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原文传递一种尿液异常代谢细胞捕获和检测方法

专利名称：	一种尿液异常代谢细胞捕获和检测方法
摘要：	本发明公开了一种尿液异常代谢细胞捕获和检测方法，包括以下步骤：去除样本杂质：拿取尿液样本，将尿液样本倒入试管，接着将尿素酶水溶液加入试管，静置孵育，从而去除尿液样本中的尿素，然后加入活性吸附剂，使用超声波震荡，去除尿液样本中的硫和磷；加入PBS溶液：将尿液样本倒入离心设备进行离心，加入PBS溶液，得到FPBS重悬的尿液细胞。本发明通过设置去除样本杂质、加入PBS溶液、处理器皿、倒入器皿和检测的工艺流程，解决了目前的细胞捕获和检测方法由于尿液具有不同的粘稠度，沉降速度差别很大，容易导致图像不清晰，检测结果不准的问题，该尿液异常代谢细胞捕获和检测方法，具备图像清晰，检测结果准确的优点。
专利类型：	发明专利
申请人：	苏州浚惠生物科技有限公司
发明人：	阎灼辉
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T19:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T00:00:00+0805
申请号：	CN201911319863.4
公开号：	CN111077148A
代理机构：	北京中政联科专利代理事务所(普通合伙)
代理人：	刘静
分类号：	G01N21/84;G01N1/34;G;G01;G01N;G01N21;G01N1;G01N21/84;G01N1/34
申请人地址：	200233 上海市徐汇区桂平路333号6号楼103室
主权项：	1.一种尿液异常代谢细胞捕获和检测方法，其特征在于：包括以下步骤：步骤1：去除样本杂质：拿取尿液样本，将尿液样本倒入试管，接着将尿素酶水溶液加入试管，静置孵育，从而去除尿液样本中的尿素，然后加入活性吸附剂，使用超声波震荡，去除尿液样本中的硫和磷；步骤2：加入PBS溶液：将尿液样本倒入离心设备进行离心，加入PBS溶液，得到FPBS重悬的尿液细胞；步骤3：处理器皿：对器皿进行清洗，将APTES溶液加入到器皿中，接着将器皿避光放置一个半小时，然后吸除多余的APTES，最后使用纯水清洗若干次后，将器皿放入烘箱中烘干；步骤4：倒入器皿：将FPBS重悬的尿液细胞加入到器皿中，然后吸除多余液体，接着吸出多余液体加入多聚甲醛进行固定、吸出多余液体加入PBS进行清洗；步骤5：检测：将尿液细胞倒在滤膜上进行过滤，滤膜将尿液细胞截留在滤膜上，对截留在滤膜上的尿液细胞进行检测，检测使用显微镜拍照识别。 2.根据权利要求1所述的一种尿液异常代谢细胞捕获和检测方法，其特征在于：所述在步骤1中，尿液样本为患者清晨起床第一次小便的中端尿液，且患者需要提前至少八个小时不喝水。 3.根据权利要求1所述的一种尿液异常代谢细胞捕获和检测方法，其特征在于：所述在步骤1中，取得尿液样本后应该在两个小时内及时处理，或放入4℃左右的冰箱保存，但不可超过6小时。 4.根据权利要求1所述的一种尿液异常代谢细胞捕获和检测方法，其特征在于：所述在步骤2中，使用200g离心，离心需要6分钟。 5.根据权利要求1所述的一种尿液异常代谢细胞捕获和检测方法，其特征在于：所述在步骤2中，PBS溶液中FBS的质量占比应为百分之一。 6.根据权利要求1所述的一种尿液异常代谢细胞捕获和检测方法，其特征在于：所述在步骤3中，烘干时间为1～2h，烘干温度为75～85℃。 7.根据权利要求1所述的一种尿液异常代谢细胞捕获和检测方法，其特征在于：所述在步骤4中，多聚甲醛中多聚甲醛的质量占比应为百分之四，在4℃的温度中放置10分钟。 8.根据权利要求1所述的一种尿液异常代谢细胞捕获和检测方法，其特征在于：所述在步骤4中，加入预冷后的甲醇，在-15℃的温度中放置15分钟。 9.根据权利要求1所述的一种尿液异常代谢细胞捕获和检测方法，其特征在于：所述在步骤4中，清洗完成后将器皿静置20分钟，温度37℃。 10.根据权利要求1所述的一种尿液异常代谢细胞捕获和检测方法，其特征在于：所述在步骤5中，滤膜分两种：一种是透明滤膜，一种是不透明滤膜，优选透明滤膜。
所属类别：	发明专利