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一种新型蛋白质分子量标准及其制备方法
| 专利名称： | 一种新型蛋白质分子量标准及其制备方法 |
| 摘要： | 本发明属于生物工程技术领域。本发明公开了一种新型蛋白质分子量 标准及其制备方法。具体方法是将不同数目SPA(金黄色葡萄球菌蛋白A， Staphylococcal protein A)串联表达得到的重组蛋白作为蛋白质分子量 标准。本发明还公开了利用SPA具有与多种哺乳动物IgG的Fc段结合的 能力，应用该新型蛋白质分子量标准并最终使其在胶片上显影的方法。本 发明还公开了通过基因工程技术优化SPA核苷酸序列的方法及其优化后的 核苷酸序列。本发明还公开了利用BsaI酶切位点将多个SPA串联表达并 纯化的方法。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 浙江;33 |
| 申请人： | 杭州松华生物科技有限公司 |
| 发明人： | 余铭恩;冯俊涛;吴琼杉;李晓照;敖 翔;余 卫 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2009-02-26T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2019-01-01T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN200910095982.6 |
| 公开号： | CN101556287 |
| 分类号： | G01N33/68(2006.01)I |
| 申请人地址： | 310000浙江省杭州市余杭区临平星桥街道广厦天都城天湖苑10-1-501 |
| 主权项： | 1.一种新型蛋白质分子量标准及其制备方法，其特征在于包括以下步骤： (1)将天然SPA基因采用大肠杆菌偏爱密码子将其核苷酸序列优化，优 化后的核苷酸序列是序列表中SEQ ID NO：1。 (2)以优化后的SPA基因序列为模板设计引物并化学合成，通过引物拼接 并PCR扩增的方法得到目的片段。 (3)将目的片段以不同串联数目的方式插入表达载体PET-28a(+)，并在大 肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达。 (4)通过镍琼脂糖亲和层析纯化，得到一系列串联不同数目SPA的重组 蛋白，即蛋白质分子量标准。 (5)通过蛋白免疫印迹实验证实该蛋白质分子量标准能与多种哺乳动物 IgG抗体结合。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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