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原文传递补肾助孕颗粒指纹图谱的检测方法

专利名称：	补肾助孕颗粒指纹图谱的检测方法
摘要：	本发明公开了补肾助孕颗粒指纹图谱的检测方法，它包括步骤1、补肾助孕颗粒供试品溶液的制备；步骤2、混合对照品溶液的制备：步骤3、分别精密吸取混合对照品溶液和供试品溶液注入液相色谱仪，记录色谱图；步骤4，补肾助孕颗粒指纹图谱仪器导出，导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统，选择不同批次补肾助孕颗粒的色谱图中均存在的色谱峰作为共有峰；用平均值计算法生成补肾助孕颗粒的对照指纹图谱；计算各共有峰的相对保留时间、相对峰面积；将补肾助孕颗粒指纹图谱和混合标准品图谱进行比对，指认主要成分峰。本发明所提供的补肾助孕颗粒指纹图谱，能全面，客观地表征补肾助孕颗粒的质量。且检测方法具有方法简便、稳定、精密度高、重现性好等优点。
专利类型：	发明专利
申请人：	江苏省中医院
发明人：	刘志辉;周惠芳;范智毅;周洪亮;姜誉弘
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T07:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T19:00:00+0805
申请号：	CN202010012742.1
公开号：	CN111175428A
代理机构：	南京经纬专利商标代理有限公司
代理人：	程斯佳
分类号：	G01N30/88;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/88
申请人地址：	210029 江苏省南京市汉中路155号
主权项：	1.一种补肾助孕颗粒指纹图谱的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1，补肾助孕颗粒供试品溶液的制备：分别精密称取不同批次的补肾助孕颗粒，研细，精密称定，置于具塞锥形瓶中，加入甲醇水溶液，超声处理，滤过，取续滤液，即得；步骤2，混合对照品溶液的制备：分别精密称取没食子酸、5-羟甲基糠醛、莫诺苷、马钱苷、当药苷、芍药苷、金丝桃苷、紫云英苷、迷迭香酸、丹酚酸B对照品，加甲醇制成混合对照品溶液；步骤3，分别精密吸取步骤1供试品溶液和步骤2混合对照品溶液，注入高效液相色谱仪分析，记录色谱图；步骤4，将步骤3中获得的补肾助孕颗粒供试品溶液的指纹图谱导出，并导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A；选择不同批次补肾助孕颗粒的色谱图中均存在的色谱峰作为共有峰；用平均值计算法生成补肾助孕颗粒的对照指纹图谱，计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积；并根据混合对照品溶液色谱图的保留时间标注对照指纹图谱中峰的化学成分。 2.一种补肾助孕颗粒指纹图谱的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1，补肾助孕颗粒供试品溶液的制备：分别精密称取不同批次的补肾助孕颗粒，研细，精密称定，置于具塞锥形瓶中，加入甲醇水溶液，超声处理，滤过，取续滤液，即得；步骤2，混合对照品溶液的制备：分别精密称取没食子酸、5-羟甲基糠醛、莫诺苷、马钱苷、当药苷、芍药苷、金丝桃苷、紫云英苷、迷迭香酸、丹酚酸B对照品，加甲醇制成混合对照品溶液；步骤3，缺失药材的阴性样品溶液的制备分别取缺失酒萸肉、菟丝子、丹参、炒白芍或酒萸肉-炒白芍药材的补肾助孕颗粒，研细，精密称定，置于具塞锥形瓶中，加入甲醇水溶液，超声处理，滤过，取续滤液，即得缺失各药材的阴性样品溶液；步骤4，分别精密吸取步骤1供试品溶液，步骤2混合对照品溶液和步骤3缺失药材的阴性样品溶液，注入高效液相色谱仪分析，记录色谱图；步骤4，将步骤3中获得的各批次的补肾助孕颗粒供试品溶液的指纹图谱导出，并导入中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A；选择各批次补肾助孕颗粒的色谱图中均存在的色谱峰作为共有峰；用平均值计算法生成补肾助孕颗粒的对照指纹图谱，计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积；并根据混合对照品溶液色谱图的保留时间标注对照指纹图谱中峰的化学成分；并将对照指纹图谱与缺失药材的阴性样品溶液的色谱图进行比较，指认出对照指纹图谱中共有峰与药材的相关性。 3.一种补肾助孕颗粒指纹图谱的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1，补肾助孕颗粒供试品溶液的制备：分别精密称取不同批次的补肾助孕颗粒，研细，精密称定，置于具塞锥形瓶中，加入甲醇水溶液，超声处理，滤过，取续滤液，即得；步骤2，混合对照品溶液的制备：分别精密称取没食子酸、5-羟甲基糠醛、莫诺苷、马钱苷、当药苷、芍药苷、金丝桃苷、紫云英苷、迷迭香酸、丹酚酸B对照品，加甲醇制成混合对照品溶液；步骤3，线性回归方程的建立分别精密吸取步骤2的混合对照品溶液，分别稀释成1、2、5、10、20、40倍的混合对照品溶液，精密吸取各混合对照品溶液10μL，注入高效液相色谱仪分析，以测得的响应信号峰和被测成分的进样浓度用最小二乘法进行线性回归，得到各成分的线性回归方程以及线性范围；步骤4，供试品溶液的检测精密吸取步骤1制备得到的供试品溶液10μL，注入高效液相色谱检测，通过步骤(3)获得的线性回归方程，检测供试品溶液中各化学成分的含量。 4.根据权利要求1至3所述的补肾助孕颗粒指纹图谱的检测方法，其特征在于，步骤1补肾助孕颗粒供试品溶液制备方法为：取补肾助孕颗粒，研细，精密称定0.8g，置于具塞锥形瓶中，精密加入体积浓度70％甲醇水10mL，密塞，称量，200W,40kHz超声处理30min，放置至室温，再称量，用体积浓度70％甲醇水补足减失的量，摇匀，用0.45μm微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。 5.根据权利要求1至3所述的补肾助孕颗粒指纹图谱的检测方法，其特征在于，步骤2混合对照品溶液的制备：分别精密称取没食子酸、5-羟甲基糠醛、莫诺苷、马钱苷、当药苷、芍药苷、金丝桃苷、紫云英苷、迷迭香酸和丹酚酸B对照品，加甲醇制成浓度分别为0.540mg·mL-1、1.600mg·mL-1、0.637mg·mL-1、0.225mg·mL-1、0.623mg·mL-1、1.053mg·mL-1、0.638mg·mL-1、0.480mg·mL-1、0.365mg·mL-1、0.877mg·mL-1的混合对照品溶液，用0.45μm微孔滤膜滤过，即得。 6.根据权利要求1至3所述的补肾助孕颗粒指纹图谱的检测方法，其特征在于，高效液相色谱仪分析的色谱条件为：色谱柱为：Hedera ODS-2 C18色谱柱，规格250mm×4.6mm，5μm，以乙腈为流动相A，以0.2％磷酸水溶液为流动相B，梯度洗脱，流速1.0mL·min-1，检测波长237nm，柱温30℃，进样量10μL。 7.根据权利要求6所述的补肾助孕颗粒指纹图谱的检测方法，其特征在于，梯度洗脱程序为：0～15min，5％A→7％A；15～30min，7％A→9.5％A；30～31min，9.5％A→11％A；31～55min，11％A；55～65min，11％A→20％A；65～95min，20％A→22％A；95～100min，22％A→5％A。 8.根据权利要求1或2所述的补肾助孕颗粒指纹图谱的检测方法，其特征在于，指纹谱图中共有峰23个。 9.根据权利要求8所述的补肾助孕颗粒指纹图谱的检测方法，其特征在于，23个共有峰中2号峰为没食子酸、3号峰为5-羟甲基糠醛、6号峰为莫诺苷、8号峰为当药苷、9号峰为马钱苷、12号峰为芍药苷、16号峰为金丝桃苷、19号峰为紫云英苷、21号峰为迷迭香酸、23号峰为丹酚酸B。 10.根据权利要求8所述的补肾助孕颗粒指纹图谱的检测方法，其特征在于，1、2、3、4、5、6、8、9、20号峰为酒萸肉饮片中的成分；7、13、14、15、16、17、19号峰为菟丝子饮片中的成分；2、10、11、12、18号峰为炒白芍饮片中的成分；20、21、22、23号峰为丹参饮片中的成分；其中2号峰为酒萸肉和炒白芍共有的成分；20号峰为酒萸肉和菟丝子共有的成分。 11.根据权利要求3所述的补肾助孕颗粒指纹图谱的检测方法，其特征在于，各化合物的线性回归方程如下：
所属类别：	发明专利