详情

原文传递一种高效分离并检测D-丝氨酸中有关物质的高效液相色谱法

专利名称：	一种高效分离并检测D-丝氨酸中有关物质的高效液相色谱法
摘要：	本发明提供一种高效分离并检测D‑丝氨酸中有关物质的高效液相色谱法，D‑丝氨酸可以作为拉考沙胺等多个药物的起始物料，对其杂质的研究与控制可以保证终产品的质量和患者用药安全，具有重要的产业价值。本发明的方法采用优选的亲水色谱柱，实现了D‑丝氨酸的制备相关杂质以及二聚体杂质等多个常规方法难以分离的化合物的有效分离。
专利类型：	发明专利
申请人：	北京澳合药物研究院有限公司;吉林汇康制药有限公司
发明人：	张莉;王宏;赵娜;牛玉乐;邓声菊;周美晶;刘美霞
专利状态：	有效
申请日期：	2022-12-19T00:00:00+0800
发布日期：	2023-01-17T00:00:00+0800
申请号：	CN202211629132.1
公开号：	CN115616118A
分类号：	G01N30/02;G01N30/06;G01N30/30;G01N30/32;G01N30/34;G01N30/74;G;G01;G01N;G01N30;G01N30/02;G01N30/06;G01N30/30;G01N30/32;G01N30/34;G01N30/74
申请人地址：	101113 北京市通州区张家湾镇齐善庄村东3幢-301室;
主权项：	1.一种高效分离并检测D-丝氨酸及其有关物质的高效液相色谱法，其中色谱柱固定相为亲水色谱柱，流动相由A相和B相组成，所述A相为浓度为10-30mmol/L缓冲盐水溶液，B相为乙腈，流动相为梯度洗脱或等度洗脱的任一种，A相和B相的体积比为5-35：95-65，紫外检测器的检测波长为180nm-220nm，流动相的流速为0.8ml/min-1.5ml/min，色谱柱柱温为10℃-40℃，进样体积为1μl-20μl，其中，所述亲水色谱柱选自Polar-100、Polar-Diol、Polar-Silica、Polar-Pyridine、Polar-imidazole、TSKgel Amide、TSKgel NH2、Venusil HILIC、Merck ZIC、COSMOSIL HILIC、Ultimate HILIC Amphion、Ultimate HILIC NH2、UltimateHILIC Silica、Ultimate HILIC Amide、SepaFlash HILIC的任一种或其组合。 2.根据权利要求1所述的高效液相色谱法，所述亲水色谱柱为Ultimate HILIC Silica4.6×250mm 5μm。 3.根据权利要求2所述的高效液相色谱法，所述缓冲盐水溶液选自甲酸铵缓冲液、乙酸铵缓冲液、磷酸铵缓冲液、磷酸二氢钾缓冲液、磷酸二氢钠缓冲液的任一种或其组合。 4.根据权利要求3所述的高效液相色谱法，所述缓冲盐水溶液用pH调节剂调节pH，所述pH调节剂选自甲酸、乙酸、磷酸、三氟乙酸的任一种或其组合。 5.根据权利要求4所述的高效液相色谱法，所述A相为20mmol/L乙酸铵，所述乙酸铵用甲酸调节pH至3.0。 6.根据权利要求5所述的高效液相色谱法，所述有关物质选自有关物质1、有关物质2、有关物质3和有关物质4的任一种或其组合：。 7.根据权利要求6所述的高效液相色谱法，所述有关物质的出峰顺序依次为有关物质1、有关物质2、D-丝氨酸、有关物质3和有关物质4，其中，各有关物质峰及D-丝氨酸峰与相邻化合物峰的分离度均大于1.5。 8.根据权利要求7所述的高效液相色谱法，所述高效液相色谱法包括下述步骤： 1）溶液配制：空白溶剂：水：流动相，且体积比为1:1；供试品溶液：取供试品100mg，置10ml量瓶中，用5ml水溶解，流动相稀释至刻度，摇匀即得；定位溶液：取有关物质1-4各10mg，分别用水溶解并配制为0.5mg/ml的浓度；混合溶液：称取供试品100mg，量取各杂质定位溶液各1ml，置同一10ml量瓶中，溶解，流动相稀释至刻度，摇匀即得； 2）以亲水色谱柱Ultimate HILIC Silica 4.6×250mm 5μm为固定相，流动相A为20mmol/L乙酸铵，且所述乙酸铵用甲酸调节pH至 3.0，流动相B为乙腈，流动相A与B的体积比为15：85，进行等度洗脱，流动相流速为1.2ml/min，柱温为30℃，紫外检测器检测波长为200nm，进样体积为10μl，记录色谱图。 9.根据权利要求1-8任一项所述的高效液相色谱法在高效分离并检测D-丝氨酸中的有关物质中的应用。