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原文传递 一种玻载电泳法分析粘多糖的方法
专利名称: 一种玻载电泳法分析粘多糖的方法
摘要: 本发明公开了一种玻载电泳法分析粘多糖的方法,操作步骤,将琼脂糖凝胶在玻璃板上铺成电泳用胶板,把这个玻载胶板放置在适当的电泳槽中,经点样、电泳后,取出玻载胶板,先在60-80℃烘干,然后用甲苯胺蓝染色,用自来水脱色,最后再在60-80℃烘干,得到最终电泳结果。该方法使得电泳胶板可长期保存;单次上样量从一般平板电泳的12-24个提高到72个,便于大规模分析;能有效的将肝素、硫酸皮肤素、硫酸软骨素、硫酸类肝素等粘多糖物质分离开,有助于对粘多糖准确地定性定量。
专利类型: 发明专利
国家地区组织代码: 广东;44
申请人: 深圳市天道医药有限公司
发明人: 史绍鹏;徐归来;李建科
专利状态: 有效
申请日期: 2009-07-02T00:00:00+0800
发布日期: 2019-01-01T00:00:00+0800
申请号: CN200910040788.8
公开号: CN101936944A
代理机构: 广州知友专利商标代理有限公司 44104
代理人: 宣国华
分类号: G01N27/447(2006.01)I
申请人地址: 518057 广东省深圳市南山区高新中一道19号
主权项: 一种玻载电泳法分析粘多糖的方法,其特征在于:所述方法包括下述顺序步骤,a、准备一块洁净干燥的玻璃板,其宽度与所使用电泳槽宽度相吻合,其长度略短于所用电泳槽,用硬质胶带围绕玻璃板周长紧密缠绕一周使形成一个可容纳5mm深液体的方形容器,取格式梳架于相应上样位置,然后放置在水平的桌面,将琼脂糖在沸水中溶于pH值为5.8、浓度为0.04mol/L乙酸钡 乙酸缓冲溶液,使琼脂浓度为0.5 1%,待冷却至约50℃时倒在准备好的玻璃板上,厚度为1 5mm,凝固后移去格式梳,撕掉胶带即为电泳用胶板;b、将1 5μL的浓度为1mg/mL的粘多糖溶液上样于点样孔;c、于pH5.8、浓度为0.04mol/L的乙酸钡 乙酸缓冲溶液中,以5 7mA/cm胶宽稳流电泳1小时;d、再放入pH9.0、浓度为0.05mol/L的1、2 二氨基丙烷 乙酸缓冲溶液中,以5 7mA/cm胶宽稳流电泳1小时;e、将凝胶连带玻璃板取出,放入干燥箱中60 80℃烘干,再放入装有0.2%甲苯胺蓝溶液的容器中于脱色摇床上染色30分钟;f、将凝胶板放入装有水的容器中浸泡脱色,更换1 2次水,胶上背景透明后重新放入干燥箱中60 80℃烘干。
所属类别: 发明专利
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