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原文传递一种抗虫蛋白Cry1C的胶体金免疫层析速测卡

专利名称：	一种抗虫蛋白Cry1C的胶体金免疫层析速测卡
摘要：	本发明公开了属于生物基因技术领域的一种抗虫蛋白Cry1C的胶体金免疫层析速测卡。所述速测卡包括卡壳和卡壳内的试纸条，卡壳上设有加样孔和观察窗，试纸条包括底板及粘着在底板上依次相连的样品垫、金标垫、反应膜和吸水垫，所述加样孔设于样品垫上方，所述观察窗设于反应膜上方，所述反应膜上设有检测线和质控线，所述金标垫包被抗虫蛋白Cry1C单克隆抗体‑胶体金结合物。本发明的速测卡特异性强，灵敏度高，并且操作简便、快速、准确，适用于抗虫蛋白Cry1C的现场快速检测以及安全性评价。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	北京;11
申请人：	中国农业科学院生物技术研究所
发明人：	刘卫晓;宛煜嵩;高进;金芜军;苗朝华;张哲
专利状态：	有效
申请日期：	2018-12-27T00:00:00+0800
发布日期：	2019-05-21T00:00:00+0800
申请号：	CN201811607160.7
公开号：	CN109781992A
代理机构：	北京成实知识产权代理有限公司
代理人：	叶立涛
分类号：	G01N33/68(2006.01);G;G01;G01N;G01N33
申请人地址：	100044 北京市海淀区中关村南大街12号
主权项：	1.一种抗虫蛋白Cry1C胶体金免疫层析速测卡，包括卡壳和卡壳内的试纸条，卡壳上设有加样孔和观察窗，试纸条包括底板及粘着在底板上依次相连的样品垫、金标垫、反应膜和吸水垫，所述加样孔设于样品垫上方，所述观察窗设于反应膜上方，所述反应膜上设有检测线和质控线，其特征在于，所述金标垫包被抗虫蛋白Cry1C单克隆抗体-胶体金结合物。 2.根据权利要求1所述抗虫蛋白Cry1C胶体金免疫层析速测卡，其特征在于，所述抗虫蛋白Cry1C单克隆抗体由保藏号为CGMCC No.16697的杂交瘤细胞株3H3 1D2分泌得到。 3.根据权利要求1所述抗虫蛋白Cry1C胶体金免疫层析速测卡，其特征在于，所述反应膜上的检测线包被抗虫蛋白Cry1C单克隆抗体，质控线包被羊抗鼠IgG。 4.根据权利要求3所述抗虫蛋白Cry1C胶体金免疫层析速测卡，其特征在于，反应膜上设有的包被抗虫蛋白Cry1C单克隆抗体由保藏号为CGMCC No.16698的杂交瘤细胞株5E101C6分泌得到。 5.根据权利要求1所述抗虫蛋白Cry1C胶体金免疫层析速测卡，其特征在于，所述检测线和质控线间隔0.5-1.0cm。 6.根据权利要求1所述抗虫蛋白Cry1C胶体金免疫层析速测卡，其特征在于，所述样品垫与金标垫、金标垫反应膜、反应膜与吸水垫之间均设有1-2mm的重叠区。 7.根据权利要求1所述抗虫蛋白Cry1C胶体金免疫层析速测卡，其特征在于，所述底板为聚氯乙烯板，所述反应膜为硝酸纤维素膜。 8.根据权利要求1所述抗虫蛋白Cry1C胶体金免疫层析速测卡，其特征在于，所述样品垫由玻璃纤维膜或滤纸制成，所述吸水垫由滤纸制成。 9.权利要求1所述抗虫蛋白Cry1C胶体金免疫层析速测卡的使用方法，其特征在于，包括以下步骤： 1)待测样品前处理：若待测样品为液体，取40-60μL待测样品直接进行检测，若待测样品为非液体，则取待测样品90-110mg磨碎，加入0.5-1.5mL样品处理液充分混匀，冰上静置25-35min后取上清40-60μL检测；所述样品处理液的配方为：1M Tris,pH 7.5 500uL，1M NaCL 1.5mL，0.5M EDTA 20uL，50％甘油2mL，10％SDS 1mL，用双蒸水配成10mL，使用时添加1片蛋白酶抑制剂及50uL的1mM苯甲基磺酰氟； 2)检测：将待测样品滴入加样孔内，室温下作用5-10min，然后观察结果； 3)检测结果分析：阳性：质控线、检测线均呈现条带，说明待测样本中有Cry1C蛋白存在；阴性：检测线不出现条带，质控线呈现条带，说明待测样本中没有Cry1C蛋白存在；失效：如果检测线、质控线均不出现条带或仅有检测线出现条带，说明试纸条失效。
所属类别：	发明专利