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原文传递 一种同时测定血清中脂溶性维生素和类胡萝卜素的方法
专利名称: 一种同时测定血清中脂溶性维生素和类胡萝卜素的方法
摘要: 本发明公开了一种同时测定血清中脂溶性维生素和类胡萝卜素的方法,属于分析化学技术领域。该方法以离子液体或离子液体与其它溶剂组成的二元混合溶剂为萃取剂,经液‑液萃取对生物样本进行前处理,然后采用高效液相色谱法进行检测,选择维生素A醋酸酯和反式‑β‑阿朴‑胡萝卜醛为脂溶性维生素和类胡萝卜素的内标,以保留时间和紫外可见吸收光谱为定性依据,内标法制作标准曲线定量。与现有方法相比,本发明前处理过程简单易操作,样品制备时间短,并减少了有毒有害有机溶剂的用量。该高效液相色谱分析方法分离效果好,检测精度高,可在40分钟内同时检测十种以上脂溶性营养素,高通量、低成本,易于临床推广及普及。
专利类型: 发明专利
申请人: 西安交通大学
发明人: 孔利云;马乐;王嘉琪;刘燕;武敏;石丽娟;张瑞;乌梦璐;李果力;祁菲菲
专利状态: 有效
申请日期: 1900-01-20T18:00:00+0805
发布日期: 1900-01-20T12:00:00+0805
申请号: CN201911311503.X
公开号: CN111141840A
代理机构: 西安通大专利代理有限责任公司
代理人: 范巍
分类号: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86
申请人地址: 710049 陕西省西安市咸宁西路28号
主权项: 1.一种同时测定血清中脂溶性维生素和类胡萝卜素的方法,其特征在于,包括:以离子液体或离子液体与有机溶剂组成的二元复合溶剂作为萃取剂,经液-液萃取法对血清进行前处理,选取维生素A醋酸酯和反式-β-阿朴-8′-胡萝卜醛分别作为脂溶性维生素和类胡萝卜素的内标物,对得到的离子液体萃取相进行高效液相色谱分析,测得血清中脂溶性维生素和类胡萝卜素的含量。 2.根据权利要求1所述的同时测定血清中脂溶性维生素和类胡萝卜素的方法,其特征在于,所述离子液体由阳离子M+和阴离子N-两部分组成,其中阳离子M+为具有单个或多个取代基的咪唑、吡啶、哌啶、吡咯烷、胺类和磷酸类阳离子中的一种,所述的取代基为烷基、烯烃基或芳烃基;阴离子N-为四氟硼酸根、六氟磷酸根和双(三氟甲烷磺酰)亚胺根等疏水性阴离子中的一种。 3.根据权利要求1所述的同时测定血清中脂溶性维生素和类胡萝卜素的方法,其特征在于,所述二元复合溶剂中离子液体的摩尔百分比为1%~90%。 4.根据权利要求1所述的同时测定血清中脂溶性维生素和类胡萝卜素的方法,其特征在于,有机溶剂为二氯甲烷、氯仿、二氯乙烷、乙酸乙酯、正丁醇、正庚醇、正辛醇、正戊烷、正己烷、正庚烷、正辛烷、环戊烷、环己烷、沸程为60~90℃石油醚、沸程为90~120℃的石油醚或甲苯。 5.根据权利要求1所述的同时测定血清中脂溶性维生素和类胡萝卜素的方法,其特征在于,液-液萃取是按照每250μL血清加入50~500μL的萃取剂的比例对血清进行前处理。 6.根据权利要求1所述的同时测定血清中脂溶性维生素和类胡萝卜素的方法,其特征在于,脂溶性维生素和类胡萝卜素的液-液萃取回收率为50%~95%。 7.根据权利要求1所述的同时测定血清中脂溶性维生素和类胡萝卜素的方法,其特征在于,所述高效液相色谱分析条件如下: 固定相为YMC C30色谱柱,4.6mm×250mm,5μm; 流动相A为体积分数90%以上的甲醇水溶液,流动相B为体积分数30%以上的异丙醇/正己烷溶液; 洗脱方式为梯度洗脱,流速为1mL/min; 检测波长包括: 324nm维生素A; 263nm维生素D; 290nm生育酚; 254nm维生素K; 450nm类胡萝卜素; 柱温为25℃,进样量10μL。
所属类别: 发明专利
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