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原文传递一种同时检测食品中34种食品源性兴奋剂的方法

专利名称：	一种同时检测食品中34种食品源性兴奋剂的方法
摘要：	本发明提供了一种同时检测食品中34种食品源性兴奋剂的方法，它采用高效液相色谱‑质谱联用方法检测待检样品。本发明根据34种食源性兴奋剂的物理、化学性质，通过对提取剂、提取时间等考察，建立了通用性强、重现性好的食品中34种食源性兴奋剂前处理方法；选择专属性强的液相色谱‑三重串联四极杆质谱联用仪进行测定，最终形成了一个适用性强，灵敏度高，检验结果准确可靠的检测方法，为食源性兴奋剂的检测提供有力的技术支撑。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	四川;51
申请人：	成都市食品检验研究院
发明人：	李绍波;刘川;宋娟;李君;李佳佳;林浩;姚蕾珺;吴雪莹;刘玲;万渝平;谯斌宗;王义;肖全伟;戴琴;张敏;熊梅瑾;吴文林;乔秀明;郭靓;赵红阳;左鑫;吕金珍;乔煦玮
专利状态：	有效
申请日期：	2023-08-11T00:00:00+0800
发布日期：	2023-11-24T00:00:00+0800
申请号：	CN202311018839.3
公开号：	CN117110463A
代理机构：	成都惠迪专利事务所(普通合伙)
代理人：	全学荣
分类号：	G01N30/02;G01N30/34;G01N30/72;G01N30/06;G01N30/04;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/02;G01N30/34;G01N30/72;G01N30/06;G01N30/04
申请人地址：	611135 四川省成都市温江区芙蓉大道二段10号
主权项：	1.一种同时检测食品中34种食品源性兴奋剂的方法，其特征在于：它包括如下步骤： a、取样品，前处理； b、采用高效液相色谱-质谱联用方法检测待检样品，其中，色谱条件为：色谱柱：C18色谱柱(3.0×150mm，1.7μm)；流动相：A为5mM甲酸铵溶液(含0.1％甲酸)，B为0.1％甲酸甲醇溶液；流速：0.4mL/min；柱温：40℃；进样量：5μL；洗脱程序见下表：时间/min 流动相A/％流动相B/％ 0.00 95 5 1.00 95 5 2.50 80 20 5.00 50 50 7.00 30 70 9.00 30 70 12.0 5 95 15.0 5 95 16.0 95 5 18.0 95 5 质谱条件：离子源：电喷雾离子源(ESI+/ESI-)；检测方式：多重反应监测模式(MRM)；离子源温度：400℃；雾化气压力：60psi；辅助气压力：60psi；气帘气压力：20psi；电喷雾电压：4500V；待测物离子源、定性离子对、定量离子对和质谱参数见下表： 2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：所述的34种食品源性兴奋剂分别为： β2-激动剂：肾上腺素、去甲乌药碱、曲托喹酚；蛋白同化剂：美雄酮、司坦唑醇、甲基睾酮、勃地龙、睾酮、丙酸睾酮、诺龙、丙酸诺龙、苯丙酸诺龙、群勃龙；糖皮质激素：泼尼松、泼尼松龙、甲基泼尼松龙、地塞米松、倍他米松、倍氯米松、氟氢可的松、乙酸氟氢可的松、氢化可的松；利尿剂：氢氯噻嗪、乙酰唑胺、氯噻嗪、氯噻酮、呋塞米、苄氟噻嗪、氨苯蝶啶、螺内酯、坎利酮、精磺胺、托拉塞米、布美他尼。 3.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于：步骤a所述的样品前处理方法包括提取、净化步骤，所述的提取方法为： a、准确称取试样2.5～5g，置于50mL离心管中，加入100μL混合同位素内标中间液Ⅱ、5mL水、均质子，涡旋混匀5min； b、加入5％甲酸乙腈溶液20mL，涡旋混匀15min，超声30min，再加入8g氯化钠，涡旋混匀5min，于4℃条件下离心5min，取上清液于另一离心管中，加入10mL乙腈饱和正己烷溶液，涡旋混匀5min，于4℃条件下离心5min，弃去正己烷层，下层溶液待净化；所述的净化方法为：取10mL下层溶液，以低于1mL/min的流速完全通过固相萃取柱，再用5％甲酸乙腈5mL洗脱，收集全部流出液至梨形瓶中，45℃旋蒸至近干，加入4％甲酸甲醇-4％甲酸水溶液，超声2min，涡旋混合1min溶解残渣并定容至1.0mL，过有机滤膜，滤液供液相色谱-质谱/质谱仪测定。 4.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于：所述的同位素内标中间液Ⅱ的制备方法为：准确移取混合同位素内标中间液Ⅰ1mL于10mL容量瓶中，用4％甲酸甲醇-4％甲酸水溶液定容至刻度，摇匀，配制成浓度为100ng/mL～5000ng/mL的混合同位素内标中间液Ⅱ；所述的同位素内标中间液Ⅰ的制备方法为：分别准确移取美雄酮-D3、司坦唑醇-D3、甲基睾酮-D3、勃地酮-D3、睾酮-D3、丙酸睾酮-D3、诺龙-D3、丙酸诺龙-D3、苯丙酸诺龙-D5、群勃龙-D3、泼尼松-D8、泼尼松龙-D6、甲基泼尼松龙-D3、地塞米松-D5、倍他米松-D5、倍氯米松-D5、氟氢可的松-D5同位素内标储备液(5.4.2)100μL，氢化可的松-D3、氢氯噻嗪-D2、乙酰唑胺-D3、氯噻嗪-13C,15N2、氯噻酮-D4、呋塞米-D5、苄氟噻嗪-D5、氨苯蝶啶-D5、坎利酮-D6、4-氨基-6-氯-1,3苯二磺酰胺-15N2、托拉塞米-D7、布美他尼-D5、去甲乌药碱-D4、曲托喹酚-D9同位素内标储备液(5.4.2)1000μL，肾上腺素-D3同位素内标储备液(5.4.2)5000μL，置于同一10mL容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀，配制成浓度为1.00μg/mL～50.0μg/mL的混合内标标准中间液Ⅰ。 5.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于：所述的乙腈饱和正己烷溶液的制备方法为：量取500mL正己烷，加入50mL乙腈，振摇混合后静置分层，取上层溶液备用。 6.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于：所述的固相萃取柱是通过式反相混合型亲水亲脂平衡共聚物固相萃取柱。 7.根据权利要求3所述的检测方法，其特征在于：所述的4％甲酸甲醇-4％甲酸水溶液的制备方法是：量取4％甲酸甲醇溶液300mL，加入4％甲酸水溶液700mL，混匀。
所属类别：	发明专利