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原文传递高效液相串联质谱同时检测多种抗结核药物成分的方法

专利名称：	高效液相串联质谱同时检测多种抗结核药物成分的方法
摘要：	本发明涉及制药技术领域，尤其是涉及高效液相色谱串联质谱同时检测多种抗结核药物成分的方法。本发明提供的高效液相色谱串联质谱法高通量检测人血清中四种一类抗结核药物的方法，一次检测可同时得到吡嗪酰胺、异烟肼、乙胺丁醇和利福平四种一线抗结核药物，具有灵敏度高，重复性好，准确性高，特异性好等特点。检测得到的低值质控品重复性的变异系数(CV)≤10％，中值质控品重复性的变异系数(CV)≤10％，高值质控品重复性的变异系数(CV)≤10％；准确度的相对偏差(B)≤±15％，加标回收率为98％～113％。
专利类型：	发明专利
申请人：	北京豪思生物科技股份有限公司;江苏豪思睦可生物科技有限公司;湖南豪思生物科技有限公司
发明人：	郑佳;应洪波;栗琳;周继福;张新星;周立;丁沛瑜;苏营雪;丁亮
专利状态：	有效
申请日期：	2022-09-13T00:00:00+0800
发布日期：	2022-12-16T00:00:00+0800
申请号：	CN202211111314.X
公开号：	CN115480008A
代理机构：	北京超凡宏宇专利代理事务所(特殊普通合伙)
代理人：	张金铭
分类号：	G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72
申请人地址：	102200 北京市昌平区回龙观镇科学园路7号院1号楼1层102-2;;
主权项：	1.抗结核药物成分分离方法，其特征在于，所述抗结核药物成分含有吡嗪酰胺、异烟肼、乙胺丁醇或利福平中至少一种；所述分离方法包括，含有抗结核药物成分的待测样本经甲醇沉淀除杂后，使用F5色谱柱或C18色谱柱，采用甲醇和甲酸铵水溶液配制流动相进行高效液相色谱实现抗结核药物成分的分离。 2.根据权利要求1所述的分离方法，其特征在于，所述高效液相色谱的流动相A为含有1/1000(v/v)甲酸的甲酸铵水溶液，所述甲酸铵的浓度为5～15mM；流动相B为甲醇。 3.根据权利要求2所述的分离方法，其特征在于，所述高效液相色谱的流动相条件为，0～2min流动相A的体积比为87％～95％，2.1～4.5min流动相A的体积比为10％，4.51～5min流动相A的体积比为95％。 4.根据权利要求3所述的分离方法，其特征在于，所述高效液相色谱的检测条件为流动相流速为0.3～0.6mL/min，柱温为30～45℃，进样器温度为5～20℃，洗针液为体积比为1：(0.5～2)：(0.5～2)的甲醇、乙腈和异丙醇的混合溶液，进样量为1～20μL。 5.根据权利要求4所述的分离方法，其特征在于，所述高效液相色谱的检测条件为流动相流速为0.5mL/min，柱温为40℃，进样器温度为10℃，洗针液为体积比为1：1：1的甲醇、乙腈和异丙醇的混合溶液，进样量为1μL。 6.根据权利要求1～5任一项所述的分离方法，其特征在于，吡嗪酰胺、异烟肼、乙胺丁醇和利福平对应的内标分别为吡嗪酰胺-15N,D3、异烟肼-D4、乙胺丁醇-D4和利福平-D4。 7.根据权利要求6所述的分离方法，其特征在于，所述待测样本包括人血清；优选地，所述人血清中血红蛋白浓度小于0.04g/L。 8.权利要求1～7任一项所述分离方法在药物开发、药物筛选或科学研究中的应用，所述药物含有吡嗪酰胺、异烟肼、乙胺丁醇或利福平中至少一种。 9.抗结核药物成分浓度检测方法，其特征在于，所述抗结核药物成分含有吡嗪酰胺、异烟肼、乙胺丁醇或利福平中至少一种；所述检测方法包括采用权利要求1～7任一项所述分离方法将待测样本中含有的抗结核药物成分分离，而后经质谱检测得到各成分浓度。 10.根据权利要求9所述的检测方法，其特征在于，所述质谱检测的离子源参数为：离子源为ESI+，气帘气压强为30～40psi，碰撞气压强为medium，喷雾电压为5500V，温度为450～550℃，喷雾气GS1压强为40～55psi，喷雾气GS2压强为40～60psi；优选地，离子源参数为：离子源为ESI+，气帘气压强为40psi，碰撞气压强为7psi，喷雾电压为500V，温度为500℃，喷雾气GS1压强为55psi，喷雾气GS2压强为60psi。