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原文传递一种检测黄曲霉毒素B1的比率电化学生物传感器的制备方法

专利名称：	一种检测黄曲霉毒素B1的比率电化学生物传感器的制备方法
摘要：	本发明属于生物传感器技术领域，具体涉及一种检测黄曲霉毒素B1的比率电化学生物传感器的制备方法。硫堇THI与还原氧化石墨烯rGO复合材料作为信标分子一，AFB1适配体携带的二茂铁作为信标分子二，带正电的壳聚糖通过静电吸附作用将两者连接并固定在玻碳电极表面。本发明中，引入AFB1适配体，提高了比率生物传感器毒素AFB1的高特异性；构思在适配体两端标记Fc信号，实现了对比率信号的放大。构筑的比率电化学生物传感器检测线性范围为0.01ng·mL‑1‑100ng·mL‑1,检出限为3.3pg·mL‑1。通过探究，该传感器的制备方法简单，选择性高，灵敏度高，重现性好，稳定性好，为检测实际样品中的AFB1提供良好的传感平台。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	江苏;32
申请人：	江苏大学
发明人：	由天艳;李玉叶;刘东;朱成喜;申秀丽
专利状态：	有效
申请日期：	2019-05-10T00:00:00+0800
发布日期：	2019-09-06T00:00:00+0800
申请号：	CN201910388755.6
公开号：	CN110208343A
分类号：	G01N27/30(2006.01);G;G01;G01N;G01N27
申请人地址：	212013 江苏省镇江市京口区学府路301号
主权项：	1.一种检测黄曲霉毒素B1比率电化学生物传感器的制备方法，其特征在于，步骤如下： (1)THI-rGO复合材料的制备：首先，分别将THI、rGO用超纯水溶解并室温保存，THI需要避光；然后用细胞粉碎机处理rGO，提高其在水中的分散性；最后，将THI溶液与处理的rGO分散液混合搅拌并离心水洗，得到THI-rGO复合材料，室温储存备用； (2)将玻碳电极依次用不同粒径的三氧化二铝粉末打磨，在乙醇和水中超声后于空气中干燥； (3)将步骤(1)制备的THI-rGO复合材料修饰到步骤(2)所制得的玻碳电极表面，并在室温下自然晾干； (4)将壳聚糖修饰在步骤(3)所制得的传感器表面，并在室温下自然晾干； (5)将AFB1适配体修饰在步骤(4)所获得的传感器表面，壳聚糖与AFB1适配体之间的静电吸附作用使AFB1适配体被固定在电极表面，从而获得高灵敏比率电化学生物传感器。 2.根据权利要求1所述的检测黄曲霉毒素B1比率电化学生物传感器的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，THI的浓度为5μg·mL-1，rGO浓度为0.1mg·mL-1，细胞粉碎机处理rGO时间为30min，两个材料混合搅拌时间为12h，离心水洗三次，离心转速为8000rpm，每次15min，最终得到沉淀溶解在超纯水中；THI溶液：rGO分散液的体积比为1:3。 3.根据权利要求1所述的检测黄曲霉毒素B1比率电化生物传感器的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，玻碳电极的直径d＝3mm；所用的三氧化二铝粉末的粒径依次为0.3μm、0.05μm。 4.根据权利要求1所述检测黄曲霉毒素B1比率电化学生物传感器的制备方法，其特征在于，步骤(3)中，THI-rGO复合材料的用量为6μL。 5.根据权利要求1所述的检测黄曲霉毒素B1比率电化学生物传感器的制备方法，其特征在于，步骤(4)中，壳聚糖的浓度为0.5wt％，pH为5.0，用量为8μL。 6.根据权利要求1所述的检测黄曲霉毒素B1比率电化学生物传感器的制备方法，其特征在于，步骤(5)中，AFB1的适配体浓度所用量为1.0-3.0μM，用量为6μL；反应温度为4℃，反应时间为6-14h。
所属类别：	发明专利