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原文传递一种芪龙胶囊指纹图谱结合液质联用的检测方法及其应用

专利名称：	一种芪龙胶囊指纹图谱结合液质联用的检测方法及其应用
摘要：	本申请属于中药指纹图谱分析领域，具体涉及一种芪龙胶囊指纹图谱结合液质联用的检测方法及其应用。本申请提出了一种芪龙胶囊的指纹图谱建立方法，及通过指纹图谱及黄芪甲苷的检测对芪龙胶囊进行质量控制的方法。本申请中通过高效液相建立指纹图谱，通过高效液相分离，得到15个共有峰，可从整体上反应芪龙胶囊的质量状况。该构建方法操作简单，稳定可靠，精密度高，分离度好，指纹图谱的稳定性和重现性较好，且信息量大，避免了因只测定一、两个化学成分而判定制剂整体质量的片面性，又减少了为质量达标而人为处理的可能性，通过对多个批次的样品进行系统分析，能更加全面、科学评价芪龙胶囊的质量，从而使产品的质量和疗效得到保证。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	山东;37
申请人：	山东大学
发明人：	臧恒昌;卞宪明;李振;刘瑞琛;高玲玲;叶素艳;李广贺;李丹阳;孙钟毓;周海洋
专利状态：	有效
申请日期：	2018-12-28T00:00:00+0800
发布日期：	2019-07-26T00:00:00+0800
申请号：	CN201811621837.2
公开号：	CN110057927A
代理机构：	济南圣达知识产权代理有限公司
代理人：	王志坤
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	250012 山东省济南市历下区文化西路44号
主权项：	1.一种芪龙胶囊指纹图谱的建立方法，其特征在于，所述方法以芍药苷、阿魏酸、丹参酮ⅡA、丹参酚酸B及羟基红花黄素A为混合标准品。 2.如权利要求1所述的指纹图谱建立方法，其特征在于，步骤如下： (1)供试品溶液的制备：取芪龙胶囊粉末，加入甲醇超声提取一段时间后，离心取上清，得溶液A；向残渣中加水，水浴加热一段时间后离心取上清，得溶液B，混合溶液A和溶液B，即得供试品溶液； (2)对照品溶液制备：取减压干燥至恒重的阿魏酸、芍药苷、丹酚酸B、丹参酮ⅡA、羟基红花黄色素A对照品，分别加入甲醇制成对照品溶液； (3)测定：分别精密量取供试品溶液和对照品溶液，注入高效液相色谱仪分离，采用梯度洗脱，流动相A相：含5mM乙酸铵、0.1％乙酸水溶液，流动相B相：乙腈；通过指纹图谱软件对高效液相色谱测定所得图谱进行分析处理，即得芪龙胶囊指纹图谱。 3.如权利要求2所述的指纹图谱建立方法，其特征在于，所述步骤(1)中称取一定量的芪龙胶囊粉末加入甲醇后超声0.8-1.2h后于3500-4500r/min离心8-12min，离心后获取上清溶液A，其中芪龙胶囊粉末：甲醇的比为(180-220)mg：(4-6)mL；向残渣中加入三蒸水，混均后于65-75℃水浴1.8-2.2h，3500-4500r/min离心8-12min，得到上清溶液B；将溶液A与溶液B按照(4-6):(6-8)比例混合后，加入流动相稀释4-6倍，经有机系滤膜过滤，得到供试品溶液。 4.如权利要求2所述的指纹图谱建立方法，其特征在于，所述步骤(2)中对照品溶液的配制方法如下：精密称取阿魏酸标准品0.0100g、芍药苷标准品0.0099g、丹参酮ⅡA标准品0.0101g、丹参酚酸B标准品0.0102g、羟基红花黄素A标准品0.0099g置10mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，分别配置标准品溶液。 5.如权利要求2所述的指纹图谱建立方法，其特征在于，所述步骤(3)中高效液相色谱分离条件为：色谱柱为CAPCELL PAK C18(2.0×150mm，5μm，日本SHISEIDO公司；流动相流速为0.3ml/min；柱温为35℃；检测波长为275nm，进样量20μL。 6.如权利要求2所述的指纹图谱建立方法，其特征在于，所述步骤(3)中梯度洗脱方式为：0-25min，流动相B10-25％；25-30min，流动相B25-39％；30-35min，流动相B39-42％；35-40min，42-50％；40-45min，流动相B50-55％；45-60min，流动相B55-90％。 7.一种芪龙胶囊的质量控制方法，其特征在于，所述质量控制方法包括如下步骤：取多个批次的芪龙胶囊按照上述指纹图谱方法得到芪龙胶囊样品图谱，将待测芪龙胶囊的图谱与参考样品图谱进行相似性比较，相似性计算方法为相关系数法。 8.如权利要求7所述的质量控制方法，其特征在于，所述参考样品指纹图谱的建立方法为：计算每个样品图谱与其他样品图谱之间的相似度，选择与其他样品相似度之和最大的样品为参考样品，其指纹图谱为参考样品指纹图谱。 9.一种芪龙胶囊的质量控制方法，其特征在于，取待测的芪龙胶囊，通过液质联用方法获得芪龙胶囊中黄芪甲苷图谱及黄芪甲苷标准品图谱，根据外标一点法测定芪龙胶囊中黄芪甲苷的含量。 10.如权利要求9所述的质量控制方法，其特征在于，所述液相色谱条件：色谱柱为CAPCELL PAK C18，规格为2.0×150mm，5μm，日本SHISEIDO公司生产；流动相：A相-含5mM乙酸铵、0.1％乙酸的水溶液，B相-乙腈；洗脱方式：梯度洗脱过程中，流动相A和流动相B的变化为：0-3min:60％-60％B；3-3.1min:60％-90％B；3.1-6.0min:90％-90％B；6.0-6.1min:90％-60％B；6.1-10.0min:60％-60％B。流动相流速为0.350ml/min；柱温为30℃；进样量10μL；优选的，所述质谱条件为：离子源：ESI电喷雾；扫描方式：MRM多反应监测；离子化方式：正离子；检测离子对：黄芪甲苷m/z：785.5/587.3；离子源电压：5000V；离子源温度：450℃；气帘气：10psi；雾化气：45psi；辅助气：55psi；解簇电压：55V；碰撞诱导解离电压：24V。
所属类别：	发明专利