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原文传递一种检测CD44蛋白的电化学交流阻抗生物传感器及其制备方法

专利名称：	一种检测CD44蛋白的电化学交流阻抗生物传感器及其制备方法
摘要：	本发明公开了一种检测细胞表面糖蛋白CD44的电化学交流阻抗生物传感器及其制备方法，将多肽抑制剂(ISC)通过金硫自组装固定到金电极表面，用MCH封闭后，得到MCH/ISC/GE修饰电极，再将PEX‑14进一步的滴加到MCH/ISC/GE表面，即得到检测CD44的电化学交流阻抗生物传感器。本发明基于多肽抑制剂(ISC)与PEX‑14之间的相互作用以及PEX‑14与CD44之间的异源二聚化构建了一种检测CD44的电化学交流阻抗生物传感器，该传感器具有灵敏度高、特异性强、成本低和分析速度快等特点。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	陕西;61
申请人：	西北大学
发明人：	马芬;陈玉;孙利娜
专利状态：	有效
申请日期：	2019-06-06T00:00:00+0800
发布日期：	2019-08-20T00:00:00+0800
申请号：	CN201910489468.4
公开号：	CN110146572A
代理机构：	西安利泽明知识产权代理有限公司
代理人：	贾晓玲
分类号：	G01N27/327(2006.01);G;G01;G01N;G01N27
申请人地址：	710127 陕西省西安市长安区郭杜教育科技产业区学府大道1号
主权项：	1.一种检测CDD44蛋白的电化学交流阻抗生物传感器的制备方法，其特征在于，包括如下步骤： (1)制备CD44蛋白特异性识别探针； (2)电化学交流阻抗生物传感器的组装。 2.如权利要求1所述的一种检测CDD44蛋白的电化学交流阻抗生物传感器的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)制备CD44蛋白特异性识别探针具体为： (a)将PEX-14溶解于Tris-HCl缓冲液中，得到CD44蛋白特异性识别的探针溶液，即PEX-14溶液； (b)将多肽抑制剂(ISC)溶解于Tris-HCl缓冲液中，得到PEX-14特异性识别的探针溶液，即多肽抑制剂(ISC)溶液。 3.如权利要求1所述的一种检测CDD44蛋白的电化学交流阻抗生物传感器的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)电化学交流阻抗生物传感器的组装具体为： (a)对金电极进行预处理，在预处理后的金电极表面滴加多肽抑制剂(ISC)溶液进行自组装修饰，然后用Tris-HCl缓冲溶液冲洗，得到ISC/GE电极； (b)在步骤(a)所得电极表面滴加MCH溶液封闭电极表面未被ISC占据的空白位点，封闭后用Tris-HCl缓冲溶液冲洗电极表面，得到MCH/ISC/GE电极； (c)在步骤(b)所得电极表面滴加PEX-14溶液，通过PEX-14与多肽抑制剂(ISC)的特异性识别进行进一步的修饰，然后用Tris-HCl缓冲溶液冲洗，得到PEX-14/ISC/GE电极，即为检测CD44的电化学交流阻抗生物传感器。 4.如权利要求2所述的一种检测CDD44蛋白的电化学交流阻抗生物传感器的制备方法，其特征在于，所述PEX-14溶液的浓度为5ng/mL-20ng/mL。 5.如权利要求2所述的一种检测CDD44蛋白的电化学交流阻抗生物传感器的制备方法，其特征在于，所述多肽抑制剂溶液的浓度为2-20μM。 6.如权利要求3所述的一种检测CDD44蛋白的电化学交流阻抗生物传感器的制备方法，其特征在于，所述步骤(a)对金电极进行预处理具体为：将金电极抛光，清洗，以清洗后的金电极为工作电极，铂丝电极为对电极，Ag/AgCl为参比电极，组成三电极体系，在电化学溶液中进行循环伏安扫描至循环伏安图谱稳定。 7.如权利要求3所述的一种检测CDD44蛋白的电化学交流阻抗生物传感器的制备方法，其特征在于，所述步骤(a)中多肽抑制剂(ISC)自组装修饰的时间为10-15h。 8.如权利要求3所述的一种检测CDD44蛋白的电化学交流阻抗生物传感器的制备方法，其特征在于，所述步骤(b)中MCH溶液的浓度为0.1-10mM；MCH封闭时间为30-60min；所述步骤(c)中PEX-14与多肽抑制剂(ISC)的特异性识别的时间为20-60min。 9.如权利要求1-8任一所述的一种检测CDD44蛋白的电化学交流阻抗生物传感器的制备方法，其特征在于，所述Tris-HCl缓冲溶液的浓度为0.01-0.1M，pH值为7-8。 10.如权利要求1-8任一所述的一种检测CDD44蛋白的电化学交流阻抗生物传感器的制备方法制得的检测CDD44蛋白的电化学交流阻抗生物传感器。
所属类别：	发明专利