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原文传递一种超高效液相色谱串联质谱法检测血清中5种脂溶性维生素的试剂盒

专利名称：	一种超高效液相色谱串联质谱法检测血清中5种脂溶性维生素的试剂盒
摘要：	一种超高效液相色谱串联质谱法检测血清中5种脂溶性维生素的试剂盒，所述的维生素包括VA、VD2、VD3、VE和VK1；所述试剂盒包括如下试剂分别包括电解质浓缩液A、电解质浓缩液B、标准品母液、内标液、萃取液和质控品QC(L)、QC(M)、QC(H)；本发明试剂盒与现有技术相比具有如下优势：灵敏度高、特异性强、准确且前处理过程较简单，6min之内可完成化合物的分离和检测，基质效应与精密度基本满足要求，可用于临床上血清中VA、VD2、VD3、VE和VK1的定量分析，为临床上维生素缺乏的健康评估提供一种可靠的检测方法。
专利类型：	发明专利
申请人：	南京品生医学检验实验室有限公司
发明人：	成晓亮;李美娟
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T14:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T00:00:00+0805
申请号：	CN202010038359.3
公开号：	CN111208250A
代理机构：	镇江基德专利代理事务所(普通合伙)
代理人：	张敏
分类号：	G01N30/88;G01N30/06;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/88;G01N30/06
申请人地址：	210043 江苏省南京市江北新区浦东北路7号扬子科创总部基地5号楼10层
主权项：	1.一种超高效液相色谱串联质谱法检测血清中5种脂溶性维生素的试剂盒，其特征在于，所述的维生素包括VA、VD2、VD3、VE和VK1；所述试剂盒包括如下试剂：电解质浓缩液A：甲酸水溶液电解质浓缩液B：甲酸铵水溶液；标准品母液：含VA、VD2、VD3、VE和VK1的甲醇溶液；内标液：含有VA、VD2、VD3、VE和VK1对应内标的甲醇溶液；萃取液：甲基叔丁基醚；质控品：含有VA、VD2、VD3、VE和VK1的空白血清基质溶液，分为低、中、高三个浓度，分别为QC(L)、QC(M)、QC(H)。 2.根据权利要求1所述的一种超高效液相色谱串联质谱法检测血清中5种脂溶性维生素的试剂盒，其特征在于，质控品中VA、VD2、VD3、VE和VK1对应的QC(L)、QC(M)、QC(H)浓度见表1；表1质控品对应浓度(单位ng/mL) QC(L) QC(M) QC(H) VA 80 400 800 VD2 4 20 40 VD3 8 40 80 VE 800 4000 8000 VK1 0.2 1 2 3.根据权利要求1所述的一种超高效液相色谱串联质谱法检测血清中5种脂溶性维生素的试剂盒，其特征在于，所述的空白血清基质溶液为甲醇溶液。 4.根据权利要求1所述的一种超高效液相色谱串联质谱法检测血清中5种脂溶性维生素的试剂盒，其特征在于，所述的标准品母液为含有40000ng/mL VA、4000ng/mL VD2、4000ng/mL VD3、400000ng/mL VE和200ng/mL VK1标准品的甲醇溶液。 5.根据权利要求1所述的一种超高效液相色谱串联质谱法检测血清中5种脂溶性维生素的试剂盒，其特征在于，所述的内标液为含有500ng/mL VA-IS、200ng/mL VD2-IS、200ng/mL VD3-IS、750ng/mL VE-IS和10ng/mL VK1-IS内标的甲醇溶液。 6.根据权利要求1所述的一种超高效液相色谱串联质谱法检测血清中5种脂溶性维生素的试剂盒，其特征在于，所述的血清为人或动物的血清。 7.根据权利要求1所述的一种超高效液相色谱串联质谱法检测血清中5种脂溶性维生素的试剂盒，其特征在于，电解质浓缩液A为50％v/V甲酸水溶液。 8.根据权利要求1所述的一种超高效液相色谱串联质谱法检测血清中5种脂溶性维生素的试剂盒，其特征在于，电解质浓缩液B为10M甲酸铵水溶液。 9.权利要求1-8中任意一项所述的试剂盒的制备方法，其特征在于， (1)电解质浓缩液A：取甲酸溶液1.5mL，加入超纯水1.5mL，涡旋5s，混匀得电解质浓缩液A；电解质浓缩液B：用电子天平称取9.460g甲酸铵置于50mlBD管中，加入超纯水至刻度线15mL，混合均匀并超声至完全溶解得电解质浓缩液B； (2)标准品母液：准确移取5mg/mLVA 8μL、100μg/mLVD 240μL、100μg/mLVD3 40μL、10mg/mLVE 40μL、150μg/mLVK 4μL至同一离心管中，然后加入868μL甲醇，涡旋均匀，得到标准品母液，浓度参表2：表2标准品母液溶液浓度 (3)内标液：各内标的混合液，用甲醇溶液配制，所述的内标液按如下方法制备得到：分别准确移取100μg/mLVA-IS 5μL、50μg/mLVD2-IS 4μL、50μg/mLVD3-IS 2μL、50μg/mLVE-IS5μL、2μg/mLVK1-IS 5μL至同一离心管中，然后加入975μL甲醇，涡旋均匀，得到内标液，浓度参见表3: 表3内标液浓度 (4)萃取液：甲基叔丁基醚； (5)质控品：低浓度质控品：取步骤(2)中的标准品母液用含甲醇溶液稀释500倍(1:499)；中浓度质控品：取步骤(2)中的标准品母液用甲醇溶液稀释100倍(1:99)；高浓度质控品：取步骤(2)中的标准品母液用甲醇溶液稀释50倍(1:49)。 10.权利要求1-8中任意一项所述的试剂盒在利用超高效液相色谱串联质谱法检测血清中5种脂溶性维生素中的应用。
所属类别：	发明专利