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原文传递一种基于双重信号放大策略检测唾液酸的核酸适配体电化学传感器

专利名称：	一种基于双重信号放大策略检测唾液酸的核酸适配体电化学传感器
摘要：	本发明涉及一种基于双重信号放大策略检测唾液酸的核酸适配体电化学传感器，属于新型功能纳米复合材料和生物传感器检测技术领域。本发明采用高导电性的金纳米叶修饰碳布为基底电极，进行了一次信号放大。进一步利用核酸适配体实现唾液酸的高特异性识别，提高了测定的选择性。通过硼酸‑二醇的反应结合硫堇/金纳米粒子/4‑巯基苯硼酸复合材料，从而引入硫堇的电化学信号并且实现了信号的二次信号放大。本方法制备的核酸适配体电化学传感器在唾液酸测定中表现出高的灵敏度、好的选择性和长期的稳定性。该传感器用于实际血清样品中唾液酸的测定，检测限可达60 nmol·L‑1。
专利类型：	发明专利
申请人：	商丘师范学院
发明人：	周艳丽;吕玉冰;董辉;刘澜涛;徐茂田
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T20:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T00:00:00+0805
申请号：	CN201911326771.9
公开号：	CN111060574A
代理机构：	郑州联科专利事务所(普通合伙)
代理人：	杨海霞
分类号：	G01N27/327;G01N27/30;G;G01;G01N;G01N27;G01N27/327;G01N27/30
申请人地址：	476000 河南省商丘市平原中路55号
主权项：	1.一种检测唾液酸的核酸适配体电化学传感器，其特征在于，通过如下方法制备而成：（1）金纳米叶在碳布电极上沉积：将清洗后的碳布电极浸入氯金酸溶液中进行恒电位电沉积获得金纳米叶结构的碳布表面；（2）固定核酸适配体及识别唾液酸：将步骤（1）制得的金纳米叶修饰的碳布电极浸入到核酸适配体溶液中室温孵育，用1-己硫醇溶液浸泡电极进行封闭，消除非特异性结合位点；将制备好的修饰电极分别与不同浓度的唾液酸溶液在室温下孵育，进行唾液酸识别；（3）引入探针分子：取HAuCl4溶液放入装有超纯水的三颈瓶中，搅拌条件下加热至沸腾，加入柠檬酸钠溶液生成金溶胶；然后将4-巯基苯硼酸和硫堇混合液在搅拌下逐滴加入至金纳米溶胶溶液中，得到4-巯基苯硼酸/金纳米粒子/硫堇复合材料溶液；将4-巯基苯硼酸/金纳米粒子/硫堇复合材料溶液与步骤（2）结合唾液酸后的传感器共同孵育，制得核酸适配体电化学传感器；所选用的核酸适配体的DNA序列是TCCCT ACGGC GCTAA CCGAT AGGTG TAGCG TGGGGCACAT GTTCG CGCCA CCGTG CTACA AC。 2.根据权利要求1所述的检测唾液酸的核酸适配体电化学传感器，其特征在于，步骤（1）所述金纳米叶电化学沉积的时间和电位分别选择为400 s和-0.08 V。 3.根据权利要求1所述的检测唾液酸的核酸适配体电化学传感器，其特征在于，步骤（2）所述核酸适配体固定时其浓度选择75 μmol·L-1。 4.根据权利要求1所述的检测唾液酸的核酸适配体电化学传感器，其特征在于，步骤（3）4-巯基苯硼酸和硫堇摩尔比为1：1。 5.如权利要求1-4其中之一所述的检测唾液酸的核酸适配体电化学传感器的应用，其特征在于，通过如下方法实现：缓冲溶液中，进行微分脉冲伏安的测定，通过加入唾液酸前后硫堇的还原峰电流改变值与唾液酸浓度的关系实现唾液酸的定量测定。 6.根据权利要求5所述的检测唾液酸的核酸适配体电化学传感器的应用，其特征在于，所述的缓冲体系选择0.1 mol·L-1磷酸盐缓冲体系，pH为4.5。
所属类别：	发明专利