详情

原文传递一种抗除草剂蛋白Bar的胶体金免疫层析速测卡

专利名称：	一种抗除草剂蛋白Bar的胶体金免疫层析速测卡
摘要：	本发明公开了属于生物工程技术领域的一种用于转基因水稻抗除草剂蛋白Bar的胶体金免疫层析速测卡及其使用方法，所述胶体金免疫层析速测卡包括卡壳和卡壳内的试纸条，所述试纸条包括底板以及粘着在底板上依次相连的样品垫、金标垫、反应膜和吸水垫，所述金标垫包被抗除草剂蛋白Bar单克隆抗体‑胶体金结合物。该速测卡特异性强，灵敏度高，并且，操作简便、快速、准确，适用于转基因水稻及其产品中抗除草剂蛋白Bar的现场快速检测以及安全性评价。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	北京;11
申请人：	中国农业科学院生物技术研究所
发明人：	张哲;刘卫晓;金芜军;董美;高进;黄卫红;王迪
专利状态：	有效
申请日期：	2019-06-04T00:00:00+0800
发布日期：	2019-08-16T00:00:00+0800
申请号：	CN201910482631.4
公开号：	CN110133292A
代理机构：	北京成实知识产权代理有限公司
代理人：	叶立涛
分类号：	G01N33/68(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	100081 北京市海淀区中关村南大街12号
主权项：	1.一种用于转基因水稻抗除草剂蛋白Bar的胶体金免疫层析速测卡，包括卡壳和卡壳内的试纸条，试纸条包括底板以及粘着在底板上依次相连的样品垫、金标垫、反应膜和吸水垫，其特征在于，所述金标垫包被抗除草剂蛋白Bar单克隆抗体-胶体金结合物。 2.根据权利要求1所述用于转基因水稻抗除草剂蛋白Bar的胶体金免疫层析速测卡，其特征在于，所述抗除草剂蛋白Bar单克隆抗体由保藏号为CGMCC No.17083的Bar单抗杂交瘤细胞株PA1-18030030/1B8 3D6分泌得到。 3.根据权利要求1所述用于转基因水稻抗除草剂蛋白Bar的胶体金免疫层析速测卡，其特征在于，所述反应膜上设有包被抗除草剂蛋白Bar单克隆抗体的检测线和包被羊抗鼠IgG的质控线。 4.根据权利要求3所述用于转基因水稻抗除草剂蛋白Bar的胶体金免疫层析速测卡，其特征在于，所述反应膜上设有的包被抗除草剂蛋白Bar单克隆抗体由保藏号为CGMCCNo.17084的Bar单抗杂交瘤细胞株PA1-18030030/6F5 1D2分泌得到。 5.根据权利要求3所述用于转基因水稻抗除草剂蛋白Bar的胶体金免疫层析速测卡，其特征在于，所述检测线和质控线间隔0.5-1.0cm。 6.根据权利要求1所述用于转基因水稻抗除草剂蛋白Bar的胶体金免疫层析速测卡，其特征在于，所述卡壳上设有加样孔和观察窗，所述加样孔设于样品垫上方，所述观察窗设于反应膜上方。 7.根据权利要求1所述用于转基因水稻抗除草剂蛋白Bar的胶体金免疫层析速测卡，其特征在于，所述样品垫与金标垫、金标垫与反应膜、反应膜与吸水垫之间各设有1-2mm的重叠区。 8.根据权利要求1所述用于转基因水稻抗除草剂蛋白Bar的胶体金免疫层析速测卡，其特征在于，所述底板为聚氯乙烯板，所述反应膜为硝酸纤维素膜。 9.根据权利要求1所述用于转基因水稻抗除草剂蛋白Bar的胶体金免疫层析速测卡，其特征在于，所述样品垫由玻璃纤维膜或滤纸制成，所述吸水垫由滤纸制成。 10.根据权利要求1所述用于转基因水稻抗除草剂蛋白Bar的胶体金免疫层析速测卡，其特征在于，包括以下步骤： 1)待测样品前处理：若待测样品为液体物质，则直接取40-60μL待测样品检测，若待测样品为非液体物质，则取待测样品90-110mg磨碎，加入0.5-1.5mL样品处理液混匀，冰上静置25-35min后取上清40-60μL检测；所述样品处理液为：1M Tris,pH 7.5 500uL，1M NaCL1.5mL，0.5M EDTA 20uL，50％甘油2mL，10％SDS 1mL，用双蒸水配成10mL，使用时添加1片蛋白酶抑制剂以及50uL的1mM苯甲基磺酰氟； 2)检测：将待测样品滴入加样孔内，室温下作用5-10min，观察结果； 3)检测结果分析：阳性：质控线、检测线均呈现条带，说明待测样本中有Bar蛋白存在；阴性：检测线不出现条带，质控线呈现条带，说明待测样本中没有Bar蛋白存在；失效：如果检测线、质控线均不出现条带或仅有检测线出现条带，说明试纸条失效。
所属类别：	发明专利