详情

原文传递一种应用指纹图谱区别降香黄檀中油梨和糠梨的方法

专利名称：	一种应用指纹图谱区别降香黄檀中油梨和糠梨的方法
摘要：	本发明公开了一种应用指纹图谱区别降香黄檀中油梨和糠梨的方法，将降香黄檀的供试品溶液进行高效液相色谱检测，获得指纹图谱；将保留时间45.414min±0.5min内，面积最大的特征峰作为参照峰；若指纹图谱至少包含tg分别是0.431、0.601、0.872、1的四个峰，且tg为1的峰是峰面积最大的峰，那么降香黄檀为油梨；若指纹图谱至少包含tg为1和1.452这两个峰，且tg为1.452的峰是峰面积最大的峰，且不同时包含tg分别是0.431、0.601、0.872的峰，那么降香黄檀为糠梨。该方法操作简便，取样量少，准确快速，适用性强，特别适合不能破坏的成品家具、高档工艺品的材种鉴别。
专利类型：	发明专利
国家地区组织代码：	广东;44
申请人：	汕头出入境检验检疫局检验检疫技术中心
发明人：	魏建华;魏霜;吴剑光;刘碧琳;刘玉莉
专利状态：	有效
申请日期：	2019-03-28T00:00:00+0800
发布日期：	2019-07-16T00:00:00+0800
申请号：	CN201910243631.9
公开号：	CN110018250A
代理机构：	上海旭诚知识产权代理有限公司
代理人：	郑立
分类号：	G01N30/02(2006.01);G;G01;G01N;G01N30
申请人地址：	515031 广东省汕头市大华路11号主楼
主权项：	1.一种应用指纹图谱区别降香黄檀中油梨和糠梨的方法，其特征在于，将降香黄檀的供试品溶液进行高效液相色谱检测，获得所述指纹图谱；其中将保留时间45.414min±0.5min内，面积最大的特征峰作为参照峰；若所述指纹图谱至少包含相对保留时间tg分别是0.431、0.601、0.872、1的四个峰，并且其中相对保留时间tg为1的特征峰是所述指纹图谱中峰面积最大的特征峰，那么所述降香黄檀为油梨；若所述指纹图谱至少包含相对保留时间tg为1和1.452这两个峰，且相对保留时间tg为1.452的特征峰是所述指纹图谱中峰面积最大的特征峰，且不同时包含相对保留时间tg分别是0.431、0.601、0.872的峰，那么所述降香黄檀为糠梨。 2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，降香黄檀的所述供试品溶液通过如下操作获得：称取降香黄檀心材部分木屑，加入甲醇、高纯水，震摇，超声提取，滤纸过滤，微孔滤膜过滤，得到降香黄檀的所述供试品溶液。 3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，降香黄檀的所述供试品溶液通过如下操作获得：称取降香黄檀心材部分木屑0.2g，置于50mL离心管中，加入5mL甲醇、5mL高纯水，震摇5min，超声提取5min，滤纸过滤，再以0.2μm的微孔滤膜过滤，得到降香黄檀的所述供试品溶液。 4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述指纹图谱具体通过如下操作获得：将降香黄檀的所述供试品溶液进行HPLC检测，色谱条件为：Agilent Eclipse XDB-C18，填料粒径5μm，柱长250mm，柱内径4.6mm；以水为流动相A，乙腈为流动相B，采用梯度洗脱方式：从0～20min，流动相B的体积百分含量由8％提高至23％，流动相A的体积百分含量由92％降低至77％；从20～33min,流动相B的体积百分含量为23％，流动相A的体积百分含量为77％；从33～43min，流动相B的体积百分含量由23％提高至30％，流动相A的体积百分含量由77％降低至70％；从43～53min,流动相B的体积百分含量30％，流动相A的体积百分含量为70％；从53～69min，流动相B的体积百分含量由30％提高至38％，流动相A的体积百分含量由70％降低至62％；从69～76min，流动相B的体积百分含量38％，流动相A的体积百分含量为62％；从76～91min，流动相B的体积百分含量由38％提高至49％，流动相A的体积百分含量由62％降低至51％；从91～92min，流动相B的体积百分含量49％，流动相A的体积百分含量为51％；从92～95min，流动相B的体积百分含量由49％降低至8％，流动相A的体积百分含量由51％提高至92％；从95～103min，流动相B的体积百分含量8％，流动相A的体积百分含量为92％；检测波长为290nm；柱温30℃；流速1.0mL/min；得到HPLC检测结果，即所述指纹图谱。 5.一种区别降香黄檀中油梨和糠梨的指纹图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一、制备供试品溶液；步骤二、进行HPLC检测；步骤三、分别分析比较多批来源不同的降香黄檀中油梨和糠梨的HPLC检测结果，得到油梨的共有峰构成数据和糠梨的共有峰构成数据，并对比，得到所述区别降香黄檀中油梨和糠梨的指纹图谱；所述区别降香黄檀中油梨和糠梨的指纹图谱具有5个特征峰，其中以保留时间45.414min±0.5min内，面积最大的特征峰作为参照峰，5个所述特征峰的相对保留时间tg分别是0.431、0.601、0.872、1、1.452。 6.如权利要求5所述的构建方法，其特征在于，所述步骤一具体为：称取供试品心材部分木屑，加入甲醇、高纯水，震摇，超声提取，滤纸过滤，微孔滤膜过滤，得到所述供试品溶液。 7.如权利要求5所述的构建方法，其特征在于，所述步骤二具体为：将所述步骤一得到的供试品溶液进行HPLC检测，色谱条件为：Agilent Eclipse XDB-C18，填料粒径5μm，柱长250mm，柱内径4.6mm；以水为流动相A，乙腈为流动相B，采用梯度洗脱方式：从0～20min，流动相B的体积百分含量由8％提高至23％，流动相A的体积百分含量由92％降低至77％；从20～33min,流动相B的体积百分含量为23％，流动相A的体积百分含量为77％；从33～43min，流动相B的体积百分含量由23％提高至30％，流动相A的体积百分含量由77％降低至70％；从43～53min,流动相B的体积百分含量30％，流动相A的体积百分含量为70％；从53～69min，流动相B的体积百分含量由30％提高至38％，流动相A的体积百分含量由70％降低至62％；从69～76min，流动相B的体积百分含量38％，流动相A的体积百分含量为62％；从76～91min，流动相B的体积百分含量由38％提高至49％，流动相A的体积百分含量由62％降低至51％；从91～92min，流动相B的体积百分含量49％，流动相A的体积百分含量为51％；从92～95min，流动相B的体积百分含量由49％降低至8％，流动相A的体积百分含量由51％提高至92％；从95～103min，流动相B的体积百分含量8％，流动相A的体积百分含量为92％；检测波长为290nm；柱温30℃；流速1.0mL/min；得到HPLC检测结果。 8.如权利要求5所述的构建方法，其特征在于，所述步骤三具体为：分别将所述多批来源不同的油梨和糠梨的HPLC检测结果导入国家药典委员会颁布的“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”，选取时间窗宽度为0.2min，以中位数生成对照谱图，经过多点校正后自动匹配，分别生成油梨和糠梨指纹图谱共有模式，获得各自的对照谱图，合并所述各自的对照谱图，得到所述区别降香黄檀中油梨和糠梨的指纹图谱。 9.如权利要求8所述的构建方法，其特征在于，在所述油梨指纹图谱共有模式中有17个共有峰，保留时间分别为10.194min、19.575min、24.208min、25.627min、27.305min、28.141min、31.900min、33.785min、38.336min、39.618min、41.636min、45.414min、47.237min、48.495min、54.045min、56.92min、61.009min；在所述糠梨指纹图谱共有模式中有6个共有峰，保留时间分别为24.269min、45.457min、47.308min、61.786min、65.923min、69.918min，其中两者共同含有的共有峰的保留时间是45.414min±0.5min，且该特征峰是油梨整个样品指纹图谱中峰面积最大峰。 10.如权利要求8所述的构建方法，其特征在于，还包括步骤四、从所述区别降香黄檀中油梨和糠梨的指纹图谱中找到区别油梨和糠梨的特征：计算所述多批来源不同的油梨和糠梨的HPLC检测结果与其指纹图谱共有模式的相似度；以油梨和糠梨保留时间是45.414min±0.5min内的共有峰作为参照峰，分别列出所述相似度在0.8以上的油梨样品共有峰的相对保留时间和所述相似度在0.8以上的糠梨样品共有峰的相对保留时间，找到区别油梨和糠梨的特征。
所属类别：	发明专利