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原文传递基于低温冷冻萃取技术检测尿液中未代谢多环芳烃的方法

专利名称：	基于低温冷冻萃取技术检测尿液中未代谢多环芳烃的方法
摘要：	本发明公开了一种基于低温冷冻萃取技术检测尿液中未代谢多环芳烃的方法，采用向待测样品加入前处理剂，利用不对称相电流进行脉冲刺激，提高指示物与目标物的结合率，然后将萃取剂雾化后随增压后的CO2气体鼓入所述待萃取样本，同时进行超声空化，缩短低温萃取时间，提高萃取效率，再冷冻去除萃取相，最后利用气相色谱‑三重四极杆串联质谱法检测尿液中未代谢的多环芳烃。本发明能有效地排除分析样品中各种基质的干扰，灵敏性和可靠性更高。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	生态环境部华南环境科学研究所
发明人：	赵波;黎玉清;李彦希;金梦;潘浪;古丽娜;谢丹平
专利状态：	有效
申请日期：	2019-08-19T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-12T00:00:00+0800
申请号：	CN201910763140.7
公开号：	CN110441427A
代理机构：	北京栈桥知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	刘婷
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	510655广东省广州市员村西街7号
主权项：	1.一种基于低温冷冻萃取技术检测尿液中未代谢多环芳烃的方法，其特征在于，包括以下步骤； S1：取10ml尿液标本与5ml酸性缓冲液混合，加入同位素标记的多环芳烃混标溶液作为回收率指示物，得到待测样品； S2：向所述待测样品加入一定量的前处理剂，利用电极搅拌头在20-25℃条件下搅拌1-5min，利用电极激发前处理剂对待测样品进行预处理，得到预处理尿液样本； S3：利用酸性缓冲液对电极搅拌头浸泡清洗，清洗后的酸性缓冲液与预处理尿液样本混合，得到待萃取样本，降温至0-4℃，将一定量的萃取剂雾化并随增压后的CO2气体鼓入所述待萃取样本，同时进行超声空化，进行一次萃取，当鼓入完毕后，转移到旋涡混合器上搅拌1min，进行二次萃取，最后在5000rpm下离心10min，形成含沉淀尿液样本； S4：将所述含沉淀尿液样本在-20℃至-30℃的冰柜中放置4h，进行相分离，利用氮吹浓缩至0.5ml，再次放入-20℃至-30℃的冰柜中进行二次分离，去除残留水分，得到萃取液； S5：将所述萃取液用0.22μm净化滤膜过滤，滤液氮吹至干，有机溶液定容至100μ，加入进样内标后，采用气相色谱-三重四极杆串联质谱法检测。 2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，S1中所述酸性缓冲为醋酸铵缓冲液或者乙酸缓冲液，浓度为1mol/L。 3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，S1中所述同位素标记的多环芳烃混标溶液选用浓度为10ng/ml的16种氘代多环芳烃同位素标准溶液1ml。 4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述前处理剂由三甲基氯硅烷、二叔丁基二碳酸酯、氯化钠、氯化钾按照质量比为2:2:1:1组成，前处理剂加入量为1ml。 5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，S2中所述电极激发前处理剂采用先阴极相后阳极相的双相不对称矩形波交替刺激，工作参数为：首先采用阴极相持续刺激5ms，然后再以阳极相持续刺激10ms，阴极相与阳极相的时间间隔为1ms，阴极相与阳极相的幅值比为5，持续交替刺激，刺激阈值为7.5mA。 6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，S3中所述萃取剂的加入量为15-20ml。 7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，S3中所述萃取剂是由乙腈和液态二氧化碳按照体积比为2-3：1混合而成。 8.如权利要求1或6或7所述的方法，其特征在于，S3中所述萃取剂雾化是采用气雾剂喷雾发生器将萃取剂雾化成粒径为2-6μm的微珠，伴随CO2气体2-4MPa压力鼓入所述所述待萃取样本，CO2气体与萃取剂的气液体积比10-50:1。 9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，S3中所述超声空化的工作频率为25-29KHz/s，萃取的时间为10min。 10.如权利要求1所述的方法，其特征在于，S5中所述气相色谱-三重四极杆串联质谱法检测的方法包括：色谱条件：进样口温度为280℃，进样量为1μL，不分流进样，流速为1.0mL/min；升温程序为：第一阶段以50℃保持3min；第二阶段以10℃/min升到150℃，保持8min；第三阶段以5℃/min升到230℃，保持4min；第四阶段以4℃/min升到310℃，保持10min；质谱条件：采用EI源作为电子轰击离子源，电子能量为70eV；离子源温度为210℃；传输线温度为260℃，扫描范围m/z120-310。气相色谱-三重四极杆串联质谱检出限为0.02μg/L，定量限为0.34μg/L。
所属类别：	发明专利