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原文传递一种基于连续提取策略建立的中药复方指纹图谱检测方法

专利名称：	一种基于连续提取策略建立的中药复方指纹图谱检测方法
摘要：	本发明属于中药复方成分分析检测技术领域，具体涉及一种基于连续提取策略建立的中药复方指纹图谱检测方法。该方法通过以下步骤实现：首先将供试品荆防颗粒采用不同极性的提取溶剂进行连续提取，分别制备不同极性部位供试液；制备内标溶液；采用超高效液相色谱联用质谱对供试品溶液进行指纹图谱检测，定量表征，并对各成分进行归属分析。本发明通过定性定量分析比较不同组合溶剂提取方法，确定了最佳的连续提取策略，优化了提取方法，建立了基于连续提取策略的荆防颗粒UPLC‑MS指纹图谱检测方法，共分析出112个化合物，为荆防颗粒质量精准评价提供了技术支撑。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	山东;37
申请人：	山东中医药大学
发明人：	高燕;赵渤年;刘璐;于子翔;杜瑞清
专利状态：	有效
申请日期：	2023-08-22T00:00:00+0800
发布日期：	2023-11-21T00:00:00+0800
申请号：	CN202311064300.1
公开号：	CN117092269A
代理机构：	济南泉城专利商标事务所
代理人：	陈娟
分类号：	G01N30/86;G01N30/06;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/86;G01N30/06
申请人地址：	250355 山东省济南市长清区大学科技园大学路4655号
主权项：	1.一种基于连续提取策略建立的中药复方指纹图谱检测方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）供试品溶液的制备：将供试品荆防颗粒采用不同极性的提取溶剂进行连续提取，分别制备不同极性部位供试品溶液；（2）内标溶液的制备：选择葛根素作为内标，称取葛根素，加入甲醇溶液，超声混匀，在供试品溶液中加入内标溶液，配置成含内标样品溶液。（3）样品检测：采用超高效液相色谱联用质谱对供试品溶液进行指纹图谱检测，定量表征，并对各成分进行归属分析。 2.根据权利要求1所述的中药复方指纹图谱检测方法，其特征在于，步骤（1）中，所述不同极性的提取溶剂为乙酸乙酯-95%乙醇-30%乙醇。 3.根据权利要求1或2所述的中药复方指纹图谱检测方法，其特征在于，步骤（1）的具体过程为：取荆防颗粒0.50043g，精密称定，加乙酸乙酯20 mL，称重，加热回流40min，放冷，补足失重，摇匀，过滤，滤液蒸干，加入10ml70%甲醇溶解；取滤渣，加95%乙醇20mL，称重，加热回流40min，放冷，补足失重，摇匀，过滤，滤液蒸干，加入70%甲醇溶解；取滤渣，加30%乙醇20mL，称重，加热回流40min，放冷，补足失重，摇匀，过滤，滤液蒸干，加入70%甲醇溶解；合并上述70%甲醇溶液，蒸干，加70%甲醇定容到10mL的容量瓶中，混匀后转移至离心管中，离心5min（转速10000 r/min），取适量上清液过0.22μm微孔滤膜至进样瓶中，4℃保存备用。 4.根据权利要求1或2所述的中药复方指纹图谱检测方法，其特征在于，步骤（1）的具体过程还可以为：取荆防颗粒0.50039g，精密称定，加乙酸乙酯20 mL，称重，加热回流40min，放冷，补足失重，摇匀，过滤，滤液蒸干，用甲醇定容到10 mL的容量瓶中；取滤渣，加95%乙醇20 mL，称重，加热回流40min，放冷，补足失重，摇匀，过滤，滤液蒸干，加95%乙醇定容到10 mL的容量瓶中；取滤渣，加70%乙醇20 mL，称重，加热回流40min，放冷，补足失重，摇匀，过滤，滤液蒸干，加70%乙醇定容到10 mL的容量瓶中；取滤渣，加30%乙醇20 mL，称重，加热回流40min，放冷，补足失重，摇匀，过滤，滤液蒸干，加30%乙醇定容到10 mL的容量瓶中；取滤渣，加水20 mL，称重，加热回流40 min，放冷，补足失重，摇匀，过滤，滤液蒸干，加水定容到10 mL的容量瓶中；将上述提取样品，混匀后转移至离心管中，离心5min（转速10000 r/min），取适量上清液过0.22 μm微孔滤膜至进样瓶中，4℃保存备用。 5.根据权利要求1或2所述的中药复方指纹图谱检测方法，其特征在于，步骤（2）中，所述含内标样品溶液中，内标的浓度为10ug/ml；所述甲醇溶液的体积分数为70%；所述葛根素和甲醇溶液的比例为1mg：1mL。 6.根据权利要求1所述的中药复方指纹图谱检测方法，其特征在于，步骤（3）中，所述液相色质联用的检测条件为：色谱条件：Therma热电色谱柱（100 mm × 2.1 mm，2.7μm），流动相为0.1%甲酸水溶液(A)-甲醇(B)，流速为0.3 mL/min，柱温为30℃，进样量为2 µL，进行梯度洗脱。 7.根据权利要求6所述的中药复方指纹图谱检测方法，其特征在于，所述梯度洗脱的程序为：。 8.根据权利要求6或7所述的中药复方指纹图谱检测方法，其特征在于，所述质谱的条件为：电喷雾离子源（ESI），正、负离子监测模式；正离子喷雾电压：3500 v，负离子喷雾电压：3000 v，鞘气为氮气，压力为35 arb；辅助气为氮气，压力为10 arb；毛细管温度为350℃，扫描质量范围为m/z100～1000。
所属类别：	发明专利