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原文传递一种用于检测比伐卢定中杂质的分析方法

专利名称：	一种用于检测比伐卢定中杂质的分析方法
摘要：	本发明公开了一种用于检测比伐卢定中杂质的方法，所述的检测方法包括使用高效液相色谱法检测比伐卢定样品中的杂质，特别是和主峰极性接近的杂质[D‑Phe12]‑比伐卢定(杂质I)、[L‑Phe1]‑比伐卢定(杂质II)、[D‑Leu20]‑比伐卢定(杂质III)、[Plus‑Gly5Gly6]‑比伐卢定(杂质IV)、[Des‑Gly5Gly6]‑比伐卢定(杂质V)能和主峰进行有效分离的方法。本方法中各杂质的检测限约0.15μg/ml，即可以检出比伐卢定中高于0.01％的杂质；本方法不仅能有效检出分离USP中披露的6个杂质，同时能够有效分离其它5个极性接近的潜在工艺杂质，实用性强，检测过程简单快捷。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	海南;46
申请人：	海南中和药业股份有限公司
发明人：	黄清炳;庞传芬;王文;凌振宏
专利状态：	有效
申请日期：	2019-06-26T00:00:00+0800
发布日期：	2019-09-06T00:00:00+0800
申请号：	CN201910557619.5
公开号：	CN110208419A
代理机构：	北京华科联合专利事务所(普通合伙)
代理人：	王为;孟旭
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	570216 海南省海口市南海大道168号海口保税区
主权项：	1.一种用于检测比伐卢定中杂质的方法，其特征在于：包括以下步骤： (1)流动相组成：流动相A:由磷酸盐缓冲液组成；流动相B:由乙腈和甲醇混合组成； (2)样品的配制供试品溶液的配制：称取比伐卢定样品，和(1)中流动相A混合配制成供试品溶液，待用；系统适应性溶液的配制：分别称取杂质I、杂质II、杂质III、杂质IV、杂质V、杂质VI、杂质VII、杂质VIII、杂质IX、杂质X、杂质XI对照品和比伐卢定对照品，和(1)中流动相A混合配制成供试品溶液，待用； (3)分别吸取上述的供试品溶液和系统适应性溶液，注入高效液相色谱仪进行测定，其色谱条件包括：色谱柱：C18柱，4.6mm250mm，5μm，或效能相当的色谱柱检测波长：210nm 流速：0.6-1.2ml/min 柱温：25-50℃ 采用上述色谱条件，使用流动相A和流动相B进行梯度洗脱其中，杂质I-XI的结构如下： 2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：(1)流动相A的配置：称取5.99g磷酸二氢钠，加纯化水1000ml溶解，加入三乙胺5ml，并用醋酸调节pH至2.5～5.0，优选pH＝3.5。 3.根据权利要求1所述的的方法，其特征在于：(1)流动相B中乙腈跟甲醇的体积比为10:90～40:60，优选20:80。 4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的比伐卢定供试品溶液浓度为1～3mg/ml，优选2mg/ml。 5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：(2)所述的系统适应性溶液浓度，各杂质的浓度为1～3μg/ml，优选2μg/ml；比伐卢定的浓度为1～3mg/ml，优选2mg/ml。 6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：(3)所述的柱温为25～50℃，优选35℃。 7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：(3)所述的流速为0.6～1.2ml/min，优选1.0ml/min。 8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：(3)所述的线性梯度洗脱程序如下所示：时间min 流动相A％流动相B％ 0 62 38 20 60 40 55 53 47 65 20 80 66 62 38 75 62 38 。 9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤如下： 1)配置流动相：流动相A：称取5.99g磷酸二氢钠，加纯化水1000ml溶解，加入三乙胺5ml，采用乙酸调节pH至3.52；流动相B：乙腈：甲醇＝20:80的混合溶液； 2)供试品溶液、系统适应性溶液的配制：供试品溶液的配制：精密称取20mg比伐卢定样品至10ml容量瓶中，加入5ml流动相A混合溶解，继续流动相A稀释定容至刻度，配制成2mg/ml的比伐卢定样品溶液，待用；系统适应性溶液的配制：分别称取杂质I、杂质II、杂质III、杂质IV、杂质V、杂质VI、杂质VII、杂质VIII、杂质IX、杂质X、杂质XI对照品各20μg至10ml容量瓶中，再称取20mg比伐卢定样品至同一容量瓶中，加入5ml流动相A混合溶解，继续流动相A稀释定容至刻度，配制成每1ml中含各个杂质分裂为0.2μg和比伐卢定2mg的溶液，作为系统适应性溶液，待用； 3)分别吸取上述的供试品溶液和系统适应性溶液，注入高效液相色谱仪进行测定，记录色谱图，色谱条件包括：色谱柱：C18柱，4.6mm250mm，5μm，或效能相当的色谱柱检测器：UV检测器检测波长：210nm 流速：1.0ml/min 柱温：35℃ 采用上述色谱条件，使用流动相A和流动相B进行线性梯度洗脱，线性梯度洗脱程序如下：时间min 流动相A％流动相B％ 0 62 38 20 60 40 55 53 47 65 20 80 66 62 38 75 62 38 。
所属类别：	发明专利