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原文传递一种基于双嵌段DNA的电化学适配体传感器的构筑及应用

专利名称：	一种基于双嵌段DNA的电化学适配体传感器的构筑及应用
摘要：	本发明公开了一种基于双嵌段DNA的电化学适配体传感器的构筑方法，将含有Poly‑C和卡那霉素适配体序列的双嵌段DNA与氧化石墨烯混合制得含Poly‑C的双嵌段DNA‑氧化石墨烯复合物，将其滴涂在多壁碳纳米管修饰的玻碳电极表面，再用质量百分数为1~2%的牛血清白蛋白进行修饰，得到双嵌段DNA的电化学适配体传感器。本发明基于Poly‑C与氧化石墨烯的物理吸附作用，设计了一种一端含有Poly‑C序列，另一端含有卡那霉素适配体序列的双嵌段DNA，从而构筑了一种电化学适配体传感器，该传感器的构筑方法简便，不需要任何标记物来修饰，制作成本低，实现了对卡那霉素灵敏，快速，高效的检测。
专利类型：	发明专利
申请人：	西北师范大学
发明人：	何晓燕;韩慧敏;董建第;师文玉;芦雄
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T18:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T07:00:00+0805
申请号：	CN201911312484.2
公开号：	CN110967389A
代理机构：	兰州智和专利代理事务所(普通合伙)
代理人：	张英荷
分类号：	G01N27/327;G01N27/30;G01N27/48;G;G01;G01N;G01N27;G01N27/327;G01N27/30;G01N27/48
申请人地址：	730070 甘肃省兰州市安宁区安宁东路967号
主权项：	1.一种基于双嵌段DNA的电化学适配体传感器的构筑方法，包括以下工艺步骤：（1）含Poly-C的双嵌段DNA-氧化石墨烯复合物的制备：将含Poly-C的双嵌段DNA序列与氧化石墨烯加入到pH=7.5的缓冲溶液中，于室温下反应10~12h，离心，洗涤，得到含Poly-C的双嵌段DNA-氧化石墨烯复合物；（2）多壁碳纳米管在玻碳电极上的修饰：将酸化的多壁碳纳米管超声分散在壳聚糖溶液中，采用滴凃法将其滴凃于玻碳电极表面，自然晾干；（3）含Poly-C双嵌段DNA-氧化石墨烯复合物的固定：将步骤（1）制备的含Poly-C的双嵌段DNA-氧化石墨烯复合物滴涂在步骤（2）制备的修饰玻碳电极表面，于0~4℃条件下密封进行干燥；（4）牛血清白蛋白的修饰：将质量百分数为1~2%的牛血清白蛋白滴加到步骤（3）制备的修饰玻碳电极表面，在室温下孵育1~2h，即得双嵌段DNA电化学适配体传感器。 2.如权利要求1所述一种基于双嵌段DNA的电化学适配体传感器的构筑方法，其特征在于：步骤（1）中，氧化石墨烯与含Poly-C的双嵌段DNA序列的质量比为1:0.1~1:0.11。 3.如权利要求1所述一种基于双嵌段DNA的电化学适配体传感器的构筑方法，其特征在于：步骤（1）中，缓冲溶液组分为：120~150 mM NaCl，0.8~1 mM MgCl2，20~25 mM HEPES。 4.如权利要求1所述一种基于双嵌段DNA的电化学适配体传感器的构筑方法，其特征在于：步骤（2）中，壳聚糖的质量百分数为0.5~1%；酸化的多壁碳纳米管分散在壳聚糖溶液中的浓度为1~2mg/mL。 5.如权利要求1所述一种基于双嵌段DNA的电化学适配体传感器的构筑方法，其特征在于：步骤（2）中，多壁碳纳米管的酸化：将多壁碳纳米管加入浓硫酸与浓硝酸的混合溶液中，于55~60℃加热搅拌6~8h，过滤，洗涤，干燥，即得酸化的多壁碳纳米管；浓硝酸与浓硫酸的体积比为1:1~1:3。 6.如权利要求1所述方法构筑的双嵌段DNA电化学适配体传感器用于检测卡那霉素。 7.如权利要求6所述基于双嵌段DNA的电化学适配体传感器用于检测卡那霉素，其特征在于：电化学工作站电压为-0.1~0.4V的条件下，在含有5.0 mM [Fe(CN)6]3-/4- 和0.1 MKCl的浓度为0.2 M，pH =7.4的磷酸缓冲液中，采用微分脉冲伏安法进行检测：电流在卡那霉素浓度为0.05 pM ~100 nM范围内与卡那霉素浓度的对数值呈现良好的线性关系。 8.如权利要求7所述基于双嵌段DNA的电化学适配体传感器用于检测卡那霉素，其特征在于：电流与卡那霉素浓度的对数值的线性回归方程如下： I = -130.466+3.089 lgC(R2=0.997) I——电流，单位：μA C——卡那霉素浓度，单位：pM。
所属类别：	发明专利