详情

原文传递一种降低脂溶性维生素96孔板非特异性吸附的方法

专利名称：	一种降低脂溶性维生素96孔板非特异性吸附的方法
摘要：	本发明属于脂溶性维生素检测前处理技术领域，具体涉及一种降低脂溶性维生素96孔板非特异性吸附的方法。商品化的96孔板在样品前处理过程中具有重要的应用，发明人研究过程中发现，96孔收集板的材料对脂溶性维生素具有较高的非特异性吸附，包括后续的氮吹步骤均会对脂溶性维生素的检测造成影响。本发明提供了一种有效降低96孔板对脂溶性维生素非特异性吸附的方法，所述方法包括采用高压灭菌对96孔收集板进行预处理，经本发明研究验证，该处理方法能够有效降低96孔收集板对脂溶性维生素的特异性吸附，提高回收率。
专利类型：	发明专利
申请人：	山东英盛生物技术有限公司
发明人：	冯振;景叶松;弭兆元
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T00:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T10:00:00+0805
申请号：	CN201911358604.2
公开号：	CN110988210A
代理机构：	济南圣达知识产权代理有限公司
代理人：	张晓鹏
分类号：	G01N30/06;G01N30/88;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/06;G01N30/88
申请人地址：	250101 山东省济南市高新区大正路1777号生物医药园中小企业产业化基地12号楼405厂房
主权项：	1.一种降低收集板非特异性吸附的方法，其特征在于，所述方法包括在加样之前采用高压灭菌方法对收集板进行预处理；优选的，所述高压灭菌温度为114～124℃；优选的，所述高压灭菌的时间为15～25min；优选的，所述收集板为96孔收集板。 2.一种脂溶性维生素的样品前处理方法，其特征在于，所述前处理方法包括以下步骤： (1)对收集板进行高压灭菌处理； (2)将血清样品与内标工作液加入提取板中混均； (3)将步骤(2)中的液体通过过滤板及正压装置转移至灭菌后的收集板中静置； (4)加入提取液，通过正压装置将洗脱液收集至灭菌后的收集板中，氮气吹干后复溶检测。 3.如权利要求2所述脂溶性维生素的样品前处理方法，其特征在于，所述脂溶性维生素为维生素A、维生素E、维生素K、25-OH VD2、25-OH VD3。 4.如权利要求2所述脂溶性维生素的样品前处理方法，其特征在于，所述静置时间为5-10min。 5.如权利要求2所述脂溶性维生素的样品前处理方法，其特征在于，所述氮吹流量为1.8～2.2mL/min；或所述氮吹时间为4～6min。 6.一种脂溶性维生素的高效液相分析方法，其特征在于，所述分析方法包括采用权利要求2-5任一项所述脂溶性维生素的样品前处理方法对待测样品进行处理。 7.如权利要求6所述脂溶性维生素的高效液相分析方法，其特征在于，所述分析包括采用液相-质谱进行检测；优选的，所述液相条件如下：色谱柱为C18柱，流速：0.4～0.6mL/min；柱温：38～42℃；优选的，所述液相流动相为：(A)-甲醇，(B)-0.1％甲酸水。 8.如权利要求7所述脂溶性维生素的高效液相分析方法，其特征在于，所述液相采用梯度洗脱，梯度洗脱程序如下：0-0.5min 80％流动相B，0.5-2.0min 98％流动相B，2.0-5.0min 98％流动相B，5.0-6.0min 80％流动相B，6.0-7.0min Stop。 9.如权利要求7所述脂溶性维生素的高效液相分析方法，其特征在于，所述质谱采用电喷雾ESI源正离子方式；或所述质谱离子源温度为440～460℃；或所述质谱喷雾电压为5400～5600V；或所述质谱采用MRM模式采集数据。 10.一种提高脂溶性维生素检测准确度的方法，其特征在于，所述方法包括采用权利要求1所述降低收集板非特异性吸附的方法中的步骤。
所属类别：	发明专利