
公开号：	CN109856290A
代理机构：	合肥兴东知识产权代理有限公司
代理人：	王伟
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	230036 安徽省合肥市蜀山区长江西路130号
主权项：	1.一种基于超高液相色谱对棉花花朵多胺含量测定的方法，其特征在于：包括以下步骤： (1)供试品的准备取棉花花朵，加入液氮研磨成粉，然后加入果胶酶、纤维素酶和高氯酸溶液进行浸提处理，浸提处理后，加入pvpp进行吸附处理，吸附处理后，依次进行超声处理和离心处理，然后取离心处理所得上清液，加入苯甲酰氯和NaoH溶液进行酰化固定，酰化固定后加入饱和Nacl溶液，混合后，加入乙醚进行萃取，然后离心处理，再取离心处理所得乙醚相，干燥后，用甲醇进行洗脱处理，洗脱处理所得洗脱液经过过滤后即为待测样品； (2)供试品的检测对待测样品使用超高液相色谱法进行检测。 2.如权利要求1所述的基于超高液相色谱对棉花花朵多胺含量测定的方法，其特征在于：果胶酶的加入量为棉花花朵重量的0.18％～0.22％，纤维素酶的加入量为棉花花朵重量的0.12％～0.18％，高氯酸溶液的浓度为4.5％～5.5％，浸提处理的料液比为1:12～1:18。 3.如权利要求1或2所述的基于超高液相色谱对棉花花朵多胺含量测定的方法，其特征在于：浸提处理的条件为pH5.2～5.8、温度42℃～48℃、时间5h。 4.如权利要求1或2所述的基于超高液相色谱对棉花花朵多胺含量测定的方法，其特征在于：超声处理的条件为功率120w～180w、时间60min。 5.如权利要求1或2所述的基于超高液相色谱对棉花花朵多胺含量测定的方法，其特征在于：苯甲酰氯的加入量为上清液体积的3％，NaoH溶液的浓度为2mol/l，加入量为上清液体积的2倍，饱和Nacl溶液的加入量为上清液体积的4倍。 6.如权利要求1或2所述的基于超高液相色谱对棉花花朵多胺含量测定的方法，其特征在于：酰化固定的条件为温度35℃～40℃、时间40min。 7.如权利要求1或2所述的基于超高液相色谱对棉花花朵多胺含量测定的方法，其特征在于：干燥采用N2吹干。 8.如权利要求1或2所述的基于超高液相色谱对棉花花朵多胺含量测定的方法，其特征在于：第一次离心处理的条件为转速6000r/min、时间25min，第二次离心处理的条件为转速5000r/min、时间5min。 9.如权利要求1或2所述的基于超高液相色谱对棉花花朵多胺含量测定的方法，其特征在于：检测采用的色谱条件为：色谱柱Agilent XDB-C18反相柱，尺寸4.6×250mm；流动相甲醇和水，体积比为甲醇:水＝70:30。 10.如权利要求1或2所述的基于超高液相色谱对棉花花朵多胺含量测定的方法，其特征在于：检测采用的色谱条件为：流速1mL/min；检测柱温30℃；检测波长230nm；保留时间20min。
所属类别：	发明专利