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原文传递一种检测蜂蜜中甘油含量的测定方法

专利名称：	一种检测蜂蜜中甘油含量的测定方法
摘要：	本发明提供了一种检测蜂蜜中甘油含量的测定方法，将蜂蜜先用乙醇溶解，然后将蜂蜜乙醇溶液分散在微粉硅胶中，经过乙腈提取、浓缩、富集，用流动相溶解富集物，用高效液相色谱法，采用色谱柱分离，以赤藓糖醇为内标，测定甘油含量。该方法前处理方法简单，色谱分离度好，无干扰，使用内标法定量，结果准确可靠，方法灵敏度好，检测限达到20mg/kg。可满足小微企业在日常工作中对蜂蜜中的甘油含量进行控制，也可以为检测其他产品中甘油时样品浓缩与净化方法提供参考。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	浙江;33
申请人：	杭州碧于天保健品有限公司
发明人：	周萍
专利状态：	有效
申请日期：	2019-03-27T00:00:00+0800
发布日期：	2019-06-14T00:00:00+0800
申请号：	CN201910237161.5
公开号：	CN109884211A
代理机构：	杭州云睿专利代理事务所(普通合伙)
代理人：	杨淑芳
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	311500 浙江省杭州市桐庐县经济开发区桑园路18号
主权项：	1.一种检测蜂蜜中甘油含量的测定方法，将蜂蜜先用乙醇溶解，然后将蜂蜜乙醇溶液分散在微粉硅胶中，经过乙腈提取、浓缩、富集，用流动相溶解富集物，用高效液相色谱法，采用色谱柱分离，以赤藓糖醇为内标，测定甘油含量。 2.根据权利要求1所述的检测蜂蜜中甘油含量的测定方法，其特征在于包括如下步骤： S1.标准溶液配制赤藓糖醇使用液：赤藓糖醇用95％乙醇配制；甘油贮备标准溶液：甘油用双重蒸馏水稀释配制；甘油工作标准溶液：吸取甘油贮备标准溶液用流动相配制； S2.供试品溶液制备称取蜂蜜样品，加赤藓糖醇使用液，加乙醇，加微粉硅胶，搅拌充分分散成细微颗粒，沸水浴蒸干，加乙腈，混匀，超声，离心，吸取上清液，旋转蒸发至干，加流动相，超声，过滤，得到供试品溶液； S3.阴性基质标准曲线工作溶液的制备称取蜂蜜样品，加赤藓糖醇使用液，加入甘油工作标准液，加入乙醇，搅拌均匀至完全溶解，加入微粉硅胶，搅拌充分分散成细微颗粒，沸水浴蒸干，加乙腈，混匀，超声，离心，吸取上清液，旋转蒸发至干，加流动相，超声，过滤，得到阴性基质标准曲线工作溶液； S4.液相色谱分析条件色谱柱:Kromasil100-5-NH2 4.6mm×250mm×5μm或等效色谱柱；流动相:90％乙腈水溶液；流速:1.0mL/min；柱温:30℃；检测室温度:35℃；进样量:40μL； S5.测定用阴性基质标准曲线工作溶液、供试品溶液分别进样，以甘油与赤藓糖醇峰面积比值为纵坐标，以标准工作溶液浓度为横坐标，绘制标准工作曲线，用标准工作曲线对样品进行定量。 3.根据权利要求2所述的检测蜂蜜中甘油含量的测定方法，其特征在于所述的流动相为乙腈水溶液，体积浓度为70-100％。 4.根据权利要求2所述的检测蜂蜜中甘油含量的测定方法，其特征在于所述的赤藓糖醇使用液的浓度为50mg/mL；所述甘油贮备标准溶液的浓度为200mg/mL；所述甘油工作标准溶液的浓度为2.5mg/mL、10mg/mL。 5.根据权利要求2所述的检测蜂蜜中甘油含量的测定方法，其特征在于S2供试品溶液制备中，蜂蜜样品为5.00g，赤藓糖醇使用液500μL，乙醇6mL，微粉硅胶3.5g，乙腈20mL，超声30min，离心3000rpm5min，1mL流动相。 6.根据权利要求2所述的检测蜂蜜中甘油含量的测定方法，其特征在于S3阴性基质标准曲线工作溶液的制备中，称取5份蜂蜜样品5.00g，各加入赤藓糖醇使用液500μL，各加入2.5mg/mL甘油工作标准液100μL、200μL，加入10mg/mL甘油工作标准液100μL、200μL、500μL，各加入乙醇6mL，微粉硅胶3.5g，搅拌充分分散成细微颗粒，于100℃下沸水浴蒸干，转入50mL塑料离心管中，加入乙腈20mL，混匀，超声30min，离心3000rpm5min，吸取上清液，过滤于50mL玻璃离心管中，残渣中再加入乙腈10mL重复提取一次，过滤，合并过滤液，旋转蒸发至干，加1mL流动相，超声溶解，经0.22μm滤膜过滤，得到阴性基质标准曲线工作溶液，相当于标准溶液系列浓度为250mg/L、500mg/L、1000mg/L、2000mg/L、5000mg/L。
所属类别：	发明专利