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原文传递乙酰半胱氨酸对映异构体的分离检测方法

专利名称：	乙酰半胱氨酸对映异构体的分离检测方法
摘要：	本发明公开了一种乙酰半胱氨酸对映异构体的分离检测方法，在有机溶剂中，使用衍生化试剂与N‑乙酰基‑L‑半胱氨酸及其对映异构体进行衍生化反应，制备得到N‑乙酰基‑L‑半胱氨酸及其异构体的衍生化产品，再使用正相高效液相色谱法进行分离和检测；衍生化试剂采用异氰酸酯类。本发明的乙酰半胱氨酸对映异构体的分离检测方法，将衍生试剂与N‑乙酰基‑L‑半胱氨酸及其对映异构体进行反应，采用柱前衍生正相高效液相色谱法，依据手性分离的机理，增加色谱柱中固定相与待分离手性物质之间的相互吸引作用，有效提高手性分离的选择性。该法操作简便、耗时短、易于推广使用。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	湖南;43
申请人：	湖南华纳大药厂科技开发有限公司
发明人：	周志刚;庞永清;龙辉;徐燕;黄本东
专利状态：	有效
申请日期：	2018-12-12T00:00:00+0800
发布日期：	2019-05-07T00:00:00+0800
申请号：	CN201811516127.3
公开号：	CN109725073A
代理机构：	长沙智嵘专利代理事务所(普通合伙)
代理人：	刘宏
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	410300 湖南省长沙市浏阳经济技术开发区康平路6号
主权项：	1.一种乙酰半胱氨酸对映异构体的分离检测方法，其特征在于，在有机溶剂中，使用衍生化试剂与N-乙酰基-L-半胱氨酸及其对映异构体进行衍生化反应，制备得到N-乙酰基-L-半胱氨酸及其异构体的衍生化产品，再使用正相高效液相色谱法进行分离和检测；所述衍生化试剂采用异氰酸酯类。 2.根据权利要求1所述的乙酰半胱氨酸对映异构体的分离检测方法，其特征在于，所述异氰酸酯类采用(R)-(+)-a-甲基苄基异氰酸酯、(S)-(-)-a-甲基苄基异氰酸酯、3-甲基苄基异氰酸酯和苯异氰酸酯中的至少一种。 3.根据权利要求1所述的乙酰半胱氨酸对映异构体的分离检测方法，其特征在于，所述有机溶剂采用甲醇、乙醇或异丙醇中的至少一种。 4.根据权利要求1所述的乙酰半胱氨酸对映异构体的分离检测方法，其特征在于，所述衍生化反应包括以下步骤：所述N-乙酰基-L-半胱氨酸溶于氢氧化物溶液并采用有机溶剂稀释，加入衍生化试剂进行反应，获得N-乙酰基-L-半胱氨酸的衍生化产品；所述N-乙酰基-L-半胱氨酸对映异构体溶于氢氧化物溶液并采用有机溶剂稀释，加入衍生化试剂进行反应，获得N-乙酰基-L-半胱氨酸对映异构体的衍生化产品；所述N-乙酰基-L-半胱氨酸溶于氢氧化物溶液并采用有机溶剂稀释，待用，所述N-乙酰基-L-半胱氨酸对映异构体溶于氢氧化物溶液并采用有机溶剂稀释，加入待用溶液，然后加入衍生化试剂进行反应，获得N-乙酰基-L-半胱氨酸及其对映异构体的衍生化产品。 5.根据权利要求4所述的乙酰半胱氨酸对映异构体的分离检测方法，其特征在于，所述氢氧化物溶液采用氢氧化钾溶液或氢氧化钠溶液；所述N-乙酰基-L-半胱氨酸和/或所述N-乙酰基-L-半胱氨酸对映异构体与所述氢氧化物的质量比为4～5∶1。 6.根据权利要求4所述的乙酰半胱氨酸对映异构体的分离检测方法，其特征在于，所述反应温度为45℃～65℃；所述反应时间为15min～25min。 7.根据权利要求1至6任一项所述的乙酰半胱氨酸对映异构体的分离检测方法，其特征在于，所述正相液相色谱柱的固定相采用多糖类手性填料；所述多糖类手性填料采用表面涂覆有纤维素-三(3,5-二氯苯基氨基甲酸酯)的硅胶、表面涂覆有纤维素-三(3,5-二甲基苯基氨基甲酸酯)的硅胶、表面涂覆有直链淀粉-三(3,5-二氯苯基氨基甲酸酯)的硅胶、表面涂覆有直链淀粉-三(3-氯-4-甲基苯基氨基甲酸酯)的硅胶、表面涂覆有直链淀粉-三(3-氯-5-甲基苯基氨基甲酸酯)的硅胶中的一种。 8.根据权利要求1至6任一项所述的乙酰半胱氨酸对映异构体的分离检测方法，其特征在于，所述正相液相色谱柱采用的流动相为正己烷-低级醇混合液，正己烷与低级醇的体积比为88～95∶5～12；所述流动相的流速为1.1～1.3ml/min；检测波长为200nm～230nm。 9.根据权利要求8所述的乙酰半胱氨酸对映异构体的分离检测方法，其特征在于，所述流动相还包括酸碱调节剂，所述酸碱调节剂采用甲酸、冰醋酸、三氟乙酸中的至少一种；所述正己烷-低级醇混合液与酸碱调节剂的体积比为100∶0.05～0.15；所述低级醇采用无水乙醇或异丙醇。 10.根据权利要求1所述的乙酰半胱氨酸对映异构体的分离检测方法，其特征在于，还包括利用外标法以色谱图的峰面积计算乙酰半胱氨酸对映异构体的质量。
所属类别：	发明专利