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一种超高灵敏的检测人血浆中奋乃静浓度的方法
| 专利名称： | 一种超高灵敏的检测人血浆中奋乃静浓度的方法 |
| 摘要： | 本发明涉及一种超高灵敏的检测人血浆中奋乃静浓度的方法，包括以下步骤：步骤1：血浆样品前处理；步骤2：色谱分离；步骤3：质谱检测。本发明检测方法灵敏度较高，能够定量的最低浓度可达到10.0pg/mL，为现有最高灵敏度奋乃静检测技术，较现有报道技术提高5倍。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 江苏;32 |
| 申请人： | 苏州海科医药技术有限公司 |
| 发明人： | 杨勇;陈云辉;陈笑艳;钟大放;陈涛;刘旭凌;钟勘;姜金方;陈醒;左正龙;张先锋;胡凤梅 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请日期： | 2019-06-13T00:00:00+0800 |
| 发布日期： | 2019-09-17T00:00:00+0800 |
| 申请号： | CN201910509419.2 |
| 公开号： | CN110243962A |
| 代理机构： | 苏州唯亚智冠知识产权代理有限公司 |
| 代理人： | 张翠茹 |
| 分类号： | G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30 |
| 申请人地址： | 215000 江苏省苏州市工业园区若水路398号 |
| 主权项： | 1.一种超高灵敏的检测人血浆中奋乃静浓度的方法，其特征在于，包括以下步骤： 步骤1：血浆样品前处理，在1.5mL离心管中加入血浆样品，内标溶液，加入甲醇，涡流振荡，离心，取出上清转移至96孔板中，使用氮气吹干浓缩，加复溶剂复溶，涡流振荡，进行LC-MS/MS分析； 步骤2：色谱分离； 色谱条件，色谱柱：Triart-C18，3.0μm，2.0*100mm；进样量：20μL；柱温：40℃；流动相A相选用1mM甲酸铵水溶液含0.5％，流动相B项为含0.1％甲酸乙腈，在梯度洗脱条件下，梯度洗脱：0-0.50min，30％B相；2.50min，60％B相；2.51min～3.50min，30％B相，自动进样器温度为15℃，流动相的流速为：0.5mL/min； 步骤3：质谱检测； 质谱条件：电喷雾电离源；电压为5500V；离子源温度为550℃；Curtain Gas和CID压力分别为30和8psi；扫描模式为+MRM；监测离子反应分别为：奋乃静，m/z 404.2→m/z 171.2；奋乃静-d4，m/z 408.2→m/z 171.2；CE分别为32和31.5eV；DP分别为100V和81V；扫描时间为150ms。 2.根据权利要求1所述的一种超高灵敏的检测人血浆中奋乃静浓度的方法，其特征在于：步骤1血浆样品前处理，取100μL血浆样品，分别加入25.0μL内标工作液、300μL甲醇，涡流2min，以14000rpm转速离心5min，取出上清300μL转移至96孔板中，N2吹干，加120μL复溶剂乙腈-水复溶，涡流振荡5min，取20.00μL进行LC-MS/MS分析。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
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