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原文传递一种液相色谱法分析测定吡嗪酰胺中有关物质的方法

专利名称：	一种液相色谱法分析测定吡嗪酰胺中有关物质的方法
摘要：	本发明公开了一种液相色谱法分析测定吡嗪酰胺中有关物质的方法，包括如下步骤：(1)配制对照品溶液；(2)配制系统适用性溶液；(3)配制供试品溶液；(4)配制自身对照溶液；(5)色谱分析测定，取稀释液以及配制的对照品溶液、系统适用性溶液、供试品溶液、自身对照溶液适量，注入液相色谱仪，记录液相色谱图，并根据液相色谱图分析测定吡嗪酸含量、2‑氰基吡嗪含量、未知单个杂质含量和总杂质含量。该方法专属性和针对性更强，对吡嗪酰胺中存在的特定杂质2‑氰基吡嗪和吡嗪酸可以进行准确的定量检测，从而更有效地控制产品质量，为有关物质研究提供一定的基础。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	江苏;32
申请人：	江苏四环生物制药有限公司
发明人：	江永红;丁月萍;袁菊凤;徐益明
专利状态：	有效
申请日期：	2019-08-08T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-12T00:00:00+0800
申请号：	CN201910729773.6
公开号：	CN110441424A
代理机构：	苏州国诚专利代理有限公司
代理人：	王丽
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	214400江苏省无锡市江阴市滨江开发区定山路10号
主权项：	1.一种液相色谱法分析测定吡嗪酰胺中有关物质的方法，其特征在于，包括如下步骤： (1)配制对照品溶液 a.配制吡嗪酸对照品储备液：取吡嗪酸对照品适量，加稀释液溶解并稀释，制成吡嗪酸对照品储备液； b.配制2-氰基吡嗪对照品储备液：取2-氰基吡嗪对照品适量，加稀释液溶解并稀释，制成2-氰基吡嗪对照品储备液； c.配制对照品溶液：精密量取吡嗪酸对照品储备液和2-氰基吡嗪储备液各适量，置于同一容器中，加稀释液稀释，制成对照品溶液； (2)配制系统适用性溶液取吡嗪酰胺适量，加稀释液溶解并稀释，制成吡嗪酰胺溶液，然后精密量取吡嗪酰胺溶液、吡嗪酸对照品储备液和2-氰基吡嗪对照品储备液各适量，置于同一容器中，用流动相稀释，制成系统适用性溶液；其中，流动相为甲醇-水溶液； (3)配制供试品溶液取吡嗪酰胺适量，加稀释液溶解并稀释，制成供试品溶液； (4)配制自身对照溶液取供试品溶液适量，加稀释液稀释，制成自身对照溶液； (5)色谱分析测定取稀释液以及配制的对照品溶液、系统适用性溶液、供试品溶液、自身对照溶液适量，注入液相色谱仪，记录液相色谱图，并根据液相色谱图分析测定吡嗪酸含量、2-氰基吡嗪含量、未知单个杂质含量和总杂质含量。 2.根据权利要求1所述的一种液相色谱法分析测定吡嗪酰胺中有关物质的方法，其特征在于，步骤(1)中，吡嗪酸对照品储备液中的吡嗪酸对照品浓度为30～50μg/ml，2-氰基吡嗪对照品储备液中的2-氰基吡嗪对照品浓度为30～50μg/ml，对照品溶液中的吡嗪酸对照品浓度为0.3～0.5μg/ml，对照品溶液中的2-氰基吡嗪对照品浓度为0.3～0.5μg/ml。 3.根据权利要求1所述的一种液相色谱法分析测定吡嗪酰胺中有关物质的方法，其特征在于，步骤(2)中的系统适用性溶液中的吡嗪酰胺浓度为30～50μg/ml，吡嗪酸对照品浓度为3～5μg/ml，2-氰基吡嗪对照品浓度为3～5μg/ml。 4.根据权利要求1所述的一种液相色谱法分析测定吡嗪酰胺中有关物质的方法，其特征在于，步骤(3)中的供试品溶液中的吡嗪酰胺浓度为0.3～0.5mg/ml。 5.根据权利要求1所述的一种液相色谱法分析测定吡嗪酰胺中有关物质的方法，其特征在于，所述步骤(1)、(2)、(3)、(4)、(5)中的稀释液均为纯化水。 6.根据权利要求1所述的一种液相色谱法分析测定吡嗪酰胺中有关物质的方法，其特征在于，液相色谱仪所采用的色谱柱为Kromasil C18柱，该色谱柱的规格为长度250mm，内径4.6mm，粒径5μm。 7.根据权利要求1所述的一种液相色谱法分析测定吡嗪酰胺中有关物质的方法，其特征在于，液相色谱仪所采用的色谱柱利用十八烷基硅烷键合硅胶作为填充剂。 8.根据权利要求1所述的一种液相色谱法分析测定吡嗪酰胺中有关物质的方法，其特征在于，该方法的色谱条件为：色谱柱中的流动相为甲醇-水溶液，流速为1.0ml/min，检测波长为268nm，色谱柱柱温为30℃，进样量为20μl。 9.根据权利要求1所述的一种液相色谱法分析测定吡嗪酰胺中有关物质的方法，其特征在于，步骤(5)中，液相色谱图的记录时间为主成分峰保留时间的2倍。 10.根据权利要求1所述的一种液相色谱法分析测定吡嗪酰胺中有关物质的方法，其特征在于，步骤(5)的洗脱方式为等度洗脱。
所属类别：	发明专利