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原文传递一种鉴定水牛乳中掺假的检测方法

专利名称：	一种鉴定水牛乳中掺假的检测方法
摘要：	本发明公开了一种鉴定水牛乳中掺假的检测方法，包括以下步骤：先样品采集及仪器准备，再配制BisTris、盐酸胍、柠檬酸钠和DTT的混合溶液作为工作液Ⅰ，配制盐酸胍溶液作为工作液Ⅱ；然后分别取水牛乳和待测牛乳样品适量并进行以下操作：加入等体积的工作液Ⅰ，旋涡混合后再离心并撇去上层脂肪，取底层溶液置于新的离心管中，加入工作液Ⅱ混合经滤膜过滤；然后置于高效液相自动进样色谱仪中测试得到指纹谱图；将指纹谱图进行比对分析。本发明提供了一种快速检测水牛乳中是否掺杂黑白花牛乳的检测方法，本方法具有良好的重现性和专属性，能够得到样品间具有代表性的指纹图谱，能快速稳定地分析水牛奶中是否掺入荷斯坦奶源。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广西;45
申请人：	广西壮族自治区水牛研究所
发明人：	曾庆坤;梁政洋;黄丽;李玲;黄子珍;杨攀
专利状态：	有效
申请日期：	2019-06-04T00:00:00+0800
发布日期：	2019-09-10T00:00:00+0800
申请号：	CN201910482656.4
公开号：	CN110221007A
代理机构：	北京君恒知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	韦剑思;黄启行
分类号：	G01N30/06(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	530001 广西壮族自治区南宁市兴宁区邕武路24-1号
主权项：	1.一种鉴定水牛乳中掺假的检测方法，其特征在于：包括以下步骤： (1)样品采集及仪器准备：采集水牛乳和待测牛乳样品后冷藏保存，同时准备好高效液相自动进样色谱仪及其匹配色谱柱并清洗干净备用； (2)溶液制备：配制BisTris、盐酸胍、柠檬酸钠和DTT的混合溶液作为工作液Ⅰ，配制盐酸胍溶液作为工作液Ⅱ； (3)供试品制备：分别取步骤(1)中采集的水牛乳和待测牛乳样品适量并进行以下操作：加入等体积的工作液Ⅰ，旋涡混合后形成混合液静置，再将混合液离心并撇去上层脂肪，取底层溶液置于新的离心管中，加入工作液Ⅱ混合均匀并经滤膜过滤后得到上机试品； (4)供试品测试：将步骤(3)中制备的水牛乳和待测牛乳上机试品置于高效液相自动进样色谱仪中并设置测试条件进行梯度洗脱测试，得到指纹谱图； (5)结果分析：将步骤(4)中水牛乳和待测牛乳测试的指纹谱图进行比对分析，通过寻找对水牛乳蛋白分离情况不造成干扰的特征峰识别待测牛乳。 2.根据权利要求2所述的一种鉴定水牛乳中掺假的检测方法，其特征在于：在步骤(1)中，所述冷藏保存的温度为4℃，所述色谱柱为ZORBAX 300SB-C8柱。 3.根据权利要求3所述的一种鉴定水牛乳中掺假的检测方法，其特征在于：在步骤(2)中，所述工作液Ⅰ中BisTris的浓度为0.1-0.3mol/L，盐酸胍的浓度为3-8mol/L，柠檬酸钠的浓度为5-7mmol/L，DTT的浓度为15-25mmol/L，所述工作液Ⅱ中盐酸胍3-6mol/L。 4.根据权利要求4所述的一种鉴定水牛乳中掺假的检测方法，其特征在于：在步骤(3)中，所述静置时间为1-1.5h，所述混合液离心的温度为3-10℃，所述取底层溶液与工作液Ⅱ的体积比为(1-3)：(3-10)，所述渗滤膜的孔径为0.2-0.5um。 5.根据权利要求5所述的一种鉴定水牛乳中掺假的检测方法，其特征在于：在步骤(4)中，所述高效液相自动进样色谱仪测试条件：检测波长214nm，柱温35-45℃，进样量5-10ul，流速0.5-1.0mL/min，流动相包括流动相A和流动相B。 6.根据权利要求6所述的一种鉴定水牛乳中掺假的检测方法，其特征在于：所述流动性A为0.1％TFA水溶液，流动相B为0.1％TFA乙腈。 7.根据权利要求7所述的一种鉴定水牛乳中掺假的检测方法，其特征在于：所述工作液Ⅱ中盐酸胍溶液的溶剂为流动性A0.1％TFA水溶液。
所属类别：	发明专利