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原文传递一测多评法评价小蓟质量的方法

专利名称：	一测多评法评价小蓟质量的方法
摘要：	本发明提供一种一测多评法评价小蓟质量的方法，首先建立小蓟中4种主要药效成分的HPLC含量测定方法，以芦丁作为内参物，计算其他3种活性成分的相对校正因子，并考察相对校正因子的系统适用性和方法重现性，根据相对保留时间进行色请峰定位，再结合相对校正因子算各待测成分的含量，通过一测多评法与外标法的相互验证，证明含量测定结果无显著差异。本发明方法克服了对照品成本高、不易得等难题，通过相对校正因子及色谱峰定位计算指标成分含量，实现小蓟中多种药效物质的同步测定，可节省成本、简化操作，提高效率，且检测灵敏度高，稳定性好，测定结果准确可靠，对小蓟质量控制和临床疗效的保证具有重大意义。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	陕西;61
申请人：	西安医学院
发明人：	张寒;郑梦迪;张彦;刘春叶;刘洁;翟西峰
专利状态：	有效
申请日期：	2019-04-04T00:00:00+0800
发布日期：	2019-07-09T00:00:00+0800
申请号：	CN201910272363.3
公开号：	CN109991327A
代理机构：	西安弘理专利事务所
代理人：	宁文涛
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	710021 陕西省西安市碑林区含光北路74号
主权项：	1.一测多评法评价小蓟质量的方法，其特征在于，具体按照以下步骤进行：步骤1、对照品标准溶液制备步骤1.1、分别取芦丁标准品、蒙花苷标准品以及木犀草素标准品和芹菜素标准品，用甲醇溶解后置于容量瓶、定容，即得芦丁标准溶液、蒙花苷标准溶液、木犀草素标准溶液以及芹菜素标准溶液；步骤1.2、分别取一定量的芦丁标准溶液、蒙花苷标准溶液、木犀草素标准溶液以及芹菜素标准溶液混合后置于容量瓶中，用甲醇定容，得到混合对照品溶液；步骤2、供试品溶液制备称取小蓟药材，置于索氏提取器中，加入石油醚，水浴加热脱脂至无色后晾干，将晾干后的小蓟药材再置于索氏提取器中，加入甲醇，水浴加热提取，将提取液置于容量瓶中，加甲醇定容至刻度，得到供试品溶液，备用；步骤3、高效液相色谱测定取步骤1.2中制备的混合对照品溶液和步骤2中制备的供试品溶液，进行色谱条件检测分析，得到混合对照品溶液的高效液相色谱图和供试品溶液的液相色谱图；其中，色谱条件如下：色谱柱：Agilent HC-C18；柱温：25℃-35℃；检测波长：260nm-350nm；流动相：甲醇为流动相A，0.1％冰醋酸水为流动相B；梯度洗脱70min：步骤4、目标化合物的含量计算步骤4.1、利用混合对照品溶液的高效液相色谱图，计算各色谱峰的峰面积，以芦丁为内参物，根据相对校正因子计算公式分别计算蒙花苷、木犀草素和芹菜素的相对校正因子；其中，Cs为内参物质量浓度，As为内参物色谱峰面积，Ck为其它成分质量浓度，Ak为其他成分色谱峰面积；步骤4.2、对供试品溶液的高效液相色谱图中芦丁、蒙花苷、木犀草素和芹菜素相对保留时间进行峰定位，并结合步骤4.1中得到的蒙花苷、木犀草素和芹菜素的相对校正因子，计算供试品溶液中蒙花苷、木犀草素和芹菜素的含量。 2.根据权利要求1所述的一测多评法评价小蓟质量的方法，其特征在于，所述步骤1.1中芦丁标准溶液的浓度为0.50mg/mL、蒙花苷标准溶液的浓度为0.05mg/mL、木犀草素标准溶液的浓度为0.51mg/mL，芹菜素标准溶液的浓度为0.41mg/mL。 3.根据权利要求1或2所述的一测多评法评价小蓟质量的方法，其特征在于，所述步骤1.2中的混合对照品溶液中芦丁的浓度为0.050mg/mL、蒙花苷的浓度为0.005mg/mL、木犀草素的浓度为0.051mg/mL、芹菜素的浓度为0.041mg/mL。 4.根据权利要求1所述的一测多评法评价小蓟质量的方法，其特征在于，所述步骤2中脱脂时的水浴温度为60℃。 5.根据权利要求1或4所述的一测多评法评价小蓟质量的方法，其特征在于，所述步骤2中提取时的水浴温度为50℃-90℃。 6.根据权利要求5所述的一测多评法评价小蓟质量的方法，其特征在于，所述步骤2中水浴提取的时间为1h-5h。 7.根据权利要求6所述的一测多评法评价小蓟质量的方法，其特征在于，所述步骤2中小蓟药材、石油醚和甲醇的质量比为1:5-10:8-20。 8.根据权利要求1所述的一测多评法评价小蓟质量的方法，其特征在于，所述步骤3中高效液相色谱流动相流速为0.8ml/min-1.5ml/min；进样量为10μL-20μL。
所属类别：	发明专利