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原文传递质谱检测乳制品中A1、A2型β酪蛋白的质谱模型及其构建方法

专利名称：	质谱检测乳制品中A1、A2型β酪蛋白的质谱模型及其构建方法
摘要：	本发明公开一种检测乳品中A1、A2型β酪蛋白的质谱模型，该质谱模型包括A1β‑酪蛋白、A2β酪蛋白的标准特征多肽组，其中所述乳制品包括牛乳、羊乳，所述A1β‑酪蛋白、A2β酪蛋白的标准特征多肽序列分别如SEQ ID No.1、SEQ IDNo.2所示。本发明还公开了该质谱模型的构建方法。利用本发明的方法能够准确地检测出乳品中是否含有A1β‑酪蛋白和A2β‑酪蛋白，并能对其二者含量进行相对定量。
专利类型：	发明专利
申请人：	北京毅新博创生物科技有限公司
发明人：	吕倩;何昆;付书辉;陈莲莲;马庆伟;向华
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T00:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T00:00:00+0805
申请号：	CN201911419408.1
公开号：	CN111077214A
分类号：	G01N27/62;G01N33/68;G;G01;G01N;G01N27;G01N33;G01N27/62;G01N33/68
申请人地址：	102206 北京市昌平区中关村生命科学园28号博达高科技大厦一层
主权项：	1.一种用于质谱检测乳制品中A1β-酪蛋白、A2β酪蛋白的质谱模型，该质谱模型包括A1β-酪蛋白、A2β酪蛋白的标准特征多肽组，其中所述乳制品包括牛乳、羊乳，所述A1β-酪蛋白、A2β酪蛋白的标准特征多肽序列分别如SEQ ID No.1、SEQ ID No.2所示。 2.权利要求1所述的质谱模型，其中所述A1β-酪蛋白的特征多肽质谱峰值为单电荷5360m/z(5‰)或双电荷2680m/z(5‰)，当出现该单电荷或双电荷的质谱多肽峰值时，表示待检样品为A1型乳，或A1/A2杂合型乳。 3.权利要求1或2所述的质谱模型，其中所述A2β-酪蛋白的特征多肽峰质谱峰值为单电荷5320m/z(5‰)或双电荷2660m/z(5‰)，当出现该单电荷或双电荷的质谱多肽峰值时，表示待检样品为A2型乳，或A1/A2杂合型乳。 4.制备权利要求1-3任一所述的质谱模型的构建方法，包括： 1)收集多例普通纯牛奶(含A1型或A1/A2杂合型)和A2型牛奶作为两组标本备用； 2)对牛奶蛋白进行质谱前预处理； 3)对预处理过的两组牛奶蛋白进行质谱检测读取，获得两组牛奶多肽的指纹图谱； 4)对所有的普通纯牛奶(含A1型或A1/A2杂合型)和A2型牛奶的指纹图谱进行标准化处理，并收集数据； 5)对所得数据进行质控处理，筛选出具有下列质荷比峰的两个特征多肽：单电荷5360m/z(5‰)或双电荷2680m/z(5‰)、单电荷5320m/z(5‰)或双电荷2660m/z(5‰)，对所述特征多肽进行测序并确定其序列为SEQ ID No.1、SEQ IDNo.2所示，并根据这两个质荷比峰建立检测乳品定性及半定量的质谱模型。 5.权利要求1的构建方法，其中步骤2)预处理的方法包括使用胰蛋白酶酶解，得到乳品中的特异多肽片段。 6.权利要求1的构建方法，其中所述步骤3)采用试剂盒对两组乳品样本进行还原、烷基化及酶解处理，并对乳品酶解后的多肽片段进行读取，获得两组乳品多肽的指纹图谱。 7.权利要求1的构建方法，其中所述步骤5)所述的质控处理，保留信噪比大于3的质谱图谱数据，并采用组内变异系数来保证实验的一致性，从而根据变异系数满足一致性的允许范围来进行筛选，所述变异系数为15％。
所属类别：	发明专利