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原文传递一种大豆抗原蛋白含量的测定方法

专利名称：	一种大豆抗原蛋白含量的测定方法
摘要：	本发明适用于生物检测技术领域，提供了一种大豆抗原蛋白含量的测定方法，所述方法包括：配制含有亚硫酸钠的磷酸盐溶液，作为缓冲液；将豆粕样品与缓冲液按一定比例混合，得第一混合液；向所述第一混合液加入一定比例的二硫苏糖醇以及十二烷基硫酸钠，缓慢升温至40～50℃，并恒温水浴处理2～3h，得第二混合液；将第二混合液进行离心处理，取滤液；将滤液的pH调至6.1～6.2，所得沉淀为11S球蛋白；将去除沉淀后的滤液pH调至3.8～3.9，所得沉淀为7S球蛋白；测定11S球蛋白以及7S球蛋白含量。该方法方便快捷，能在较短的时间内将抗原蛋白分离，且不需要昂贵的仪器设备，灵敏度高，受外界因素影响较小，适于推广应用。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	天津;12
申请人：	天津瑞孚饲料有限公司
发明人：	赵蕊
专利状态：	有效
申请日期：	2019-03-16T00:00:00+0800
发布日期：	2019-06-11T00:00:00+0800
申请号：	CN201910200282.2
公开号：	CN109870538A
代理机构：	北京华仲龙腾专利代理事务所(普通合伙)
代理人：	李静
分类号：	G01N31/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N31
申请人地址：	301600 天津市静海经济开发区物海道18号
主权项：	1.一种大豆抗原蛋白含量的测定方法，其特征在于，所述测定方法包括以下步骤：配制含有亚硫酸钠的磷酸盐溶液，作为缓冲液；将豆粕样品进行粉碎处理后，与所述缓冲液按一定比例混合，并进行水浴处理，取出摇匀，得第一混合液；向所述第一混合液加入一定比例的二硫苏糖醇以及十二烷基硫酸钠，缓慢升温至40～50℃，并恒温水浴处理2～3h，并每隔5～10min摇匀一次，静置冷却后，得第二混合液；将所述第二混合液进行离心处理，取滤液；将所述滤液的pH调至6.1～6.2，并置于2～5℃下离心处理，所得沉淀为11S球蛋白；将去除沉淀后的滤液pH调至3.8～3.9，并置于2～5℃下离心处理，所得沉淀为7S球蛋白；将所述11S球蛋白以及7S球蛋白分别经过冷冻干燥处理后，测定有效含量。 2.如权利要求1所述的大豆抗原蛋白含量的测定方法，其特征在于，所述磷酸盐溶液的浓度为0.05～0.07mol/L。 3.如权利要求1所述的大豆抗原蛋白含量的测定方法，其特征在于，所述缓冲液为含0.02～0.03mol/L亚硫酸钠的磷酸盐溶液。 4.如权利要求1所述的大豆抗原蛋白含量的测定方法，其特征在于，所述豆粕样品与缓冲液的料液比为1:25～35。 5.如权利要求1所述的大豆抗原蛋白含量的测定方法，其特征在于，所述豆粕样品与缓冲液的水浴处理温度为35～45℃，时间为1～2h。 6.如权利要求1所述的大豆抗原蛋白含量的测定方法，其特征在于，所述二硫苏糖醇的浓度为0.01～0.03mol/L。 7.如权利要求1所述的大豆抗原蛋白含量的测定方法，其特征在于，所述二硫苏糖醇与十二烷基硫酸钠的重量比为5:1。 8.如权利要求1所述的大豆抗原蛋白含量的测定方法，其特征在于，所述第一混合液与二硫苏糖醇的体积比为100:1。 9.如权利要求1所述的大豆抗原蛋白含量的测定方法，其特征在于，所述升温速率为1～2℃/min。 10.如权利要求1所述的大豆抗原蛋白含量的测定方法，其特征在于，所述离心速率为4000r/min，时间为5～7min。
所属类别：	发明专利