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原文传递一种荷丹片中多种有效成分的含量测定方法

专利名称：	一种荷丹片中多种有效成分的含量测定方法
摘要：	本发明涉及荷丹片中多种有效成分的含量测定方法，包括以下步骤：(1)对照品溶液的制备：取荷丹片各标准品适量，精密称定，分别置于容量瓶中，加甲醇溶解定容，得到对照品溶液；(2)供试品溶液的制备：取荷丹片，粉碎，置于容量瓶中，加入适量甲醇，超声处理，放冷，用甲醇定容至刻度线，密塞摇匀，取适量离心，移取上清液至容量瓶中，加甲醇定容至刻度，混匀，即得供试品溶液；(3)测定方法：吸取混合对照品溶液和供试品溶液，注入高效液相色谱仪中，得到色谱图，根据色谱图计算供试品中有效成分的含量；色谱条件：色谱柱C18、流速0.1‑0.6mL/min；柱温20‑60℃，以甲酸水溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，进行梯度洗脱。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	江西;36
申请人：	南昌济顺制药有限公司
发明人：	王跃飞;丁佳敏;王丹妮;曾英姿;安少凯;赵磊
专利状态：	有效
申请日期：	2019-09-20T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-22T00:00:00+0800
申请号：	CN201910893049.7
公开号：	CN110487948A
代理机构：	北京华科联合专利事务所(普通合伙)
代理人：	王为;孟旭
分类号：	G01N30/88(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	330115 江西省南昌市桑海经济开发区新祺周荣欣大道
主权项：	1.荷丹片中多种有效成分的含量测定方法，其特征在于，包括以下步骤： (1)对照品溶液的制备取荷丹片各标准品适量，精密称定，分别置于容量瓶中，加甲醇溶解定容，配制成每1mL含有适量补骨脂苷(PO)、异补骨脂苷(IPO)、金丝桃苷(Hyp)、槲皮素3-O-葡萄糖醛酸苷(Qug)、异槲皮苷(IQ)、番泻苷B(SeB)、紫云英苷(Ast)、番泻苷A(SeA)、迷迭香酸(RoA)、紫草酸(LiA)、丹酚酸B(SaB)、荷叶碱(Nuc)、丹酚酸A(SaA)、补骨脂素(P)、异补骨脂素(IP)、丹酚酸C(SaC)、大黄酸(Rhe)、新补骨脂异黄酮(Neo)、补骨脂宁(Cor)、隐丹参酮(Cry)、补骨脂酚(Bak)的对照品储备液；取补骨脂苷、异补骨脂苷、金丝桃苷、槲皮素3-O-葡萄糖醛酸苷、异槲皮苷、番泻苷B、紫云英苷、番泻苷A、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、荷叶碱、丹酚酸A、补骨脂素、异补骨脂素、丹酚酸C、大黄酸、新补骨脂异黄酮、补骨脂宁、隐丹参酮、补骨脂酚对照品储备液至容量瓶中，甲醇定容，混匀，得到混合对照品储备液； (2)供试品溶液的制备取荷丹片，粉碎，置于容量瓶中，加入适量甲醇，超声处理，放冷，用甲醇定容至刻度线，密塞摇匀，取适量离心，移取上清液至容量瓶中，加甲醇定容至刻度，混匀，即得供试品溶液； (3)测定方法吸取混合对照品储备液和供试品溶液，注入高效液相色谱仪中，得到色谱图，根据色谱图计算供试品中有效成分的含量；色谱条件：色谱柱C18、流速0.1-0.6mL/min；柱温20-60℃，以甲酸水溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，进行梯度洗脱。 2.根据权利要求1所述的含量测定方法，其特征在于，(1)对照品溶液的制备：取荷丹片各标准品适量，精密称定，分别置于10mL容量瓶中，加甲醇溶解定容，配制成每1mL含有补骨脂苷(PO)2.058mg、异补骨脂苷(IPO)2.290mg、金丝桃苷(Hyp)1.988mg、槲皮素3-O-葡萄糖醛酸苷(Qug)2.014mg、异槲皮苷(IQ)2.152mg、番泻苷B(SeB)1.082mg、紫云英苷(Ast)1.102mg、番泻苷A(SeA)0.224mg、迷迭香酸(RoA)1.064mg、紫草酸(LiA)1.228mg、丹酚酸B(SaB)2.144mg、荷叶碱(Nuc)1.012mg、丹酚酸A(SaA)1.120mg、补骨脂素(P)0.999mg、异补骨脂素(IP)2.072mg、丹酚酸C(SaC)0.348mg、大黄酸(Rhe)0.990mg、新补骨脂异黄酮(Neo)1.004mg、补骨脂宁(Cor)1.044mg、隐丹参酮(Cry)1.080mg、补骨脂酚(Bak)1.338mg的对照品储备液；取补骨脂苷、异补骨脂苷、金丝桃苷、槲皮素3-O-葡萄糖醛酸苷、异槲皮苷、番泻苷B、紫云英苷、番泻苷A、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、荷叶碱、丹酚酸A、补骨脂素、异补骨脂素、丹酚酸C、大黄酸、新补骨脂异黄酮、补骨脂宁、隐丹参酮、补骨脂酚对照品储备液适量至10mL容量瓶中，甲醇定容，混匀，得浓度分别为：137.0μg/mL、78.23μg/mL、133.6μg/mL、165.4μg/mL、75.59μg/mL、6.372μg/mL、24.78μg/mL、8.212μg/mL、16.04μg/mL、16.73μg/mL、211.5μg/mL、53.81μg/mL、35.04μg/mL、21.42μg/mL、31.64μg/mL、5.907μg/mL、22.48μg/mL、4.030μg/mL、0.891μg/mL、13.29μg/mL、9.904μg/mL的混合对照品储备液。 3.根据权利要求1所述的含量测定方法，其特征在于，(2)供试品溶液的制备：取荷丹片，粉碎，称取约0.5g，精密称定，置于10-50mL容量瓶中，加入适量甲醇，超声处理10-25min，放冷，用甲醇定容至刻度线，密塞摇匀，取适量离心，精密移取上清液5mL至10mL容量瓶中，加25-100％甲醇定容至刻度，混匀，即得供试品溶液。 4.根据权利要求1所述的含量测定方法，其特征在于，(2)供试品溶液的制备：取荷丹片，粉碎，称取约0.5g，精密称定，置于25mL容量瓶中，加入适量甲醇，超声处理15min，放冷，用甲醇定容至刻度线，密塞摇匀，取适量14000rpm离心10min，精密移取上清液5mL至10mL容量瓶中，加50％甲醇定容至刻度，混匀，即得供试品溶液。 5.根据权利要求1所述的含量测定方法，其特征在于，(3)测定方法中，色谱条件：采用色谱柱ACQUITYBEH C18、流速0.3mL/min；柱温40℃，以甲酸水溶液和乙腈作为流动相，进行梯度洗脱。 6.根据权利要求1所述的含量测定方法，其特征在于，(3)测定方法中，色谱条件，梯度洗脱过程如下： 7.根据权利要求1所述的含量测定方法，其特征在于，包括以下步骤： (1)对照品溶液的制备取荷丹片各标准品适量，精密称定，分别置于10mL容量瓶中，加甲醇溶解定容，配制成每1mL含有补骨脂苷(PO)2.058mg、异补骨脂苷(IPO)2.290mg、金丝桃苷(Hyp)1.988mg、槲皮素3-O-葡萄糖醛酸苷(Qug)2.014mg、异槲皮苷(IQ)2.152mg、番泻苷B(SeB)1.082mg、紫云英苷(Ast)1.102mg、番泻苷A(SeA)0.224mg、迷迭香酸(RoA)1.064mg、紫草酸(LiA)1.228mg、丹酚酸B(SaB)2.144mg、荷叶碱(Nuc)1.012mg、丹酚酸A(SaA)1.120mg、补骨脂素(P)0.999mg、异补骨脂素(IP)2.072mg、丹酚酸C(SaC)0.348mg、大黄酸(Rhe)0.990mg、新补骨脂异黄酮(Neo)1.004mg、补骨脂宁(Cor)1.044mg、隐丹参酮(Cry)1.080mg、补骨脂酚(Bak)1.338mg的对照品储备液；取补骨脂苷、异补骨脂苷、金丝桃苷、槲皮素3-O-葡萄糖醛酸苷、异槲皮苷、番泻苷B、紫云英苷、番泻苷A、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、荷叶碱、丹酚酸A、补骨脂素、异补骨脂素、丹酚酸C、大黄酸、新补骨脂异黄酮、补骨脂宁、隐丹参酮、补骨脂酚对照品储备液适量至10mL容量瓶中，甲醇定容，混匀，得浓度分别为：137.0μg/mL、78.23μg/mL、133.6μg/mL、165.4μg/mL、75.59μg/mL、6.372μg/mL、24.78μg/mL、8.212μg/mL、16.04μg/mL、16.73μg/mL、211.5μg/mL、53.81μg/mL、35.04μg/mL、21.42μg/mL、31.64μg/mL、5.907μg/mL、22.48μg/mL、4.030μg/mL、0.891μg/mL、13.29μg/mL、9.904μg/mL的混合对照品储备液。 (2)供试品溶液的制备取荷丹片，粉碎，称取约0.5g，精密称定，置于25mL容量瓶中，加入适量甲醇，超声处理15min，放冷，用甲醇定容至刻度线，密塞摇匀，取适量14000rpm离心10min，精密移取上清液5mL至10mL容量瓶中，加50％甲醇定容至刻度，混匀，即得供试品溶液； (3)测定方法吸取混合对照品储备液和供试品溶液，注入高效液相色谱仪中，得到色谱图，根据色谱图计算供试品溶液中有效成分的含量；色谱条件：采用色谱柱ACQUITYBEH C18、流速0.3mL/min；柱温40℃，以0.1％甲酸水溶液和乙腈作为流动相，进行梯度洗脱，梯度洗脱过程如下： 8.根据权利要求1所述的含量测定方法，其特征在于，包括以下步骤： (1)对照品溶液的制备取荷丹片各标准品适量，精密称定，分别置于10mL容量瓶中，加甲醇溶解定容，配制成每1mL含有补骨脂苷(PO)2.058mg、异补骨脂苷(IPO)2.290mg、金丝桃苷(Hyp)1.988mg、槲皮素3-O-葡萄糖醛酸苷(Qug)2.014mg、异槲皮苷(IQ)2.152mg、番泻苷B(SeB)1.082mg、紫云英苷(Ast)1.102mg、番泻苷A(SeA)0.224mg、迷迭香酸(RoA)1.064mg、紫草酸(LiA)1.228mg、丹酚酸B(SaB)2.144mg、荷叶碱(Nuc)1.012mg、丹酚酸A(SaA)1.120mg、补骨脂素(P)0.999mg、异补骨脂素(IP)2.072mg、丹酚酸C(SaC)0.348mg、大黄酸(Rhe)0.990mg、新补骨脂异黄酮(Neo)1.004mg、补骨脂宁(Cor)1.044mg、隐丹参酮(Cry)1.080mg、补骨脂酚(Bak)1.338mg的对照品储备液；取补骨脂苷、异补骨脂苷、金丝桃苷、槲皮素3-O-葡萄糖醛酸苷、异槲皮苷、番泻苷B、紫云英苷、番泻苷A、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、荷叶碱、丹酚酸A、补骨脂素、异补骨脂素、丹酚酸C、大黄酸、新补骨脂异黄酮、补骨脂宁、隐丹参酮、补骨脂酚对照品储备液适量至10mL容量瓶中，甲醇定容，混匀，得浓度分别为：137.0μg/mL、78.23μg/mL、133.6μg/mL、165.4μg/mL、75.59μg/mL、6.372μg/mL、24.78μg/mL、8.212μg/mL、16.04μg/mL、16.73μg/mL、211.5μg/mL、53.81μg/mL、35.04μg/mL、21.42μg/mL、31.64μg/mL、5.907μg/mL、22.48μg/mL、4.030μg/mL、0.891μg/mL、13.29μg/mL、9.904μg/mL的混合对照品储备液； (2)供试品溶液的制备取荷丹片，粉碎，称取约0.5g，精密称定，置于25mL容量瓶中，加入适量甲醇，超声处理(功率500W，频率40kHz)15min，放冷，用甲醇定容至刻度线，密塞摇匀，取适量14000rpm离心10min，精密移取上清液5mL至10mL容量瓶中，加50％甲醇定容至刻度，混匀，即得供试品溶液； (3)测定方法吸取混合对照品储备液和供试品溶液，注入高效液相色谱仪中，得到色谱图，根据色谱图计算供试品溶液中有效成分的含量；采用色谱柱ACQUITYBEH C18(2.1×100mm，1.7μm，美国Waters公司)、流速0.3mL/min；柱温40℃，乙腈–0.1％甲酸水溶液为流动相，梯度洗脱过程如下：
所属类别：	发明专利