详情

原文传递新型冠状病毒抗体检测用检测试剂卡及其制备方法

专利名称：	新型冠状病毒抗体检测用检测试剂卡及其制备方法
摘要：	本发明涉及一种新型冠状病毒抗体检测用检测试剂卡，其包括样品垫、量子垫、硝酸纤维素膜、吸水纸和衬板，量子垫上包被有量子点微球标记的抗人IgM抗体或IgG抗体，硝酸纤维素膜上设置的检测线上包被有SARS‑COV2重组抗原，质控线上包被有羊抗鼠IgG。本发明提供的用于检测新型冠状病毒(SARS‑COV2)IgM抗体或IgG抗体的检测试剂卡，能够快速、准确的得到结果，为临床上的COVID‑19提供辅助诊断。
专利类型：	发明专利
申请人：	重庆新赛亚生物科技有限公司
发明人：	张念林;何乐春;胡昌华;左云国;孙婵
专利状态：	有效
申请日期：	1900-01-20T23:00:00+0805
发布日期：	1900-01-20T22:00:00+0805
申请号：	CN202010109842.6
公开号：	CN111190005A
代理机构：	重庆萃智邦成专利代理事务所(普通合伙)
代理人：	舒梦来;竺栋
分类号：	G01N33/569;G01N33/558;G01N33/543;G01N33/533;G;G01;G01N;G01N33;G01N33/569;G01N33/558;G01N33/543;G01N33/533
申请人地址：	400700 重庆市北碚区京东方大道388号
主权项：	1.一种新型冠状病毒抗体检测用检测试剂卡，其包括样品垫(1)、量子垫(2)、硝酸纤维素膜(3)、吸水纸(4)和衬板(5)，其特征在于：所述的样品垫(1)、量子垫(2)、硝酸纤维素膜(3)、吸水纸(4)依次粘贴在衬板(5)上，所述量子垫(2)的一端设在样品垫(1)的一端与衬板(5)之间，另一端设在硝酸纤维素膜(3)上，所述硝酸纤维素膜(3)的一端设在量子垫(2)的一端与衬板(5)之间，另一端设在吸水纸(4)的一端与衬板(5)之间；所述的量子垫(2)上包被有量子点微球标记的抗人IgM抗体或者抗人IgG抗体；所述的硝酸纤维素膜(3)上自样品垫(1)所在侧向着吸水纸(4)所在侧依次设置有检测线(6)和质控线(7)，所述的检测线(6)上包被有SARS-COV2重组抗原，所述的质控线(7)上包被有羊抗鼠IgG。 2.根据权利要求1所述的新型冠状病毒抗体检测用检测试剂卡，其特征在于：所述的SARS-COV2重组抗原的浓度为0.8～1mg/mL。 3.根据权利要求1所述的新型冠状病毒抗体检测用检测试剂卡，其特征在于：所述的量子点微球包括量子点聚苯乙烯微球、沉积在量子点聚苯乙烯微球表面的一层或多层聚电解质层，所述的聚电解质层包括由聚丙烯胺盐酸盐形成的内层以及由聚苯乙烯磺酸钠形成的沉积在内层表面的外层。 4.根据权利要求3所述的新型冠状病毒抗体检测用检测试剂卡，其特征在于：所述的量子点微球通过如下步骤制备得到： (1)将所述的量子点聚苯乙烯微球分散在水中，加入聚丙烯胺盐酸盐溶液，摇床孵化30～60min形成聚电解质层的内层，离心去除多余的聚丙烯胺盐酸盐； (2)将步骤(1)制得的形成有内层的量子点聚苯乙烯微球分散在水中，加入聚苯乙烯磺酸钠溶液，摇床孵化30～60min形成聚电解质层的外层，离心去除多余的聚苯乙烯磺酸钠； (3)选择性地重复步骤(1)和步骤(2)，得到量子点微球。 5.根据权利要求4所述的新型冠状病毒抗体检测用检测试剂卡，其特征在于：步骤(1)中，所述的量子点聚苯乙烯微球与聚丙烯胺盐酸盐的投料质量比为1：60～70；步骤(2)中，所述的形成有内层的量子点聚苯乙烯微球与聚苯乙烯磺酸钠的投料质量比为1：60～70。 6.根据权利要求1至5中任一项所述的新型冠状病毒抗体检测用检测试剂卡，其特征在于：所述的量子点微球中的量子点为CdSe/CdS和/或CdSe/ZnS。 7.根据权利要求1所述的新型冠状病毒抗体检测用检测试剂卡，其特征在于：所述的量子垫(2)为经过预处理的量子垫，所述的预处理的方法为：将量子垫(2)浸没在量子垫优化缓冲液中，然后干燥并控制湿度在30％以下，其中，所述的量子垫优化缓冲液包括浓度为45～55mmol/L的三羟甲基氨基甲烷、质量百分浓度为0.8～1.2％的牛血清白蛋白、质量百分浓度为0.4～0.6％的吐温20、质量百分浓度为1.8～2.2％的蔗糖、质量百分浓度为0.08～0.12％的proclin300、以及余量的纯化水。 8.一种如权利要求1至7中任一项所述的新型冠状病毒抗体检测用检测试剂卡的制备方法，其特征在于：包括如下步骤： (1)将所述的量子点微球分散在磷酸盐缓冲液中，然后加入抗体，10～40℃摇床孵化1.5～2.5h，再加入量子点微球封闭液，孵化2～3h，离心过滤得到量子点微球标记的抗体，其中，所述的量子点微球封闭液包括质量百分浓度为8～12％的牛血清白蛋白、质量百分浓度为0.04～0.06％的NaN3、以及余量的纯化水； (2)将步骤(1)制得的量子点微球标记的抗体用量子点稀释缓冲液稀释至0.4～0.6μmol/L，然后以0.8～1.2μL/cm的量喷涂在量子垫(2)上，干燥制得包被有量子点微球标记的抗体的量子垫(2)，其中，所述的量子点稀释缓冲液包括浓度为90～110mmol/L的三羟甲基氨基甲烷、质量百分浓度为0.8～1.2％的牛血清白蛋白、质量百分浓度为0.4～0.6％的吐温20、质量百分浓度为1.8～2.2％的蔗糖、质量百分浓度为0.08～0.12％的proclin300、以及余量的纯化水； (3)将硝酸纤维素膜(3)粘贴到衬板(5)上，将SARS-COV2重组抗原用印膜缓冲液稀释成0.8～1mg/mL，将羊抗鼠IgG用印膜缓冲液稀释成0.4～0.8mg/mL，然后分别以0.8～1.2μL/cm的量喷涂在硝酸纤维素膜(3)，干燥制得检测线(6)和质控线(7)，其中，所述的印膜缓冲液包括浓度为0.01～0.03mol/L、pH7～7.4的PBS缓冲液、质量百分浓度为0.8～1.2％的海藻糖、浓度为8～12mmol/L的乙二胺四乙酸、质量百分浓度为0.08～0.12％的proclin300； (4)将经步骤(3)处理后的粘贴有硝酸纤维素膜(3)的衬板(5)、样品垫(1)、经步骤(2)处理后的量子垫(2)、吸水纸(4)进行组装得到检测试剂卡。 9.根据权利要求8所述的新型冠状病毒抗体检测用检测试剂卡的制备方法，其特征在于：还包括对样品垫(1)进行预处理的步骤：将样品垫(1)浸没在样品垫优化缓冲液中，然后干燥并控制湿度在30％以下，其中，所述的样品垫优化缓冲液包括浓度为45～55mmol/L的三羟甲基氨基甲烷、质量百分浓度为0.4～0.6％的吐温20、质量百分浓度为0.08～0.12％的proclin300、以及余量的纯化水。 10.一种如权利要求1至7中任一项所述的新型冠状病毒抗体检测用检测试剂卡在新型冠状病毒抗体检测中的应用。
所属类别：	发明专利