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原文传递一测多评法评价白蔹质量的方法

专利名称：	一测多评法评价白蔹质量的方法
摘要：	本发明提供一种一测多评法评价白蔹质量的方法，首先建立白蔹中3种主要药效成分的HPLC含量测定方法，以白藜芦醇作为内参物，计算其他2种活性成分的相对校正因子，并考察相对校正因子的系统适用性和方法重现性，根据相对保留时间进行色请峰定位，再结合相对校正因子算各待测成分的含量，通过一测多评法与外标法的相互验证，证明含量测定结果无显著差异。本发明方法克服了对照品成本高、不易得等难题，通过相对校正因子及色谱峰定位计算指标成分含量，实现白蔹中多种药效物质的同步测定，可节省成本、简化操作，提高效率，且检测灵敏度高，稳定性好，测定结果准确可靠，对白蔹质量控制和临床疗效的保证具有重大意义。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	陕西;61
申请人：	西安医学院
发明人：	张寒;郑梦迪;张彦;张剑;柯云
专利状态：	有效
申请日期：	2019-04-04T00:00:00+0800
发布日期：	2019-07-09T00:00:00+0800
申请号：	CN201910272394.9
公开号：	CN109991329A
代理机构：	西安弘理专利事务所
代理人：	宁文涛
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	710021 陕西省西安市碑林区含光北路74号
主权项：	1.一测多评法评价白蔹质量的方法，其特征在于，具体按照以下步骤进行：步骤1、对照品标准溶液制备步骤1.1、分别取没食子酸标准品、白藜芦醇标准品以及原儿茶酸标准品，用甲醇溶解后置于容量瓶、定容，即得没食子酸标准溶液、白藜芦醇标准溶液以及原儿茶酸标准溶液；步骤1.2、分别取一定量的没食子酸标准溶液、白藜芦醇标准溶液以及原儿茶酸标准溶液混合后置于容量瓶中，用甲醇定容，得到混合对照品溶液；步骤2、供试品溶液制备将白蔹粉碎，过40目筛网，经提取、抽滤后，将滤液置于水浴锅上蒸干得滤渣，将滤渣溶解于甲醇后置于容量瓶、定容后，过微孔滤膜，备用；步骤3、高效液相色谱测定分别取步骤1.2中制备的混合对照品溶液与步骤2中制备的供试品溶液，注入高效液相色谱仪中进行测试，得到混合对照品溶液的高效液相色谱图和供试品溶液的高效液相色谱图；其中，色谱条件如下：色谱柱：Agilent HC-C18；柱温：25℃-35℃；检测波长：280-320nm；流动相：乙腈为流动相A，0.2％磷酸水溶液为流动相B，梯度洗脱过程如下：步骤4、目标化合物的含量计算步骤4.1、利用混合对照品溶液的高效液相色谱图，计算各色谱峰的峰面积，并以白藜芦醇为内参物，根据相对校正因子计算公式分别计算没食子酸、原儿茶酸的相对校正因子；其中，Cs为内参物质量浓度，As为内参物色谱峰面积，Ck为其它成分质量浓度，Ak为其他成分色谱峰面积，fs/k为校正因子，取平均值作为定量用；步骤4.2、对供试品溶液的高效液相色谱图中白藜芦醇、没食子酸和原儿茶酸的相对保留时间进行峰定位，并结合步骤4.1中得到的没食子酸和原儿茶酸的相对校正因子，计算供试品溶液中没食子酸与原儿茶酸的含量。 2.根据权利要求1所述的一测多评法评价白蔹质量的方法，其特征在于，所述步骤1中没食子酸标准溶液的浓度为0.100mg/ml，白藜芦醇标准溶液的浓度为0.416mg/ml，原儿茶酸标准溶液的溶度为0.416mg/ml，混合对照品溶液中没食子酸的浓度为0.040mg/ml，白藜芦醇的浓度为0.0416mg/ml，原儿茶酸的溶度为0.083mg/ml。 3.根据权利要求1所述的一测多评法评价白蔹质量的方法，其特征在于，所述步骤2中白蔹供试品的提取过程为：精密称取白蔹过筛粉末，加入75％的乙醇，称重后，超声或者回流提取，用75％的乙醇溶剂补足失重，抽滤。 4.根据权利要求1所述的一测多评法评价白蔹质量的方法，其特征在于，所述步骤3中高效液相色谱的流动相流速为0.5mL/min-1.5mL/min，进样量为10μL-20μL。 5.根据权利要求1所述的一测多评法评价白蔹质量的方法，其特征在于，所述步骤2中水浴锅的温度为80℃-90℃。 6.根据权利要求1所述的一测多评法评价白蔹质量的方法，其特征在于，所述步骤2中微孔滤膜的孔径为0.22μm-0.45μm。 7.根据权利要求3所述的一测多评法评价白蔹质量的方法，其特征在于，所述75％的乙醇与白蔹过筛粉末的质量比为5-10:1。 8.根据权利要求7所述的一测多评法评价白蔹质量的方法，其特征在于，所述回流或超声时间为0.5h-2h。 9.根据权利要求1-8任一项所述的一测多评法评价白蔹质量的方法，其特征在于，所述供试品为白蔹药材、炮制品、提取物或相关制剂。
所属类别：	发明专利