详情

原文传递干血片样品中的25-羟基维生素D2/D3的HPLC-MS/MS检测法

专利名称：	干血片样品中的25-羟基维生素D2/D3的HPLC-MS/MS检测法
摘要：	本发明提供一种干血片样品中的25‑羟基维生素D2/D3的HPLC‑MS/MS检测法，其前处理工艺主要包括样本前处理、衍生、复溶工序，同时采用多反应监测MRM扫描方式。该方法实现了干血片样本中25‑羟基维生素D的检测，解决传统液相色谱串联质谱方法样本量需求量大，采样、运输不方便的问题，且用时较短，提高了检测的效率。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	上海;31
申请人：	上海可力梅塔生物医药科技有限公司
发明人：	朱监宝;官培龙
专利状态：	有效
申请日期：	2018-01-22T00:00:00+0800
发布日期：	2019-07-30T00:00:00+0800
申请号：	CN201810059514.2
公开号：	CN110068615A
代理机构：	上海一平知识产权代理有限公司
代理人：	徐迅;崔佳佳
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	200433 上海市杨浦区翔殷路128号上海理工大学国家大学科技园1号楼C座312-313室
主权项：	1.一种用于检测干血片样品中25-羟基维生素D的液相色谱串联质谱检测试剂盒，其特征在于，包括： (1)标准曲线干血片样品 (2)质控品干血片样品 (3)内标溶液 (4)萃取剂 (5)衍生液 (6)终止液 (7)复溶液所述的标准曲线干血片样品和质控品干血片样品中各自含有25-羟基维生素D2和25-羟基维生素D3。 2.如权利要求1中所述的试剂盒，其特征在于，所述的内标溶液为含有d6-25羟基维生素D2和d6-25羟基维生素D3的甲醇溶液。 3.如权利要求1中所述的试剂盒，其特征在于，所述的衍生液为4-苯基-1,2,4-三唑啉-3,5-二酮，其浓度为150μg/ml～250μg/ml。 4.如权利要求1中所述的试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒还包括洗脱液，所述的洗脱液包括洗脱液A和洗脱液B，所述的洗脱液A为纯水，所述的洗脱液B为纯度为100％的甲醇。 5.一种干血片样品中25-羟基维生素D的液相色谱串联质谱检测方法，其特征在于，包括如下步骤： (1)样本前处理：将干血片样品置于含内标溶液的离心管中，加入萃取剂超声提取，涡旋，从而得到提取液，将提取液转移到第二支离心管中，吹干得到残渣； (2)衍生处理：将衍生液加入步骤1)得到的残渣中，室温下反应1小时，加入终止液，涡旋并吹干得到第二残渣； (3)复溶处理：将复溶液加入步骤2)得到的第二残渣中进行复溶，涡旋，离心以获得上清液； (4)检测：采用高效液相色谱串联质谱技术检测步骤3)所得上清液中25羟基维生素D。 6.如权利要求5所述的检测方法，其特征在于，所述步骤4)中，质谱离子源为正离子模式下的APCI离子源。 7.如权利要求5所述的检测方法，其特征在于，所述步骤4)中，质谱信号采集方式为多反应监测MRM扫描方式。 8.如权利要求5所述的检测方法，其特征在于，所述步骤4)中，色谱柱柱温为20～40℃。 9.如权利要求5所述的检测方法，其特征在于，所述涡旋采用涡旋混匀器，所述涡旋混匀器的转速为2000rpm～3000rpm。 10.如权利要求5所述的检测方法，其特征在于，所述的干血片样本包括标准曲线干血片样品、质控品干血片样品和待检测干血片样本。
所属类别：	发明专利