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原文传递用于检测阿尔兹海默病生物标记物的检测试剂、试剂盒、制备方法和检测方法

专利名称：	用于检测阿尔兹海默病生物标记物的检测试剂、试剂盒、制备方法和检测方法
摘要：	本发明公开了一种用于检测阿尔兹海默病生物标记物的检测试剂、试剂盒、制备方法和检测方法，涉及生物标志物检测技术领域。本发明公开的检测试剂，其包括第一检测试剂和第二检测试剂中的至少一种。采用本发明提供的检测试剂、试剂盒或方法检测阿尔兹海默病的生物标记物，能够简便、准确、高效地对生物标志物定量检测，能够满足对灵敏性和特异性等方面的要求，对于阿尔兹海默病的早期诊断具有重要的意义。
专利类型：	发明专利
申请人：	徐州医科大学
发明人：	李世宝;黄庆利;马萍;蓝婷;于丹;张好良;孙静芳;郑培明
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T09:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T19:00:00+0805
申请号：	CN202010020252.6
公开号：	CN111175277A
代理机构：	北京超凡宏宇专利代理事务所(特殊普通合伙)
代理人：	周文波
分类号：	G01N21/65;G;G01;G01N;G01N21;G01N21/65
申请人地址：	221000 江苏省徐州市鼓楼区铜山路209号
主权项：	1.一种用于检测阿尔兹海默病生物标记物的检测试剂，其特征在于，其包括第一检测试剂和第二检测试剂中的至少一种；所述第一检测试剂包括同时负载有第一抗体和拉曼信号分子的纳米金属颗粒；所述第二检测试剂包括负载有第二抗体的SERS基底，所述SERS基底为磁性氧化石墨烯；其中，所述第一抗体和所述第二抗体均能够特异性结合所述阿尔兹海默病的生物标记物。 2.根据权利要求1所述的检测试剂，其特征在于，所述检测试剂包括第一检测试剂和第二检测试剂；优选地，所述纳米金属颗粒选自金、银、铂、钯或其组合；优选地，所述纳米金属颗粒为银；优选地，所述纳米金属颗粒的直径为8-11nm。 3.根据权利要求2所述的检测试剂，其特征在于，所述拉曼信号分子选自4-巯基苯甲酸、对巯基苯甲酸、对巯基苯胺、对巯基苯硼酸、2-硝基-5-巯基苯甲酸、2-氨基-6-巯基嘌呤、4-巯基吡啶、对巯基苯胺和罗丹明6G中的任意一种；优选地，所述拉曼信号分子为4-巯基苯甲酸。 4.根据权利要求1-3任一项所述的检测试剂，其特征在于，所述生物标记物为Aβ蛋白或tau蛋白。 5.一种检测阿尔兹海默病生物标记物的试剂盒，其特征在于，其包括权利要求1所述的检测试剂。 6.如权利要求1-4任一项所述的检测试剂的制备方法，其特征在于，其包括如下步骤(a)和/或(b)：步骤(a)：在所述纳米金属颗粒表面负载所述第一抗体和所述拉曼信号分子；步骤(b)：在所述SERS基底表面负载所述第二抗体，所述SERS基底为磁性氧化石墨烯。 7.根据权利要求6所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(a)包括：步骤(a1)：将所述拉曼信号分子负载于所述纳米金属颗粒表面；步骤(a2)：将所述第一抗体负载于结合有所述拉曼信号分子的纳米金属颗粒表面；优选地，所述步骤(a1)包括：将含有所述纳米金属颗粒的分散液A与含有所述拉曼信号分子的溶液混合，得到混合溶液；优选地，所述步骤(a1)还包括：搅拌所述混合溶液进行搅拌，搅拌时间为6-8h，优选地，在搅拌结束后，对所述混合溶液进行固液分离，获取固体分离物，将所述固体分离物分散于水中，得到含有负载有所述拉曼信号分子的纳米金属颗粒的分散液B；优选地，采用离心方式对所述混合溶液进行固液分离；优选地，离心的转速为13000-15000rpm，4-6min。 8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(a2)包括：往所述分散液B中加入活化剂，搅拌，离心后取沉淀，用PBS进行分散，得到分散液C，将所述分散液C与含有所述第一抗体的抗体溶液A混合，并进行反应以使所述第一抗体负载至结合有所述拉曼信号分子的纳米金属颗粒表面；优选地，活化剂选自EDC和NHS中的至少一种；优选地，所述步骤(a2)中，搅拌的时间为28-30min；优选地，所述步骤(a2)中，离心的转速为13000-15000rpm，4-6min。 9.根据权利要求6-8任一项所述的制备方法，其特征在于，所述步骤(b)包括：将磁性氧化石墨烯分散液与含有所述第二抗体的抗体溶液B混合；优选地，所述磁性氧化石墨烯分散液的浓度为4-6mg/mL。 10.一种阿尔兹海默病生物标记物的检测方法，其特征在于，使用权利要求1-4任一项所述的检测试剂进行检测；优选地，所述检测方法包括：将所述第二检测试剂与待测样本混合，再与所述第一检测试剂混合。
所属类别：	发明专利