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原文传递一种复方透骨草制剂的中药指纹图谱检测方法

专利名称：	一种复方透骨草制剂的中药指纹图谱检测方法
摘要：	本发明涉及一种复方透骨草制剂的中药指纹图谱检测方法，包括：(1)对照品溶液的制备；(2)供试品溶液的制备；(3)高效液相色谱法测定：色谱条件为色谱柱：C18柱，柱温20～40℃，流动相0.05～0.15vol％磷酸水溶液和乙腈梯度洗脱，测定波长210～240nm。本发明还基于多批次复方透骨草制剂建立了标准指纹图谱，提供了复方透骨草制剂的质量检测方法。本发明可用于指导生产制备过程投料、规范生产操作，以保证自始而终全过程质量控制的完整性，确保临床用药的安全、有效、稳定。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	上海;31
申请人：	上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院
发明人：	范斌;张宁;张洁玉;钟丛丛
专利状态：	有效
申请日期：	2017-11-08T00:00:00+0800
发布日期：	2019-05-14T00:00:00+0800
申请号：	CN201711087788.4
公开号：	CN109752478A
代理机构：	上海卓阳知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	周春洪
分类号：	G01N30/86(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	200437 上海市虹口区甘河路110号
主权项：	1.一种复方透骨草制剂的中药指纹图谱检测方法，其特征在于，包括以下步骤： (1)对照品溶液的制备称取芦丁、槲皮素、金丝桃苷和苯甲酸钠对照品，加入甲醇溶解，制成1-300μg/ml的对照品溶液； (2)供试品溶液的制备量取复方透骨草制剂，加入甲醇，混匀，静置，过滤取滤液，即得供试品溶液； (3)高效液相色谱法测定将供试品溶液进行高效液相色谱法测定，色谱条件为：色谱柱：C18柱；柱温：20～40℃；流动相：0.05～0.15vol％磷酸水溶液和乙腈梯度洗脱；测定波长：210～240nm。 2.根据权利要求1所述的中药指纹图谱检测方法，其特征在于，步骤(3)中的梯度洗脱具体为：从3vol％乙腈开始等度洗脱15min达到9vol％乙腈，再以线性洗脱的方式经35min达到15vol％乙腈，以线性洗脱的方式经40min达到25vol％乙腈，以线性洗脱的方式经10min达到30vol％乙腈，以线性洗脱的方式经40min达到38vol％乙腈，以线性洗脱的方式经15min达到70vol％乙腈，最后以70vol％乙腈等度洗脱15min。 3.根据权利要求1所述的中药指纹图谱检测方法，其特征在于，步骤(3)中所述的色谱条件还包括：流速0.8～1.5ml/min；进样量10～20μl。 4.根据权利要求1所述的中药指纹图谱检测方法，其特征在于，步骤(3)中所述的色谱柱为Waters SymmetryShield C18柱，规格为4.6mm×250mm，填料粒度大小为5μm。 5.根据权利要求1所述的中药指纹图谱检测方法，其特征在于，步骤(3)中所述的流动相为使用0.1vol％磷酸水溶液和乙腈梯度洗脱。 6.根据权利要求1所述的中药指纹图谱检测方法，其特征在于，所述的复方透骨草制剂的具体剂型为溶液剂、酊剂、软膏剂、凝胶剂或搽剂。 7.根据权利要求6所述的中药指纹图谱检测方法，其特征在于，所述的复方透骨草制剂的具体剂型为溶液剂，所述的溶液剂的制备方法是：将各原料药用米醋浸渍，滤过，得滤液；由步骤(3)得到的指纹图谱中包含米醋特征成分。 8.一种复方透骨草制剂的质量检测方法，其特征在于，包括以下步骤： (1)对照品溶液的制备称取芦丁、槲皮素、金丝桃苷和苯甲酸钠对照品，加入甲醇溶解制成1-300μg/ml的对照品溶液； (2)供试品溶液的制备量取复方透骨草制剂，加入甲醇，混匀，静置，过滤取滤液，即得供试品溶液； (3)高效液相色谱法测定将对照品溶液和供试品溶液分别进行高效液相色谱法测定，色谱条件为：色谱柱：C18柱；柱温：20～40℃；流动相：0.05～0.15vol％磷酸水溶液和乙腈梯度洗脱；测定波长：210～240nm； (4)标准指纹图谱的建立根据步骤(3)的检测数据，得到各供试品溶液的高效液相图谱，确立高效液相色谱峰保留时间和峰面积值，然后计算各特征峰的相对保留时间的平均值和相对峰面积的平均值以及标准差，分别与参比峰的平均保留时间和平均峰面积相除，作为标准指纹图谱的相对峰保留时间和相对峰面积值，导出计算结果，制定标准指纹图谱数据，绘制标准指纹图谱；标准指纹图谱包含至少26个特征峰和1个参比峰，其中12号峰为苯甲酸钠，为参比峰，13号峰为芦丁，14号峰为金丝桃苷，20号峰为槲皮素； (5)复方透骨草制剂的质量检测针对需要检测的复方透骨草制剂的样品，按照步骤(1)和(2)分别制备对照品溶液和供试品溶液，将所得的样品的指纹图谱与标准指纹图谱比较，经计算相似度不低于0.90，即为合格的复方透骨草制剂。 9.根据权利要求8所述的质量检测方法，其特征在于，步骤(3)中的梯度洗脱具体为：从3vol％乙腈开始等度洗脱15min达到9vol％乙腈，再以线性洗脱的方式经35min达到15vol％乙腈，以线性洗脱的方式经40min达到25vol％乙腈，以线性洗脱的方式经10min达到30vol％乙腈，以线性洗脱的方式经40min达到38vol％乙腈，以线性洗脱的方式经15min达到70vol％乙腈，最后以70vol％乙腈等度洗脱15min。 10.根据权利要求8所述的质量检测方法，其特征在于，步骤(2)中至少量取10个批次的复方透骨草制剂。
所属类别：	发明专利