原文传递
一种免疫亲和柱净化-液相色谱-串联质谱法测定软骨藻酸类毒素的方法
| 专利名称： | 一种免疫亲和柱净化-液相色谱-串联质谱法测定软骨藻酸类毒素的方法 |
| 摘要： | 本发明涉及一种软骨藻酸类毒素检测方法，尤其是涉及一种免疫亲和柱净化‑液相色谱‑串联质谱法测定软骨藻酸类毒素的方法，其利用高性能、强识别的DA毒素免疫亲和柱，并结合高灵敏性和精确性的液相色谱‑串联质谱检测不同海洋生物中DA毒素的分析测定，能有效解决前处理中样品净化不理想的问题，并减少样品基质干扰，缩短分析时间，提高方法回收率，填补免疫亲和技术在软骨藻酸类毒素检测领域的空白。 |
| 专利类型： | 发明专利 |
| 国家地区组织代码： | 浙江;33 |
| 申请人： | 浙江省海洋水产研究所 |
| 发明人： | 陈思;张小军;严忠雍 |
| 专利状态： | 有效 |
| 申请号： | CN201811397681.4 |
| 公开号： | CN109374809A |
| 代理机构： | 杭州仁杰专利代理事务所(特殊普通合伙) 33297 |
| 代理人： | 胡寅旭 |
| 分类号： | G01N30/88(2006.01)I;G;G01;G01N;G01N30 |
| 申请人地址： | 316021 浙江省舟山市定海区临城体育路28号 |
| 主权项： | 1.一种免疫亲和柱净化‑液相色谱‑串联质谱法测定软骨藻酸类毒素的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)样品前处理：准确称取已充分均质样品2.00g于50mL具塞离心管中，加入8mL体积浓度为75％的甲醇水溶液，涡旋振荡2min，超声提取10min，7000r/min离心5min，将上清液移至另一50mL离心管中，得一次提取液；再往剩余残渣中加入8mL体积浓度为75％的甲醇水溶液，重复提取一次，得二次提取液；合并一次提取液和二次提取液后定容至20mL，得提取液；移取1mL提取液至另一50mL离心管中，加入5mL PBS缓冲液进行稀释，得待净化的样品液；(2)免疫亲和柱净化：取一DA单克隆抗体免疫亲和柱，待其恢复至室温后去掉亲和柱堵头，放出柱内保存液后，上样品液；上样结束后，用6mL体积浓度为50％甲醇水溶液淋洗亲和柱，挤干柱内残留液，并弃去以上全部流出液，最后用3mL含有质量浓度2％氨水的甲醇溶液洗脱，收集的洗脱液于50℃氮气吹干，用1mL初始流动相定容溶解，经0.22μm滤膜过滤后供液相色谱‑质谱进行分析。 |
| 所属类别： | 发明专利 |
检索历史
应用推荐
