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原文传递糖皮质激素及其衍生物的筛查方法及其应用

专利名称：	糖皮质激素及其衍生物的筛查方法及其应用
摘要：	本发明提供了一种糖皮质激素及其衍生物的筛查方法，该方法基于UPLC‑TOF MS/MS技术，采用MSE模式对样品进行质谱(ESI+)全信息采集。以GCs化学结构中的母核为分类依据，将若干种常见的GCs分为12组，通过对质谱图进行归类分析，找出各组相同的特征离子碎片，建立共母核特征离子数据库并利用Waters质谱Masslynx软件中的Chromlynx模块对GCs进行自动筛查分析，结合质谱断裂特征、离子精确质量数、同位素丰度、紫外吸收光谱等信息对筛查的色谱峰进行进一步的确认，形成的准靶向筛查技术能在没有对照品的条件下，实现对非法添加的糖皮质激素及其新型衍生物进行筛查和鉴定。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	广州质量监督检测研究院
发明人：	谭建华;王亚茹;王继才;魏海峰;陈意光;李鑫宇;熊小婷;夏泽敏;谭焯针;梁文耀
专利状态：	有效
申请日期：	2019-05-10T00:00:00+0800
发布日期：	2019-07-09T00:00:00+0800
申请号：	CN201910387387.3
公开号：	CN109991357A
代理机构：	广州华进联合专利商标代理有限公司
代理人：	向薇;万志香
分类号：	G01N30/88(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	511447 广东省广州市番禺区石楼潮田工业区珠江路1-2号
主权项：	1.一种糖皮质激素及其衍生物的筛查方法，其特征在于，包括以下步骤： S1.待测样品经分散提取后，采用超高效液相色谱仪进行色谱分离，PDA串联TOF MS/MS进行紫外光谱图及质谱信息采集； S2.采用含有若干组特征碎片离子信息的共母核特征离子数据库，对采集的待测样品的质谱信息进行搜索，搜索待测样品中包含的特征碎片离子信息； S3.结合质谱断裂特征、离子精确质量数、同位素丰度、紫外吸收光谱的至少一种信息，得待测样品中的糖皮质激素或其衍生物。 2.根据权利要求1所述的糖皮质激素及其衍生物的筛查方法，其特征在于，所述色谱分离的色谱条件为：以甲酸水溶液为流动相A，乙腈为流动相B，梯度洗脱；流动相流速为0.2-0.4mL/min，柱温35±1℃，进样量为3～6μL；紫外检测器，其紫外光谱采集波长范围为210-400nm。 3.根据权利要求2所述的糖皮质激素及其衍生物的筛查方法，其特征在于，所述色谱分离中使用的色谱柱为Waters ACQUITY UPLC BEH C18柱。 4.根据权利要求1所述的糖皮质激素及其衍生物的筛查方法，其特征在于，所述质谱信息采集的质谱条件为：离子源：电喷雾离子源，正离子模式(ESI+)；采集模式：MSE；毛细管电压：3.0±0.2kV；萃取锥孔电压：4±0.2V；采样锥孔电压：35±1V；碰撞气：高纯氩气； Trap：0.4-0.6mL/min；锥孔气：氮气，40-60L/h；去溶剂气：氮气，500-700L/h；离子源温度：100±5℃；去溶剂气温度：400±10℃；质量扫描范围：50～1000Da；扫描时间：0.2-0.3s；质谱碰撞电压：Trap CE为6.0-40V，Transfer CE为4.0V； TOF分析模式：V模式。 5.根据权利要求4所述的糖皮质激素及其衍生物的筛查方法，其特征在于，所述质谱信息采集的步骤设置两个不同质谱碰撞电压的通道，包括：质谱碰撞电压Trap CE为6.0V、梯度变化的碰撞电压Trap CE Ramp为10-40V。 6.根据权利要求1-5任一项所述的糖皮质激素及其衍生物的筛查方法，其特征在于，所述共母核特征离子数据库包含以下至少一组特征碎片离子信息：第一组：泼尼松龙类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C21H24O3和C21H22O2；第二组：氟轻松类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C21H20O4和C21H18O3；第三组：泼尼松类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C21H24O4和C21H22O3；第四组：氢化可的松类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C21H22O3和C21H20O2；第五组：可的松类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C21H26O4和C21H24O3；第六组：甲基泼尼松龙类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C24H28O4和C24H26O3；第七组：曲安奈德类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C24H26O4和C24H24O3；第八组：氟米松类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C22H24O4和C22H22O3；第九组：倍他米松类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C22H24O3和C22H22O2；第十组：氯倍他索丙酸酯类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C22H25ClO3和C22H23ClO2；第十一组：氯倍他松丁酸酯类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C22H23ClO3和C21H23ClO2；第十二组：卤倍他索丙酸酯类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C22H23ClO3和C22H21ClO2。 7.一种用于飞行时间质谱法筛查糖皮质激素及其衍生物的共母核特征离子数据库，其特征在于，包含以下至少一组特征碎片离子信息：第一组：泼尼松龙类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C21H24O3和C21H22O2；第二组：氟轻松类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C21H20O4和C21H18O3；第三组：泼尼松类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C21H24O4和C21H22O3；第四组：氢化可的松类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C21H22O3和C21H20O2；第五组：可的松类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C21H26O4和C21H24O3；第六组：甲基泼尼松龙类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C24H28O4和C24H26O3；第七组：曲安奈德类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C24H26O4和C24H24O3；第八组：氟米松类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C22H24O4和C22H22O3；第九组：倍他米松类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C22H24O3和C22H22O2；第十组：氯倍他索丙酸酯类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C22H25ClO3和C22H23ClO2；第十一组：氯倍他松丁酸酯类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C22H23ClO3和C21H23ClO2；第十二组：卤倍他索丙酸酯类糖皮质及其共母核结构衍生物，含有特征碎片离子C22H23ClO3和C22H21ClO2。 8.根据权利要求7所述的用于飞行时间质谱法筛查糖皮质激素及其衍生物的共母核特征离子数据库，其特征在于，所述泼尼松龙类糖皮质及其共母核结构衍生物包括：泼尼松龙、泼尼松龙醋酸酯、泼尼卡酯及其同母核结构的衍生物中的至少一种；所述氟轻松类糖皮质及其共母核结构衍生物包括：氟轻松、氟轻松醋酸酯及其同母核结构的衍生物中的至少一种；所述泼尼松类糖皮质及其共母核结构衍生物包括：泼尼松、泼尼松醋酸酯、布地奈德及其同母核结构的衍生物中的至少一种；所述氢化可的松类糖皮质及其共母核结构衍生物包括：氢化可的松、氢化可的松醋酸酯、氢化可的松戊酸酯、氢化可的松丁酸酯及其同母核结构的衍生物中的至少一种；所述可的松类糖皮质及其共母核结构衍生物包括：可的松、可的松醋酸酯及其同母核结构的衍生物中的至少一种；所述甲基泼尼松龙类糖皮质及其共母核结构衍生物包括：甲基泼尼松龙、甲基泼尼松龙醋酸酯、氟米龙、氟米龙醋酸酯及其同母核结构的衍生物中的至少一种；所述曲安奈德类糖皮质及其共母核结构衍生物包括：曲安奈德、曲安奈德醋酸酯、曲安西龙、曲安西龙双醋酸酯、安西奈德及其同母核结构的衍生物中的至少一种；所述氟米松类糖皮质及其共母核结构衍生物包括：氟米松、二氟拉松双醋酸酯及其同母核结构的衍生物中的至少一种；所述倍他米松类糖皮质及其共母核结构衍生物包括：倍他米松、倍他米松醋酸酯、倍他米松双丙酸酯、倍他米松戊酸酯、倍氯米松、倍氯米松双丙酸酯、地塞米松、地塞米松醋酸酯及其同母核结构的衍生物中的至少一种；所述氯倍他索丙酸酯类糖皮质及其共母核结构衍生物包括：氯倍他索丙酸酯及其同母核结构的衍生物中的至少一种；所述氯倍他松丁酸酯类糖皮质及其共母核结构衍生物包括：氯倍他松丁酸酯及其同母核结构的衍生物中的至少一种；所述卤倍他索丙酸酯类糖皮质及其共母核结构衍生物包括：卤倍他索丙酸酯及其同母核结构的衍生物中的至少一种。 9.权利要求1-6任一项所述的糖皮质激素及其衍生物的筛查方法，或权利要求7-8所述的共母核特征离子数据库在筛查化妆品中糖皮质激素及其衍生物中的应用。 10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，将化妆品预处理得待测样品的步骤如下：用饱和氯化钠溶液使化妆品样品均匀分散，加入乙腈，涡旋提取，取上清液，氮吹浓缩至近干，甲醇复溶，即得。
所属类别：	发明专利