专利名称: |
一种动物肝脏内乙酰辅酶A的液质联用测定方法 |
摘要: |
本发明公开了一种动物肝脏内乙酰辅酶A的液质联用测定方法,具体是先取新鲜动物肝脏,并将肝脏内血液冲洗干净,然后将肝脏样本与前处理液混合后匀浆,制得组织匀浆液,在匀浆液中加入内标,混和均匀后离心,取上清液作为待测样品,最后将样品送入液相色谱‑质谱联用检测仪进行检测,采集数据,经标准曲线回归计算,得到动物肝脏内乙酰辅酶A的浓度;其中,所述前处理液是含有二硫苏糖醇和苯甲基磺酰氟的高氯酸水溶液。与现有的酶联免疫标记法,本发明采用的液质联用方法快速、可靠,操作步骤简化,适合批量测定肝脏内乙酰辅酶A的含量。 |
专利类型: |
发明专利 |
国家地区组织代码: |
江苏;32 |
申请人: |
中国药科大学 |
发明人: |
邱志霞;李宁;黄芳 |
专利状态: |
有效 |
申请号: |
CN201811182991.4 |
公开号: |
CN109270202A |
代理机构: |
南京经纬专利商标代理有限公司 32200 |
代理人: |
黄欣 |
分类号: |
G01N30/88(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N30 |
申请人地址: |
211198 江苏省南京市江宁区龙眠大道639号 |
主权项: |
1.一种动物肝脏内乙酰辅酶A的液质联用测定方法,其特征在于:包括以下步骤:步骤1,样本获取,取新鲜动物肝脏,并将肝脏内血液冲洗干净;步骤2,样本前处理,将步骤1的肝脏样本与前处理液混合后匀浆,制得组织匀浆液,在匀浆液中加入内标,混和均匀后离心,取上清液作为待测样品;步骤3,样本测定,将步骤2的样品送入液相色谱‑质谱联用检测仪进行检测,采集数据,经标准曲线回归计算,得到动物肝脏内乙酰辅酶A的浓度;其中,所述前处理液是含有二硫苏糖醇和苯甲基磺酰氟的高氯酸水溶液;步骤3中液相色谱‑质谱联用检测仪的检测条件具体如下:液相色谱条件:C18色谱柱,流动相A为0.1%甲酸的水溶液,流动相B为乙腈,柱温40℃,流速0.8 mL/min, 梯度洗脱,初始流动相为流动相A和流动相B按体积比95%:5%保持0.5 min,在0.5 min内流动相B升高为70%,并在此条件下保持2.0 min,其后在0.5 min内流动相B降为5%,保持0.5 min,总采集时间为4 min;质谱条件:离子源为电喷雾离子源,正离子模式,扫描类型为选择反应监测或多级反应监测,离子源喷雾电压为4500V,离子传输管温度为350℃,雾化气和辅助气分别为40和20 Arb,氩气压力设定为1.0mTorr,扫描时间为0.2s,定量方式为内标法,定量分析的离子对分别为:乙酰辅酶A,810→303,内标,地西泮,285→193,碰撞能量均为31eV。 |
所属类别: |
发明专利 |