详情

原文传递一种检测畜禽肉制品中碱性着色剂的方法

专利名称：	一种检测畜禽肉制品中碱性着色剂的方法
摘要：	本发明公开了一种检测畜禽肉制品中碱性着色剂的方法，该方法利用提取液进行待检测样品的提取，并将提取后获得的上清液经WCX固相萃取柱净化，以完成样品前处理，然后应用超高效液相色谱‑串联四极杆线性离子阱质谱仪，建立了畜禽肉制品中7种碱性着色剂同时筛查、确证的检测方法，该检测方法具有操作简单、通量高效、定性准确、灵敏度高、环境友好等特点，适合用于肉制品中多种碱性着色剂的筛查、确证，避免假阳性样品的检出。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	辽宁;21
申请人：	沈阳出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心
发明人：	刘瑜;张柏瑀;刘宁;孟祥勇;韩宏乾;周健南;郭笑妍;顾俊杰;张彤
专利状态：	有效
申请日期：	2018-12-28T00:00:00+0800
发布日期：	2019-05-17T00:00:00+0800
申请号：	CN201811624967.1
公开号：	CN109765325A
代理机构：	北京弘权知识产权代理事务所(普通合伙)
代理人：	逯长明;许伟群
分类号：	G01N30/88(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	110016 辽宁省沈阳市沈河区东滨河路106号
主权项：	1.一种检测畜禽肉制品中碱性着色剂的方法，其特征在于，包括如下步骤： 1)样品前处理：称取样品放置于离心管中，加入提取液后，进行振荡提取、离心，收集上清液后，再加入提取液重复提取一次，收集上清液，将两次上清液合并；将上清液经WCX固相萃取柱净化，浓缩、定容后，备用； 2)定性分析：运用UPLC-MS/MS-Qtrap法对经过样品前处理的待检测畜禽肉制品样品进行筛查，采用液相色谱-串联四极杆线性离子阱质谱仪的增强子离子扫描功能，建立MRM-IDA-EPI筛查方法，获得待检测畜禽肉制品样品中各目标着色剂母离子的MS2谱图；用已知数据库中各化合物的标准MS2谱图与获得待检测畜禽肉制品样品中各目标着色剂母离子的MS2谱图分别进行对比，获得相似度值，并匹配两者的特征碎片离子，进而判断待检测畜禽肉制品样品中是否含有目标碱性着色剂； 3)定量分析：分别称取各碱性着色剂标准品，用甲醇分别配制10μg/mL的标准储备液，备用；按照步骤1)中样品前处理方法对空白样品进行处理后，用空白样品基质溶液稀释标准储备液，制成混合标准储备溶液；将混合标准储备溶液定容后，得到空白样品基质溶液，配制浓度为0.05μg/mL～5.0μg/mL的系列匹配标准工作溶液；运用UPLC-MS/MS-Qtrap法，采用液相色谱-串联四极杆线性离子阱质谱仪对系列匹配标准工作溶液和经过样品前处理的待检测畜禽肉制品样品分别进行测定，获得以浓度为横坐标，定量离子的峰面积为纵坐标的绘制标准曲线，以此标准曲线来计算待检测畜禽肉制品样品中目标着色剂的含量。 2.根据权利要求1所述检测畜禽肉制品中碱性着色剂的方法，其特征在于，所述提取液为乙腈与醋酸的混合溶液，其中，醋酸的体积浓度为1％。 3.根据权利要求1所述检测畜禽肉制品中碱性着色剂的方法，其特征在于，所述碱性着色剂为：碱性橙2、碱性橙21、碱性橙22、碱性嫩黄O、罗丹明B、碱性红1、碱性红2中的一种或多种。 4.根据权利要求1所述检测畜禽肉制品中碱性着色剂的方法，其特征在于，所述步骤1)中样品前处理具体为：称取5.00g样品，置于100mL离心管中，加入提取液1％醋酸乙腈溶液20mL，振荡提取20min，8000r/min离心5min，收集上清液于另一离心管中，再加入20mL提取液重复提取一次，收集上清液，将两次上清液合并；取20mL上清液过WCX固相萃取柱，依次用5mL甲醇、5mL水活化，用5mL 5％氨水淋洗，6mL2％甲酸甲醇溶液洗脱，40℃氮吹至近干，加入1.0mL体积浓度为20％的乙醇溶液溶解残渣，样液过0.22μm滤膜，备用。 5.根据权利要求1所述检测畜禽肉制品中碱性着色剂的方法，其特征在于，所述步骤2)中液相色谱-串联四极杆线性离子阱质谱仪的质谱条件为：离子源：电喷雾离子源；扫描模式：正离子扫描；采集模式：多反应监测；信息关联扫描：强度阈值100cps；增强子离子扫描：质量数采集范围m/z 50～1000Da；电喷雾电压：5000V；雾化气压力：50psi；气帘气压力：25psi；辅助气压力：50psi；离子源温度：500℃；去簇电压：80V；入口电压：10V；碰撞室出口电压：11V；碰撞气能量：20、35、50V；扩展碰撞能量：15V。 6.根据权利要求1所述检测畜禽肉制品中碱性着色剂的方法，其特征在于，所述步骤3)中液相色谱-串联四极杆线性离子阱质谱仪的色谱条件为：色谱柱：Waters BEH C18反相色谱柱；柱温：40℃；进样体积：10μL；流速：0.2mL/min；流动相：流动相A为0.1％甲酸水溶液，B为甲醇，梯度洗脱程序：0min，50％A；1min，50％A；12min，10％A；15min，10％A；15.1min，50％A；18min，50％A；所述步骤3)中液相色谱-串联四极杆线性离子阱质谱仪的质谱条件为：离子源：电喷雾离子源；扫描模式：正离子扫描；采集模式：多反应监测；电喷雾电压：5000V；雾化气压力：50psi；气帘气压力：25psi；辅助气压力：50psi；离子源温度：500℃；去簇电压：80V；入口电压：10V；碰撞室出口电压：11V。 7.根据权利要求1所述检测畜禽肉制品中碱性着色剂的方法，其特征在于，所述待检测畜禽肉制品样品为酱牛肉和香肠。
所属类别：	发明专利