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一种完整N-糖蛋白一级结构全面鉴定方法
| 专利名称： | 一种完整N-糖蛋白一级结构全面鉴定方法 |
| 摘要： | 本发明涉及一种完整N‑糖蛋白一级结构全面鉴定方法，包括以下步骤：N‑糖蛋白的样品预处理，即糖蛋白溶液与DTT溶液反应后用电喷雾缓冲溶液稀释；通过注射器和注射器泵上样，在正离子模式下喷雾，基于HCD解离的轨道阱质谱仪采集样品的一级谱和二级谱；N‑多糖前体离子理论数据库的生成；N‑糖蛋白前体离子理论数据库的生成；N‑多糖拓扑结构的解析；N‑糖蛋白结构的解析。与现有技术相比，本发明能够在完整蛋白水平上同时获得多糖拓扑结构及蛋白的结构解析并且获得多糖选择性解离的特征碎片离子，方法步骤简单，鉴定高效而准确。适用于糖蛋白基于高分辨串级质谱分析的多糖拓扑结构鉴定、糖基化位点确定、蛋白骨架解析。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 上海;31 |
| 申请人： | 同济大学 |
| 发明人： | 李莎莎;田志新 |
| 专利状态： | 有效 |
| 发布日期： | 2019-01-01T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201810503019.6 |
| 公开号： | CN108761084A |
| 代理机构： | 上海科盛知识产权代理有限公司 31225 |
| 代理人： | 褚明伟 |
| 分类号： | G01N33/68(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N33;G01N33/68 |
| 申请人地址： | 200092 上海市杨浦区四平路1239号 |
| 主权项： | 1.一种完整N‑糖蛋白一级结构全面鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)N‑糖蛋白的样品预处理：糖蛋白溶液与DTT溶液反应后用电喷雾缓冲溶液稀释；(2)N‑糖蛋白的一级质谱及二级质谱分析：通过注射器和注射器泵上样，在正离子模式下喷雾，基于HCD解离的轨道阱质谱仪采集样品的一级谱和二级谱；(3)N‑多糖前体离子理论数据库的生成；(4)N‑糖蛋白前体离子理论数据库的生成；(5)N‑多糖拓扑结构的解析：(6)N‑糖蛋白结构的解析。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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