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原文传递一种基于基因修饰的高脂动物模型的脂质分析方法

专利名称：	一种基于基因修饰的高脂动物模型的脂质分析方法
摘要：	本发明涉及生物分析技术领域，尤其为一种基于基因修饰的高脂动物模型的脂质分析方法，包括以下步骤：A、选取原材料；B、处理样品；C、制备及电泳：①将琼脂凝胶制成微薄的分子筛网，②在超速离心后的血浆样本中加入苏丹黑B染色剂进行预染，并在4度环境中静置1h，获得溶液a，③在溶液a中加入蔗糖溶液并混匀，8ul上样，100V恒压电泳1h；C、观测及化验：确立孔原点位置，离孔距离由近到远，分别测出VLDL、LDL以及HDL的参考值；D、数据分析。本发明通过调节各种原材料的浓度比及配比量，改良琼脂糖凝胶电泳检测脂质分析的方法，并在其中采用苏丹黑B进行预染，用蔗糖沉降脂质，从而简化了脂质分析方法，并且能对高脂血浆进行脂质分析，进而提高了高脂动物模型的脂质分析效率。
专利类型：	发明专利
申请人：	扬州大学
发明人：	梁景岩;卢瑶瑶;王英歌;查艺闻
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T20:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T10:00:00+0805
申请号：	CN201911322537.9
公开号：	CN110988092A
代理机构：	北京世誉鑫诚专利代理事务所(普通合伙)
代理人：	孙国栋
分类号：	G01N27/447;G01N1/28;G01N1/30;G;G01;G01N;G01N27;G01N1;G01N27/447;G01N1/28;G01N1/30
申请人地址：	225000 江苏省扬州市大学南路88号
主权项：	1.一种基于基因修饰的高脂动物模型的脂质分析方法，其特征在于：包括以下步骤： A、选取原材料：血浆样本、TAE电泳缓冲液、琼脂凝胶、苏丹黑B染色剂、蔗糖溶液； B、制备及电泳：①将琼脂凝胶制成微薄的分子筛网，②在血浆样本中加入苏丹黑B染色剂进行预染，并在恒温环境中静置1h，获得溶液a，③在溶液a中加入蔗糖溶液并混匀，8ul上样，恒压电泳1h； C、观测及化验：确立孔原点位置，离孔距离由近到远，分别测出VLDL(极低密度脂蛋白胆固醇)、LDL(低密度脂蛋白胆固醇)以及HDL(高密度脂蛋白胆固醇)的参考值； D、数据分析：将上述数值导入计算机内部基因库中，建立数据模型，并通过与同类案例进行比对，得出变量并分析原因。 2.根据权利要求1所述的一种基于基因修饰的高脂动物模型的脂质分析方法，其特征在于：所述步骤A中各种原材料的浓度比分别为10％TAE电泳缓冲液、1％琼脂凝胶、1％苏丹黑B染色剂以及40％蔗糖溶液。 3.根据权利要求1所述的一种基于基因修饰的高脂动物模型的脂质分析方法，其特征在于：所述步骤B-①中分子筛网的面积为60㎜*30㎜，且分子筛网的厚度应≤1㎜。 4.根据权利要求1所述的一种基于基因修饰的高脂动物模型的脂质分析方法，其特征在于：所述步骤B-②中血浆样本与苏丹黑B染色剂的质量比为3:1。 5.根据权利要求1所述的一种基于基因修饰的高脂动物模型的脂质分析方法，其特征在于：所述步骤B-②中恒温环境为4℃。 6.根据权利要求1所述的一种基于基因修饰的高脂动物模型的脂质分析方法，其特征在于：所述步骤B-③中溶液a与蔗糖溶液的质量比为5:1。 7.根据权利要求1所述的一种基于基因修饰的高脂动物模型的脂质分析方法，其特征在于：所述步骤B-③中恒压值为100V。 8.根据权利要求1所述的一种基于基因修饰的高脂动物模型的脂质分析方法，其特征在于：所述步骤C中孔原点位置为乳糜微粒。
所属类别：	发明专利