详情

原文传递荷丹片液质联用测定方法

专利名称：	荷丹片液质联用测定方法
摘要：	本发明涉及一种荷丹片液质联用测定方法，所述方法包括将补骨脂苷、异补骨脂苷、金丝桃苷、槲皮素3‑O‑葡萄糖醛酸苷、异槲皮苷、番泻苷B、紫云英苷、番泻苷A、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、荷叶碱、丹酚酸A、补骨脂素、异补骨脂素、丹酚酸C、大黄酸、新补骨脂异黄酮、补骨脂宁、隐丹参酮、补骨脂酚作为对照品，配制成对照品溶液A、B与供试品溶液，注入液质联用仪中，其中A在正离子模式，B负离子模式在得到质谱图，根据质谱图计算供试品中有效成分的含量，色谱条件：Agilent C18色谱柱(4.6mm×250mm，5μm)，流速0.4mL·min‑1，进样体积2μL。柱温30℃，流动相0.2％磷酸水溶液(A)‑乙腈(B)作为流动相，进行梯度洗脱。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	江西;36
申请人：	南昌济顺制药有限公司
发明人：	曾英姿;周万辉;赵磊
专利状态：	有效
申请日期：	2021-12-03T00:00:00+0800
发布日期：	2022-03-01T00:00:00+0800
申请号：	CN202111469916.8
公开号：	CN114113403A
代理机构：	北京华科联合专利事务所(普通合伙)
代理人：	王为;李旭
分类号：	G01N30/02;G01N30/72;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/02;G01N30/72
申请人地址：	330115 江西省南昌市桑海经济开发区新祺周荣欣大道
主权项：	1.一种荷丹片液质联用测定方法，其特征在于，包括以下步骤： 1)对照品溶液的配制：将补骨脂苷、异补骨脂苷、金丝桃苷、槲皮素3-O-葡萄糖醛酸苷、异槲皮苷、番泻苷B、紫云英苷、番泻苷A、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、荷叶碱、丹酚酸A、补骨脂素、异补骨脂素、丹酚酸C、大黄酸、新补骨脂异黄酮、补骨脂宁、隐丹参酮、补骨脂酚作为对照品，配制成对照品溶液； 2)供试品溶液的配制：将荷丹片粉碎后用溶剂将有效成份溶出； 3)测定：将对照品溶液和供试品溶液注入注入液质联用仪中，得到色谱图； 4)，根据色谱图计算供试品溶液中补骨脂苷、异补骨脂苷、金丝桃苷、槲皮素3-O-葡萄糖醛酸苷、异槲皮苷、番泻苷B、紫云英苷、番泻苷A、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、荷叶碱、丹酚酸A、补骨脂素、异补骨脂素、丹酚酸C、大黄酸、新补骨脂异黄酮、补骨脂宁、隐丹参酮、补骨脂酚的含量。其中，所述色谱条件如下：液相色谱条件Agilent C18色谱柱(4.6mm×250mm，5μm)，流速0.4mL·min-1，进样体积2μL。柱温30℃，流动相0.2％磷酸水溶液(A)-乙腈(B)作为流动相，进行梯度洗脱，梯度洗脱过程如下：质谱条件：电喷雾离子源(ESI)，正、负离子模式下分别扫描。正离子模式干燥气温度350℃，毛细管电压35V，喷雾电压3.4kV，干燥气流速：10L/min，干燥气压力：35psi；负离子模式干燥气温度400℃，毛细管电压-35V，喷雾电压-3.4kV，干燥气流速：10L/min，干燥气压力：35psi；检测方式：多反应监测(MRM)。 2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，其中，步骤1)所述对照品溶液的配制包括以下步骤：取补骨脂苷、异补骨脂苷、金丝桃苷、槲皮素3-O-葡萄糖醛酸苷、异槲皮苷、番泻苷B、紫云英苷、番泻苷A、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、荷叶碱、丹酚酸A、补骨脂素、异补骨脂素、丹酚酸C、大黄酸、新补骨脂异黄酮、补骨脂宁、隐丹参酮、补骨脂酚对照品适量，精密称定，分别置于10mL容量瓶中，加甲醇溶解定容，配制成浓度分别为：227.6μg/mL、128.3μg/mL、169.5μg/mL、248.4μg/mL、135.7μg/mL、185.3μg/mL、119.2μg/mL、84.2μg/mL、193.8μg/mL、74.8μg/mL、236.1μg/mL、149.3μg/mL、106.2μg/mL、196.4μg/mL、125.8μg/mL、62.7μg/mL、174.8μg/mL、58.3μg/mL、44.2μg/mL、138.3μg/mL、96.4μg/mL的对照品储备液。 3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，其中，步骤1)所述对照品溶液的配制，进一步包括以下步骤：取补骨脂苷、异补骨脂苷、金丝桃苷、异槲皮苷、荷叶碱、补骨脂素、异补骨脂素、新补骨脂异黄酮、补骨脂宁、隐丹参酮的对照品储备液制得混合对照品溶液A。 4.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，其中，步骤1)所述对照品溶液的配制，进一步包括以下步骤：取槲皮素3-O-葡萄糖醛酸苷、番泻苷B、紫云英苷、番泻苷A、紫草酸、迷迭香酸、丹酚酸B、丹酚酸A、丹酚酸C、大黄酸、补骨脂酚的对照品储备液制得混合对照品溶液B。 5.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，其中，步骤2)所述供试品溶液的配制，步骤如下：取荷丹片，粉碎，称取约0.5g，精密称定，置于25mL容量瓶中，加入适量甲醇，超声处理15min，放冷，用甲醇定容至刻度线，密塞摇匀，取适量12000rpm离心10min，精密移取上清液5mL至10mL容量瓶中，加50％甲醇定容至刻度，混匀，即得供试品溶液。 6.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，其中，步骤2)所述测定，方法如下：吸取混合对照品溶液A、B与供试品溶液，注入液质联用仪中，其中A在正离子模式，B负离子模式在得到质谱图。
所属类别：	发明专利