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原文传递一种同时检测长春西汀中阿朴长春胺酸与长春胺酸的方法

专利名称：	一种同时检测长春西汀中阿朴长春胺酸与长春胺酸的方法
摘要：	本发明提供了一种同时检测长春西汀中阿朴长春胺酸与长春胺酸的方法，该方法包括(1)取长春西汀原料或长春西汀注射液配制供试品溶液；(2)将所述供试品溶液稀释1000倍作为对照溶液；(3)将所述供试品溶液、对照溶液，用高效液相色谱法进行色谱分离，并记录色谱图，色谱条件为：检测波长为262nm～266nm；柱温为25℃～35℃；流动相A为磷酸盐缓冲液，流动相B为甲醇；洗脱的流速为0.8～1.5ml/min；(3)按加校正因子的主成分自身对照法计算供试品溶液中阿朴长春胺酸与长春胺酸的含量。能使长春胺酸与阿朴长春胺酸、长春西汀峰达到较好分离，具有较高系统适应性，检测限低，精密度高。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	湖北;42
申请人：	武汉华龙生物制药有限公司
发明人：	丁冠军;刘薇;汪秋兰;董辉;黄楚华;吴芬
专利状态：	有效
申请日期：	2019-07-31T00:00:00+0800
发布日期：	2019-11-15T00:00:00+0800
申请号：	CN201910700219.5
公开号：	CN110455944A
代理机构：	武汉智嘉联合知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	江慧
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	430040湖北省武汉市东西湖区走马岭街新华集华龙生物科技园
主权项：	1.一种同时检测长春西汀中阿朴长春胺酸与长春胺酸的方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤： S1、供试品溶液的配制：取长春西汀原料或长春西汀注射液配制供试品溶液； S2、对照溶液的配制：将所述供试品溶液稀释1000倍作为对照溶液； S3、测定：精密量取所述供试品溶液、对照溶液适量，进样，采用高效液相色谱法进行色谱分离，并记录色谱图；所述高效液相色谱的测试条件为：所用色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，检测波长为262nm～266nm；柱温为25℃～35℃；流动相A为磷酸盐缓冲液，流动相B为甲醇；洗脱的流速为0.8～1.5ml/min； S4、计算：按加校正因子的主成分自身对照法计算供试品溶液中阿朴长春胺酸与长春胺酸的含量。 2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述S1中供试品溶液为采用流动相A-甲醇配制成浓度为2mg/mL的供试品溶液。 3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述S2中对照溶液为将供试品溶液采用流动相A-甲醇稀释配制成浓度为2μg/mL的长春西汀的对照溶液。 4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述S3中磷酸盐缓冲液为：磷酸二氢钠或二水合磷酸二氢钠加水溶解后，加入体积比为0.05％的磷酸，混匀即得。 5.如权利要求4所述的方法，其特征在于，取磷酸二氢钠1.40g，加水1000ml溶解，加磷酸0.5ml，混匀即得。 6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述S3中柱温为30℃；检测波长为264nm；洗脱的流速为1ml/min。 7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述S3中HPLC检测的洗脱程序为： 0-10min，流动相A：流动相B体积比为60：40，进行等度洗脱，10-20min，流动相A：流动相B体积比按线性渐变为55：45，进行线性梯度洗脱；20-40min，流动相A：流动相B体积比为55：45，进行等度洗脱；40-50min，流动相A：流动相B体积比按线性渐变为60：40，进行线性梯度洗脱；50min后，流动相A：流动相B体积比为60：40洗脱至有关物质的峰全部出现。 8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述S4中按照加校正因子的主成分自身对照法计算公式：阿朴长春胺酸的含量＝F阿朴长春胺酸×(A供/A对×1000)×100％，计算阿朴长春胺酸的含量，F阿朴长春胺酸为阿朴长春胺酸的相对校正因子；长春胺酸的含量＝F长春胺酸×(A供/A对×1000)×100％，计算长春胺酸的含量，F长春胺酸为长春胺酸的相对校正因子；其中A供为S1中供试品溶液的峰面积，A对为S2中所用对照溶液的主峰峰面积。 9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述相对校正因子F阿朴长春胺酸为主成分长春西汀线性回归方程的斜率与阿朴长春胺酸的线性回归方程的斜率的比值；所述相对校正因子F长春胺酸为主成分长春西汀线性回归方程的斜率与长春胺酸的线性回归方程的斜率的比值。 10.如权利要求9所述的方法，其特征在于，所述S4中计算校正因子所用的对照品溶液的制备过程为：分别称取长春西汀对照品、长春胺酸对照品、阿朴长春胺酸对照品，分别加流动相A-甲醇溶解并稀释，制成每1ml中含长春西汀、长春胺酸及阿朴长春胺酸各2μg的溶液，分别作为长春西汀、长春胺酸、阿朴长春胺酸对照品溶液。
所属类别：	发明专利