详情

原文传递离子液体结合PB设计和BBD响应面法优化提取补骨脂中7个活性成分的方法

专利名称：	离子液体结合PB设计和BBD响应面法优化提取补骨脂中7个活性成分的方法
摘要：	本发明公开一种利用离子液体结合PB设计和BBD响应面法优化提取补骨脂中补骨脂素、异补骨脂素、新补骨脂异黄酮、补骨脂甲素、补骨脂定、补骨脂乙素和补骨脂二氢黄酮甲醚7种活性成分的方法。所述方法中以7个活性成分的总萃取量为指标，采用离子液体结合PB设计和BBD响应面法进行提取考察，从而得到补骨脂中7个活性成分的最佳提取工艺为：离子液体浓度0.6 M/L、乙醇体积75%、固液比1：40、粉碎目数20目、超声时间20 min、离心转速3000 r/min、超声功率300 W。在此条件下，补骨脂中7个活性成分的提取量为18.90 mg/g（n=3），与模型预测值相近，确定了补骨脂成分提取的工艺。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	河南;41
申请人：	河南大学
发明人：	李昌勤;康文艺;马常阳;王金梅;史梦珺;牛云;刘存宇
专利状态：	有效
申请日期：	2019-04-02T00:00:00+0800
发布日期：	2019-07-05T00:00:00+0800
申请号：	CN201910261722.5
公开号：	CN109975456A
代理机构：	郑州联科专利事务所(普通合伙)
代理人：	时立新;张丽
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	475001 河南省开封市明伦街85号
主权项：	1.离子液体结合PB设计和BBD响应面法优化提取补骨脂中7个活性成分的方法，其特征在于，所述7个活性成分为：补骨脂素、异补骨脂素、新补骨脂异黄酮、补骨脂甲素、补骨脂定、补骨脂乙素和补骨脂二氢黄酮甲醚，具体优化过程如下：（1）以7个化合物的总提取量为指标，首先选择合适的溶剂来溶解离子液体以及确定最佳的萃取剂类型；（2）在（1）的基础上，通过单因素试验确定提取条件的因素水平，以单因素试验得到的因素水平为基础，根据PB试验原则进行试验设计筛选显著性因素；（3）根据步骤（2）的试验结果，确定乙醇体积、固液比、粉碎目数和离心转速为显著性因素，选取乙醇体积X1、固液比X2、粉碎目数X3和离心转速X4为响应面模型的自变量，固定离子液体浓度、超声时间、超声功率分别为0.6 mol/L、20 min和400 W，利用Design-Expert8.0.6软件根据BBD试验原则进行试验设计；并根据试验数据进行多元回归分析，建立二次多元回归方程： Y =13.82-0.59 X1+0.76 X2-1.41 X3-0.077 X4-0.61 X1 X2+0.51 X1 X3+0.25 X1 X4-1.18 X2 X3+0.30 X2X4+0.020 X3 X4-1.00 X12-0.54 X22+1.80 X32+0.16 X42，X1的单位为v%，X2的单位为g/mL，X3的单位为目，X4的单位为r/min；（4）对二次多元回归模拟方程进行方差分析和显著性分析，根据对回归模拟方程失拟的P值检验失拟是否显著，确定二次回归模方程是否适当，根据显著性检验，确定回归方程是否显著，根据R2，确定模型的预测价值；（5）利用Design-Expert 8.0.6软件根据二次多元回归方程进行绘图，分析自变量和响应值的关系，得到回归方程的响应面图，从而得到补骨脂中7个活性成分的最佳提取条件。 2.如权利要求1所述的离子液体结合PB设计和BBD响应面法优化提取补骨脂中7个活性成分的方法其特征在于，所述步骤（1）中，分别以水、甲醇、乙腈和70%乙醇作为溶剂对补骨脂进行提取，筛选出70%乙醇对目标分析物的提取率最好，以70%乙醇作为溶剂，比较［BMIM］BF4/70%乙醇，［BMIM］Br/70%乙醇，［BMIM］PF6/70%乙醇，［HMIM］PF6/70%乙醇4种离子液体对目标分析物的萃取量，最终确定［HMIM］PF6/70%乙醇为最佳萃取剂。 3.如权利要求1所述的离子液体结合PB设计和BBD响应面法优化提取补骨脂中7个活性成分的方法，其特征在于，所述步骤（2）中，以萃取剂浓度A、乙醇体积B、固液比C、粉碎目数D、超声时间E、离心转速F、超声功率G 7个因子进行单因素试验，并利用Design-Expert8.0.6 软件根据PB实验原则进行实验设计，根据实验数据进行回归分析，获得多元一次回归方程为：Y =15.53+1.54A-0.99B-1.03C-2.67D-0.35E-0.59F-0.57G，对该方程进行方差分析和显著性分析，筛选出影响显著的因子乙醇体积、固液比、粉碎目数和离心转速。 4.如权利要求1所述的离子液体结合PB设计和BBD响应面法优化提取补骨脂中7个活性成分的方法，其特征在于，7个活性成分的萃取量的检测过程为：精密称取20目补骨脂粉末，精密称定，精密加入最佳萃取剂，超声萃取，离心后，吸取上层清液，经0.22 μm微孔滤膜过滤，取续滤液，即得供试品溶液；将供试品溶液用高效液相色谱仪在254nm处检测峰面积，与补骨脂素、异补骨脂素、新补骨脂异黄酮、补骨脂甲素、补骨脂定、补骨脂乙素和补骨脂二氢黄酮甲醚标准曲线比较，计算补骨脂素、异补骨脂素、新补骨脂异黄酮、补骨脂甲素、补骨脂定、补骨脂乙素和补骨脂二氢黄酮甲醚的萃取量。 5.如权利要求1所述的离子液体结合PB设计和BBD响应面法优化提取补骨脂中7个活性成分的方法，其特征在于，所述步骤（5）中得到补骨脂的最佳提取条件是：离子液体浓度0.6mol/L、乙醇体积75%、固液比1:40、粉碎目数20目、超声时间20 min、离心转速 3000 r/min、超声功率300 W。 6.一种提取补骨脂中7个活性成分的方法，其特征在于，所述7个活性成分为：补骨脂素、异补骨脂素、新补骨脂异黄酮、补骨脂甲素、补骨脂定、补骨脂乙素和补骨脂二氢黄酮甲醚，具体提取过程如下：将干燥的补骨脂粉碎得到补骨脂粉末，加入萃取剂中，室温120~500W超声萃取10~60min，超声萃取结束后，3000~9000r/min离心，取上清液即得；所述萃取剂由离子液体与乙醇混合组成，所述离子液体为 [BMIM］BF4、［BMIM］PF6、［HMIM］PF6或［BMIM］Br，所述乙醇为40v%以上乙醇，萃取剂中离子液体的浓度为0.2~1.6mol/L，补骨脂与萃取剂按照固液比1g：（5－120） mL进行添加，补骨脂粉末目数为10~90目。 7.根据权利要求6所述提取补骨脂中7个活性成分的方法，其特征在于，所述提取过程如下：将干燥的补骨脂粉碎得到补骨脂粉末，加入萃取剂中，室温200~300W超声萃取10~30min，超声萃取结束后，3000~5000r/min离心，取上清液即得；所述萃取剂由离子液体与乙醇混合组成，所述离子液体为 [HMIM］PF6，所述乙醇为70~100v%乙醇，萃取剂中离子液体的浓度为0.2~1.0mol/L，补骨脂与萃取剂按照固液比1g：（40~120 ）mL进行添加，补骨脂粉末目数为20~50目。
所属类别：	发明专利