详情

原文传递基于一测多评法鉴别制何首乌的方法

专利名称：	基于一测多评法鉴别制何首乌的方法
摘要：	本发明公开了基于一测多评鉴别制何首乌的方法，经方法学验证及省级检验机构复核，制何首乌样品重现好，表明拟定的方法可行。首次提出的一测多评法经过四年时间的数据普查分析，从实验室到饮片公司调研，从同一批生品加工炮制品，对传统的制何首乌“九蒸九制”进行炮制时间的考察，得出的F值限度可行，以大黄素作为对照品，数据表明F值不大于0.6的为炮制完全的制何首乌，因为F值在0.6以下处于稳定的状态；F值≥1.0的为生品特性，F值在0.6～1.0之间的炮制不完全的制何首乌样品。本发明解决了制何首乌从外观性状上不能区分是否炮制完全的难题。同时一测多评法检验成分低，为大宗药材制何首乌的安全使用提供了很好的支持。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	陕西;61
申请人：	陕西省食品药品监督检验研究院
发明人：	罗定强;刘海静;郑随军;高亚梅;黄艳;王小鹏
专利状态：	有效
申请日期：	2019-03-26T00:00:00+0800
发布日期：	2019-06-18T00:00:00+0800
申请号：	CN201910232891.6
公开号：	CN109900827A
代理机构：	西安通大专利代理有限责任公司
代理人：	徐文权
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	710065 陕西省西安市高新区科技五路21号
主权项：	1.基于一测多评法鉴别制何首乌的方法，其特征在于，包括以下步骤： 1)计算相对校正因子：精密量取大黄素、大黄素甲醚、大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄苷和大黄素甲醚-8-O-β-D-吡喃葡萄苷，分别制备得到四种对照品溶液，然后采用外标法，得到四个对照品的标准曲线，以大黄素为内标，分别计算出大黄素甲醚、大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄苷和大黄素甲醚-8-O-β-D-吡喃葡萄苷的相对校正因子； 2)计算各成分含量：取待检测的制何首乌粉末制备供试品溶液，以大黄素作为对照品制备对照品溶液，采用高效液相色谱法进行梯度洗脱，获得色谱图，以大黄素对照品的峰面积为对照，然后按照步骤1)计算得到的对应成分的相对校正因子，计算得到大黄素甲醚、大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄苷和大黄素甲醚-8-O-β-D-吡喃葡萄苷的含量； 3)计算F值判断待检测的制何首乌是否炮制完全，F值按式(1)计算： F＝大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄苷含量+大黄素甲醚-8-O-β-D-吡喃葡萄苷含量/大黄素含量+大黄素甲醚含量 (1) 则有：当F≤0.6时，判断待检测的制何首乌为炮制完全的制何首乌；当F≥1.0，判断待检测的制何首乌为何首乌生品；当0.6＜F＜1，判断待检测的制何首乌为炮制不完全的制何首乌。 2.根据权利要求1所述的基于一测多评法鉴别制何首乌的方法，其特征在于，F值的变化与炮制加工时间相关，何首乌生品炮制时间≥8h，F值≤0.6。 3.根据权利要求1所述的基于一测多评法鉴别制何首乌的方法，其特征在于，高效液相色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，以0.1％磷酸水溶液为流动相B，检测波长为254nm。 4.根据权利要求3所述的基于一测多评法鉴别制何首乌的方法，其特征在于，采用高效液相色谱梯度洗脱时，流动相A与流动相B的变化比例如下： 0～8min，流动相A：18％～30％、流动相B：70％～82％； 8～24min，流动相A：30％～36％、流动相B：64％～70％； 24～28min，流动相A：36％～80％、流动相B：20％～64％； 28～39min，流动相A：80％～95％、流动相B：5％～20％； 39～40min，流动相A：18％～95％、流动相B：5％～82％； 40～45min，流动相A：18％、流动相B：82％。 5.根据权利要求1所述的基于一测多评法鉴别制何首乌的方法，其特征在于，步骤1)所述相对校正因子计算方法为：以大黄素作为内标物，按下式(2)计算大黄素甲醚、大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷和大黄素甲醚-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的相对校正因子fkm；其中，Ak为大黄素峰面积；Wk为大黄素浓度；Am为其他待测组分的峰面积；Wm为其他待测组份的浓度；k为大黄素，m为其他待测组分，fk为大黄素的校正因子，fm为其他待测组分的校正因子。 6.根据权利要求5所述的基于一测多评法鉴别制何首乌的方法，其特征在于，大黄素、大黄素甲醚、大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄苷和大黄素甲醚-8-O-β-D-吡喃葡萄苷的相对保留时间及相对校正因子如下： 7.根据权利要求1所述的基于一测多评法鉴别制何首乌的方法，其特征在于，步骤2)中，供试品溶液是向1g待检测的制何首乌粉末加入50mL甲醇，加热回流处理1h，冷却制得。 8.根据权利要求1所述的基于一测多评法鉴别制何首乌的方法，其特征在于，步骤2)中，对照品溶液是将大黄素溶于甲醇中制成浓度为30μg/ml的溶液。
所属类别：	发明专利