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原文传递 同时测定血浆中姜黄素和5-氟尿嘧啶浓度的HPLC分析方法
专利名称: 同时测定血浆中姜黄素和5-氟尿嘧啶浓度的HPLC分析方法
摘要: 本发明属于药物动力学分析技术领域,涉及一种同时测定动物血浆中姜黄素和5‑氟尿嘧啶浓度的HPLC分析方法。起步骤包括标准品溶液的制备、样品预处理、样品分离、检测样品峰面积和制作标准曲线。该方法克服了姜黄素和5‑氟尿嘧啶的极性相差大,在同一个色谱体系中不容易洗脱分离的困难,能够在血浆中同时测定姜黄素和5‑氟尿嘧啶的浓度。
专利类型: 发明专利
国家地区组织代码: 四川;51
申请人: 西南医科大学
发明人: 赵领;皮超;魏郁梦;徐婷;梁靖;赵仕杰;杨红茹;郭璞;胡美;左英
专利状态: 有效
发布日期: 2019-01-01T00:00:00+0800
申请号: CN201810761763.6
公开号: CN108956816A
代理机构: 重庆华科专利事务所 50123
代理人: 夏洪
分类号: G01N30/02(2006.01)I;G01N30/74(2006.01)I;G01N30/88(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/02;G01N30/74;G01N30/88
申请人地址: 646000 四川省泸州市香林路1段1号
主权项: 1.一种同时测定血浆中姜黄素和5‑氟尿嘧啶浓度的HPLC分析方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤一、标准品溶液的制备将姜黄素标准品和5‑氟尿嘧啶标准品按摩尔比为1:1混合,用甲醇溶解,得姜黄素和5‑氟尿嘧啶的混合标准品母液,再用甲醇稀释,得一系列浓度的姜黄素和5‑氟尿嘧啶的混合标准品溶液;步骤二、样品预处理取一系列等量的动物空白血浆,分别加入等量的步骤一所述的一系列浓度的姜黄素和5‑氟尿嘧啶混合标准品溶液,得一系列待测动物血浆样品,向各待测动物血浆样品中加入柠檬酸溶液或酒石酸溶液,涡旋,加入萃取剂,旋涡、离心,取上层有机溶液氮气吹干得干燥物,向干燥物中加入复溶剂,涡旋、离心,取上清液即为供试品溶液;步骤三、样品分离采用色谱柱为Inertsil ODS‑SP C18,5μm,4.6×250mm,保护柱Phenomenex C18,4.0×3.0mm;柱温25℃,进样量20μL,分别以甲醇和水混合液、乙腈和缓冲液混合液为流动相,对各供试品溶液进行梯度洗脱;步骤四、检测样品峰面积对进HPLC分析的供试品溶液采用通用型紫外检测器检测峰面积,在425nm波长处检测姜黄素的峰面积,在265nm波长处检测5‑氟尿嘧啶的峰面积,经过25~30分钟HPLC分析后得到姜黄素和5‑氟尿嘧啶的峰面积;步骤五、制作标准曲线分别以动物血浆样品中姜黄素和5‑氟尿嘧啶的浓度为横坐标,对应的姜黄素和5‑氟尿嘧啶的峰面积为纵坐标,绘制标准曲线得到标准曲线方程;将姜黄素和5‑氟尿嘧啶的峰面积带入标准曲线方程中换算得姜黄素和5‑氟尿嘧啶的浓度。
所属类别: 发明专利
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