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原文传递一种超高效液相色谱串联质谱法检测血清中5种脂溶性维生素的方法

专利名称：	一种超高效液相色谱串联质谱法检测血清中5种脂溶性维生素的方法
摘要：	本发明公开了一种超高效液相色谱串联质谱法检测血清中5种脂溶性维生素的方法，所述维生素包括VA、VD2、VD3、VE和VK1；采用超高效液相色谱串联质谱法检测预处理血清中VA、VD2、VD3、VE和VK1的含量，利用超高效液相色谱将目标待测物与血清基质中的干扰组分进行分离，用质谱检测目标物与其对应同位素内标的质荷比(m/z)，使用同位素内标法定量，准确计算出5种脂溶性维生素的含量；本发明方法的优势是：准确度良好和重现性良好，灵敏度高、特异性强且前处理过程较简单，6min之内可完成化合物的分离和检测，基质效应、提取回收率以及精密度满足要求，可用于临床上血清中VA、VD2、VD3、VE和VK1的定量分析。
专利类型：	发明专利
申请人：	南京品生医学检验实验室有限公司
发明人：	成晓亮;李美娟
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T14:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T00:00:00+0805
申请号：	CN202010037316.3
公开号：	CN111208248A
代理机构：	镇江基德专利代理事务所(普通合伙)
代理人：	张敏
分类号：	G01N30/88;G01N30/06;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/88;G01N30/06
申请人地址：	210043 江苏省南京市江北新区浦东北路7号扬子科创总部基地5号楼10层
主权项：	1.一种超高效液相色谱串联质谱法检测血清中5种脂溶性维生素的方法，其特征在于，所述维生素包括VA、VD2、VD3、VE和VK1；采用超高效液相色谱串联质谱法检测预处理血清中VA、VD2、VD3、VE和VK1的含量，利用同位素内标法定量，以标准物与内标物的浓度比为X轴，标准物与内标物峰面积比为Y轴，建立校准曲线，计算出血清中5种维生素的浓度； (1)具体色谱条件：流动相A：含0.1％甲酸的水；流动相B：含0.1％甲酸和2mmol甲酸铵的甲醇；流速为0.4mL/min，柱温为50℃，进样体积为2μL；采用梯度洗脱方式，流动相按照表1中的梯度保留时间均匀变化；表1流动相梯度洗脱参数： (2)具体质谱条件：电喷雾电离正离子模式，多反应监测的质谱扫描模式；喷雾电压：3.0KV；去溶剂温度：120℃；雾化气温度：550℃，雾化气流速：800L/h，锥孔气流速：150L/h；同时监测目标物维生素的对应的标准品和内标母离子、子离子、去簇电压和碰撞电压，参数见表2；表2质谱检测参数化合物母离子m/z 子离子m/z 去簇电压(V) 碰撞电压(V) VA 269.22 92.81 15 10 VA-IS 277.24 98.10 40 20 VE 431.29 164.91 5 5 VE-IS 437.35 171.96 10 8 VD2 395.23 118.93 50 25 VD2-IS 401.33 118.93 48 23 VD3 383.27 106.87 28 27 VD3-IS 389.3 371.34 44 13 VK1 451.29 186.93 50 23 VK1-IS 458.33 194.01 44 23 2.根据权利要求1所述的一种超高效液相色谱串联质谱法检测血清中5种脂溶性维生素的方法，其特征在于，所述的血清为人或动物的血清。 3.根据权利要求1所述的一种超高效液相色谱串联质谱法检测血清中5种脂溶性维生素的方法，其特征在于，所述的流动相B中甲酸的浓度为0.01％-0.2％，甲酸铵的浓度为0.1-10mmol。 4.根据权利要求1所述的一种超高效液相色谱串联质谱法检测血清中5种脂溶性维生素的方法，其特征在于，预处理血清的方法为将血清与内标工作液混合，通过萃取液一步液-液萃取获得预处理血清，所述的内标工作液为含有VA、VD2、VD3、VE和VK1对应内标的甲醇溶液。 5.根据权利要求4所述的一种超高效液相色谱串联质谱法检测血清中5种脂溶性维生素的方法，其特征在于，所述的萃取液为甲基叔丁基醚。
所属类别：	发明专利