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原文传递一种L-α-甘油磷酰胆碱有关物质的检测方法

专利名称：	一种L-α-甘油磷酰胆碱有关物质的检测方法
摘要：	本发明涉及一种液相色谱法检测化学合成的L‑α‑甘油磷酰胆碱中有关物质检查方法。其中所使用的色谱柱为极性硅胶柱或其他等效色谱柱；流动相为甲醇‑缓冲盐溶液、乙腈‑缓冲盐溶液或者甲醇‑乙腈‑缓冲盐溶液，并包含了添加剂。该方法操作简便，专属性、精密度和准确度较好，方法的耐用性良好，适用于化学合成的L‑α‑甘油磷酰胆碱中有关物质的检查和质量控制。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	上海;31
申请人：	中国科学院上海药物研究所
发明人：	陈东英;赵宏伟;孙玲;陈欢欢;秦昊;朱晓倩;李立立;翟美玲;包仁芳
专利状态：	有效
申请日期：	2019-04-11T00:00:00+0800
发布日期：	2019-08-16T00:00:00+0800
申请号：	CN201910290607.0
公开号：	CN110133119A
代理机构：	北京金信知识产权代理有限公司
代理人：	刘锋;郑丹
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	201203 上海市浦东新区张江祖冲之路555号
主权项：	1.一种液相色谱法检测甘油磷酰胆碱中有关物质磷酸甘油酯、胆碱和磷酰胆碱的方法，其特征在于：所使用的色谱柱为极性硅胶柱或等效色谱柱；流动相为甲醇-缓冲盐溶液、乙腈-缓冲盐溶液或者甲醇-乙腈-缓冲盐溶液，并包含了添加剂。 2.如权利要求1所述的液相色谱法检测甘油磷酰胆碱中有关物质磷酸甘油酯、胆碱和磷酰胆碱的方法，其特征在于：使用的检测器为示差折光检测器、蒸发光散射检测器或质谱检测器。 3.如权利要求1所述的液相色谱法检测甘油磷酰胆碱中有关物质磷酸甘油酯、胆碱和磷酰胆碱的方法，其特征在于：所述缓冲盐为正离子对试剂、负离子对试剂、甲酸盐、醋酸盐、磷酸盐中的一种或几种。 4.如权利要求3所述的液相色谱法检测甘油磷酰胆碱中有关物质磷酸甘油酯、胆碱和磷酰胆碱的方法，其特征在于：所述正离子对试剂为四正丁基溴化铵；所述负离子对试剂选自庚烷磺酸钠、辛烷磺酸钠、己烷磺酸钠；所述甲酸盐为甲酸铵；所述醋酸盐为醋酸铵；所述磷酸盐为磷酸二氢钠。 5.如权利要求1所述的液相色谱法检测甘油磷酰胆碱中有关物质磷酸甘油酯、胆碱和磷酰胆碱的方法，其特征在于：所述流动相为甲醇-甲酸铵水溶液体系，其中甲醇占流动相的体积比为50-80％；甲酸铵水溶液中甲酸铵的浓度为10-100mM。 6.如权利要求5所述的液相色谱法检测甘油磷酰胆碱中有关物质磷酸甘油酯、胆碱和磷酰胆碱的方法，其特征在于：所述流动相为甲醇-甲酸铵水溶液体系，其中甲醇占流动相的体积比为65％；甲酸铵水溶液中甲酸铵的浓度为20mM。 7.如权利要求1所述的液相色谱法检测甘油磷酰胆碱中有关物质磷酸甘油酯、胆碱和磷酰胆碱的方法，其特征在于：所述添加剂为甲酸、甲酸盐、醋酸、醋酸盐、磷酸、磷酸盐中的一种或多种；添加剂占流动相中缓冲盐溶液的质量分数为0.05％-2％。 8.如权利要求7所述的液相色谱法检测甘油磷酰胆碱中有关物质磷酸甘油酯、胆碱和磷酰胆碱的方法，其特征在于：所述添加剂为磷酸、磷酸二氢钠、磷酸二氢钾中的一种或多种。 9.如权利要求1所述的液相色谱法检测甘油磷酰胆碱中有关物质磷酸甘油酯、胆碱和磷酰胆碱的方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤1：空白溶液的制备：取甲醇水溶液作为空白溶液；步骤2：流动相体系制备：制备含20mM甲酸铵的水溶液作为水相，并加入占水相质量分数0.1％的磷酸盐，量取甲醇作为有机相，有机相与水相体积为65:35，将有机相和水相混合均匀；步骤3：有关物质对照品溶液的制备：分别取有关物质磷酸甘油酯、胆碱和磷酰胆碱，精密称定，加甲醇水溶液溶解，分别制成每1mL约含0.4mg±0.02mg的有关物质对照品溶液；步骤4：供试品溶液配制：精密称取待测定的甘油磷酰胆碱样品约0.4g±0.05g，加甲醇水溶液溶解，制成每1mL约含待测定的甘油磷酰胆碱样品80mg和未知含量的各有关物质的供试品溶液；分别精密量取步骤1制备的空白溶液、步骤3制备的有关物质对照品溶液和步骤4制备的供试品溶液各10μL，使用液相色谱法检测，记录色谱图，按照外标法计算待测定的甘油磷酰胆碱样品中有关物质磷酸甘油酯、胆碱和磷酰胆碱的含量；计算公式为：其中，CR为有关物质对照溶液中待测物的浓度，mg/mL； Cs为供试品溶液中甘油磷酰胆碱样品浓度，mg/mL； AR，AX分别为有关物质对照溶液和供试品溶液中待测物的峰面积，mV。 10.如权利要求9所述的液相色谱法检测甘油磷酰胆碱中有关物质磷酸甘油酯、胆碱和磷酰胆碱的方法，其特征在于：步骤1、步骤3和步骤4中所述甲醇水溶液中甲醇和水的体积比为65:35。
所属类别：	发明专利