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一种基于微波检测古代丝织品的方法
| 专利名称： | 一种基于微波检测古代丝织品的方法 |
| 摘要： | 本发明涉及文物检测领域，公开了一种基于微波检测古代丝织品的方法。本发明先采用硝酸钙、甲酸体系制备桑蚕丝素蛋白，继而制备了一种量子点珠标记的丝素蛋白抗体，随之将丝素蛋白和丝织品文物样进行微波Elisa检测，通过荧光强度值即可判断文物样中是否含有桑蚕丝。本发明样品用量少，具有快速，准确，灵敏度高的特点，对腐坏的丝织品有良好的检测效果。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 浙江;33 |
| 申请人： | 浙江理工大学 |
| 发明人： | 王秉;李青青;刘林帅;欧阳毅;彭志勤;胡智文 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请号： | CN201811055063.1 |
| 公开号： | CN109187935A |
| 代理机构： | 嘉兴永航专利代理事务所(普通合伙) 33265 |
| 代理人： | 蒋文 |
| 分类号： | G01N33/36(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N33 |
| 申请人地址： | 310018 浙江省杭州市下沙高教园区2号大街浙江理工大学 |
| 主权项： | 1.一种基于微波检测古代丝织品的方法，其特征在于，以µg、g和mL计，包括以下步骤：A)称取4‑6g桑蚕丝置于180‑220mL含0.018‑0.022M的碳酸钠溶液中，水浴55‑65min，水浴温度为75‑85℃，取出用去离子水清洗三次以上，干燥，得到丝素；B)取1.8‑2.2g烘干的丝素，2.3‑2.7g硝酸钙，加入甲酸48‑52mL，搅拌80‑100min，过滤加入碳酸氢钠直至溶液呈中性，透析冷冻干燥后，将得到的丝素蛋白研磨成丝素蛋白粉，备用；C)称取18‑22mg硒化镉/硫化锌量子点，118‑122mg聚甲基丙烯酸甲酯，78‑82mg的聚马来酸酐‑十八烯共聚物，加入至1.8‑2.2ml的氯仿中，与4.5‑5.5ml的3mg/ml的十二烷基磺酸钠水溶液混合，超声波均化处理，再将氯仿蒸发；然后将所得水溶性量子点珠离心纯化，用去离子水清洗2‑4次得到量子点珠；D)取0.9‑1.1µg的1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺，0.1‑0.14mg的步骤C）所得水溶性量子点珠加入到2.5‑3.1ml的PBS 7.4缓冲液中，边缓慢搅拌边逐滴加入90‑110µl 用1wt%牛血清蛋白稀释至1000倍的丝素蛋白抗体，在室温下放置35‑45min，离心，取沉淀物用600µl PBS 7.4缓冲液重悬，然后在1‑5℃下备用；E)取0.02‑0.2g文物样溶解于100ml的CB 9.6缓冲液，混合搅拌均匀，静置，取80‑120µl上清液加入到酶标板a列，将步骤B)所得丝素蛋白粉用CB 9.6缓冲液配制成100µg/ml的丝素蛋白溶液，取80‑120µl加入到酶标板b、c列，b列作为阳性对照，c列作为空白对照，取80‑120µl PBS 7.4缓冲液加入到酶标板d列作为阴性对照，将酶标板置于微波炉中低档孵育2‑4min，吸出孔内液体，用PBS 7.4缓冲液洗涤；F)每孔中加入封闭液180‑220µl，置于微波炉中孵育2‑4min，吸出孔内液体，用PBS 7.4缓冲液洗涤；G)取步骤D）所得溶液80‑120µl加入到酶标板a，b，d列中，取封闭液80‑120µl加入到c列中，置于微波炉中孵育2‑4min，吸出孔内液体，用PBS 7.4缓冲液洗涤；H)使用荧光酶标仪测定荧光值，将阴性对照的OD均值+3个SD作为cut‑off值，若a列的荧光平均值＞d列的cut‑off值，则判定文物样中含有桑蚕丝。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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